[生物——选修3：现代生物科技专题]

   细胞工程与基因工程在生产实践中具有广泛的应用，如图是抗除草剂番茄的培育过程。请回答下列问题：

（1）将抗除草剂基因连接到运载体上需要用________酶，在基因表达载体中除含有抗除草剂基因、标记基因外还必需有________共五部分构成，其中标记基因的作用是________。

（2）农杆菌转化是利用农杆菌中Ti质粒上的T—DNA，使外源基因进入并整合到番茄细胞的________上。

（3）获得抗除草剂基因的番茄细胞经过________过程发育成转基因番茄幼苗。其理论基础是________。

（4）在培养过程中，除添加必要的营养物质，还需要向培养基中添加________等物质，作用是________。

下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。请据图回答下列问题：

限制酶ApaⅠ      EcoRⅠ            PstⅠ        SmaⅠ识别序列和切割位点

[选修3：现代生物科技专题]

回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中         ，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的           键。

（3）组成基因表达载体的单体是           。基因表达载体中的启动子是       识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过        （填过程）合成mRNA。

（4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？                 。

（5）将受体细胞培养成植株需要应用             技术，该技术的理论依据是            。

紫杉醇是新型抗癌药物，能与细胞微管蛋白结合，具有促进微管聚合，抑制微管解聚的功能，从而起到抗癌作用。

（1）细胞进行有丝分裂时需要微管聚合和解聚的正常动态平衡，从而在有丝分裂的          期染色体能够随微管解聚产生的拉力和微管聚合产生的推力，向两极移动。紫杉醇通过影响癌细胞在有丝分裂时        的形成，导致染色体数目异常，从而抑制了癌细胞分裂和增殖。

（2）紫杉醇是红豆杉的细胞代谢产物，可从红豆杉中提取，但红豆杉生长十分缓慢，数量有限且紫杉醇含量非常低。因此，研究人员尝试运用现代生物技术获取紫杉醇。

①传统提取紫杉醇的过程中会产生大量废弃物，经研究发现酶A可将废弃物部分转化为紫杉醇，但酶A活性较低，研究人员成功获得能表达高活性酶A的目的基因，并利用基因工程技术导入            （大肠杆菌/酵母菌）细胞中，最终获得高活性酶A，从而提高紫杉醇转化量。

②研究人员欲通过植物组织培养获得紫杉醇，分别剪取曼地亚红豆杉和南方红豆杉的幼芽和嫩叶，作为外植体，在无菌条件下             （填“避光”或“照光”）培养，经          形成愈伤组织。记录实验数据，计算出愈伤组织诱导率，如下图。

（3）由上图可知，同一品种红豆杉以           （部位）作为实验材料愈伤组织的诱导率较高，这可能是因为                。

（4）从实验数据可知，选择           作为实验材料并用           号培养基培养，更易获得愈伤组织，从而大量生产紫杉醇。

下图表示五种不同的育种方法示意图，请根据图回答下面的问题：

(1)图中A、D方向所示的途径表示      育种方式，其中从F₁到F₂再到F_n连续多代自交的目的是为了提高            的含量，且从F₂开始逐代进行人工选择是为了淘汰       ；A→B→C的途径表示         育种方式。比较两种育种方式，后者的优越性主要表现在      。

(2)B常用的方法                  。

(3)E方法所运用的原理是             。

(4)C、F过程中最常采用的药剂是        。

(5)由G→J的过程中涉及到的生物工程技术有：植物组织培养和__________      _。

  （1）在构建基因表达载体时，除了要在重组DNA中插入目的基因外，还需要有______________、_____________和_______________。

  （2）在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法叫做______________。

  （3）从图中可见，mRNA1和mRNA2的结合直接导致了____________________无法合成，最终使番茄获得了抗软化的性状。

  （4）普通番茄细胞导入目的基因后，先要接种到诱导培养基上培养，经___________过程后得到________________，然后再转接到分化培养基上，诱导出试管苗，然后进一步培养成正常植株。获得的转基因植物经有性生殖获得的后代，是否也具有转基因特性？___________。

  （5）利用基因工程进行育种，可以培育出具有新性状的植株，这种育种方式的优点是

①                            ；②                              。

某Ti质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此Ti质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示，请回答下列问题。

(1)将抗盐基因导入烟草细胞内，使烟草植株产生抗盐性状，这种新性状（变异）的来源属于________。

(2)在构建重组质粒时，为保证目的基因和运载体的定向连接，选用________和________两种限制酶切割。

(3)为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

①图示培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A中还含有___________。

②从检测筛选的结果分析，选择菌落________(填数字)中的细菌导入植物细胞。

（4）为了确定抗盐烟草是否培育成功，需要进一步做检测,进行如下图所示的操作.

①使用                       作探针进行分子杂交;

②将薄膜曝光在显微胶片上,胶片显影结果上所对应培养皿中相应位置的细胞    (含/不含)目的基因.

(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株所需要技术的原理是             。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

转基因草莓中有能表达甲肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防甲肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：

（1）这种新型疫苗，在免疫学中属于__________，图中①过程所形成的B叫做________________。

（2）该培育过程中，将目的基因导入受体细胞的方法是_____________，之所以把目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，是利用了T-DNA_____________的特点。

（3）图中④过程叫做__________，将叶盘培养成草莓幼苗所利用的生物学原理是___________________。

（4）甲肝病毒表面抗原基因能否在草莓植株内稳定遗传的关键是目的基因是否插入到了受体细胞的染色体DNA上，通常采用_____________的方法进行检测。

（5）甲肝病毒表面抗原基因在草莓细胞内表达的过程是__                           。

（1）④过程应用了_______技术，E幼苗的获得利用了细胞______________________。

（2）过程④⑤的育种方法是_______，依据的遗传学原理是______________。

（3）若C品种的基因型为AaBbdd，D植株中能稳定遗传的个体占总数的___________。

（4）⑤过程使染色体数目加倍的方法是用________处理或_______________，这两种方法在原理上的相似之处是______________。

（5）若C作物为水稻，非糯性和糯性是一对相对性状，经过③过程形成的花粉粒加碘液染色，显微镜下观察，一半花粉呈现蓝黑色，另一半呈现橙红色，实验结果验证了________________定律

(1)   按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为______和________两类。上述培养基中，6-BA属于______类生长调节剂。
(2)在该实验中，自变量是______，因变量是______，自变量的取值范围是_______。
(3)从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是______号培养基。
(4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入________(填“6-BA”或“IAA”)。