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            • 1.

              转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点,据图回答下列问题。


              (1)若要获得抗病基因,可用_____________限制酶切,不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割,因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。切割质粒与获取目的基因用的是___________(相同、不同)的限制酶。切割好的质粒与目的基因需要在_______________酶的作用下形成含抗病基因的重组DNA分子。

              (2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有__________________基因作为标记基因。

              (3)图中将重组DNA分子导入香蕉受体细胞用到的方法是_____________法。

              (4)为了进一步确定目的基因是否翻译成蛋白质,可用的检测方法是________。

              (5)图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________________的方法,可培育成能表现新性状的植株。图中①到②表示______过程,②到③表示______过程。

            • 2.

              转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因,由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗,其培育过程如图所示(①至④代表过程,A至C代表结构或细胞):

              (1)②过程常用________处理农杆菌,使之成为________细胞,利于完成转化过程。

              (2)图中③过程叫做________,④过程叫做________,将叶盘培养成草莓幼苗的技术是________,此技术是植物细胞工程的另一项技术:                 的基础。

              (3)在分子水平上,可采用______的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原,之前的导入检测方法是:_______________技术。如果目的基因是植物的抗盐碱性基因,则需将植株种植在盐碱地中观察生长状况,这属于 ____________水平的检测。

              (4)从题中可以看出这种新型疫苗的化学本质是___________,在免疫学中属于________。

            • 3.

              图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示体外受精培育优质奶牛的过程;图3表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程。请据图回答下面的问题。

               


              ⑴ 在图1中注射到小鼠体内的物质是__________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞,此类细胞的特点是__________________。

              ⑵ 图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和获能的过程,才能与达到__________期的卵子受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛,可对图2中囊胚中的__________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在__________(填“体内”或“体外”)完成的。

              ⑶ 图3中过程①是植物细胞形成__________________的阶段,该阶段所用的酶是__________________________。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是__________(填图中序号)。

            • 4. 下面是植物组织培养的过程图,请据图回答下面的问题。
               

              (1)由①被培养成为④的根本原因是___________________________。

              (2)若用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物“紫草素”,培养可以进行到步骤(填编  号)___________。

              (3)若想制作人工种子,应该选用(填编号)___________________。

              (4)若①是花粉则④叫做_________________植株。

              (5)若①是胡萝卜根尖细胞,则培养成的④的叶片颜色是_____________。

            • 5.

              屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后,偶然发现一株高产高效植株,进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。


              (1)如果用高产青蒿关键酶基因的mRNA反转录产生的cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中,这个受体菌群叫做青蒿的________;获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列________(填“相同”或“不同”)。在提取RNA时需要向提取液中添加RNA酶抑制剂,其目的是_________。

              (2)将获得的突变基因导人普通青蒿之前,先构建基因表达载体,图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答:

              用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用Sma Ⅰ切割,原因是_________。构建重组质粒时在其目的基因前需要添加特定的启动子,启动子的作用是_______________。

              (3)基因表达载体导入组织细胞后,要通过植物组织培养技术培育出青蒿幼苗,该技术的关键步骤是____________。鉴定该基因工程是否成功还要进行___________实验,但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察,其原因是_________。

            • 6.

              科学家从某细菌中提取抗盐基因,转入烟草并培育成转基因抗盐烟草。下图是转基因抗盐烟草的培育过程,含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点。请分析回答下列问题:

              (1)在该过程中,研究人员首先获取了抗盐基因(目的基因),并采用____________技术对目的基因进行扩增,在该反应体系中需加入________、模板序列、原料及两种________。然后构建基因表达载体,基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外,还需具有__________________。

              (2)用图中的质粒和目的基因构建重组质粒,不能使用SmaⅠ酶切割,原因是____________。图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化,应选用________________酶对外源DNA、质粒进行切割。

              (3)为确定转基因抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的__________________作探针进行分子杂交检测,又要在个体水平上鉴定,后者具体过程是____________________。

            • 7. 通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等。据图甲、表乙回答问题:(7分)

              表乙:植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况

               

              (1)离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是__________。

              (2)有植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构,若包上人造种皮,制成人工种子,可能解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。胚状体来源于离体的植物体细胞,其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中[    ]___________和[     ]________过程,在此过程中被培养的细胞始终受_________的调节([  ]填序号)。

              (3)应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株,其原因是_____________。

              (4)从表乙的实验结果可看出:吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的二种重要物质。其中,新芽形成必须的条件是________________;而在培养形成完整新个体过程中,对它们的调控关键是________________。

            • 8.

              科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番肺和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示,请据图回答下列问题:

              (1)过程①常用的酶是________________,细胞融合完成的标志是____________________________________。

              (2)植物体细胞杂交依据的生物学原理有__________________________________________。

              (3)植物原生质体融合过程常利用化学试剂__________诱导融合,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____________种不同的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况),当观察到______________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。

              (4)过程④中的培养基常添加的植物激素是______________________________。

              (5)若番茄细胞内有m条染色体,马铃薯细胞内有n条染色体,则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含____________条染色体。

            • 9.

              回答下列(一)、(二)小题:

              (一)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶,质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

              (1)若要获得抗病基因,不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割,因为若在SmaⅠ位点进行切割会________________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用___________和_____限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

              (2)卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,重组质粒中应同时含有_________________基因,作为标记基因。

              (3)将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是_______________法。

              (4)图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________的方法,可培育成能表现新性状的植株,该方法依据的原理是:_______________________________。

              (二)图甲是抗寨卡病毒(一种RNA病毒)单克隆抗体制备的过程图,图乙是克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:

              (1)图甲和图乙所示的过程中,应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

              (2)图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术,其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

              (3)利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时,需要将重组DNA导入细菌细胞中,这一步骤常用的方法是____________。

              (4)核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

              (5)在制备单克隆抗体的过程中,进行了两次筛选,第一次筛选是利用HAT______(填“选择”或“鉴别”)培养基,由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存,故只有____________细胞能长期存活;第二次筛选获得____________。

              (6)通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

            • 10.

              I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落.回答下列问题:


              KH2PO4

              1.4g

              Na2HPO4

              2.lg

              MgS04•7H2O

              0.2g

              葡萄糖

              10.0g

              尿素

              1.0g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL



              (1)该培养基可筛选的细菌是______,判断的依据是______。
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养______(填“能”或“不能”),理由是__________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用______法接种.为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时,每一次划线前都要进行灼烧,目的是________________________。


              II.叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中,该技术能有效改良植物的品质。回答下列问题:

              (1)转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增,该技术的原理是_______________。

              (2)将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______,再将目的基因导入其中,最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

              (3)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,其遗传方式______  (填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传定律,不会随______(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而保持了母本的遗传特性。

              (4)来自原核生物中有重要价值的外源基因,无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达,原因是 _________________。

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