为培育出含β-胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题：

甲方案：β-胡萝卜素基因“黄金大米”

乙方案：

(1)甲方案中，β-胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是________________________________________________。若研究人员已知β-胡萝卜素基因序列，可采用________________方法获得β-胡萝卜素基因。②过程中可用________________技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β-胡萝卜素基因。

(2)乙方案中，在体细胞杂交前需要用__________酶除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用__________。通过⑤获得“黄金大米”幼苗需要经过___________两个过程，依据的原理是___________。在培养过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加________________。

(3)与传统育种方法相比，甲、乙两套方案共同的优点是_________________________________________________。

真题重组 判断正误

（1）甘油是极性分子，所以不能以自由扩散的方式通过细胞膜

（2）植物细胞通过主动运输吸收不同矿质离子的速率都相同

（3）植物主动运输矿质离子的过程只发生在活细胞中

（4）与白色花瓣相比，采用红色花瓣更有利于质壁分离现象的观察

（5）紫色洋葱鳞片叶外表皮不同部位观察到的质壁分离程度可能不同

紫色洋葱是生物学中常用的实验材料。它的叶分为两种：管状叶伸展于空中，进行光合作用；鳞片叶层层包裹形成鳞茎，富含营养物质。下面以洋葱为材料进行如下实验：

（1）若分离叶绿体中的色素，所用的实验材料是________。提取叶绿体中的色素使用的试剂是__________。分离色素依据的实验原理是__________。

（2）观察植物细胞的质壁分离和复原所用的最佳材料是__________，该实验的自变量是__________。

（3）若观察DNA、RNA在细胞中的分布，常用的理想材料为__________，该材料优于其他部位的原因是_____________________________________。

（4）若观察细胞的有丝分裂，所用的理想材料为__________，简要写出操作流程_____________________________________________________________。

（5）在“观察DNA、RNA在细胞中的分布”和“观察细胞的有丝分裂”两个实验中，都用到了盐酸，它在两个实验中的作用__________（相同、不同）。

现有甲、乙两个烟草品种(2n=48)，其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混,使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：

(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为_________和___________。

(2)将叶肉细胞制成原生质体时，常使用_________酶和_________酶去除细胞壁。在细胞融合技术中，常用的化学促融剂是__________________。

(3)在大于800勒克斯光照下培养，有______ 种细胞团不能分化(只考虑2个原生质体的相互融合)。能分化的细胞团发育成的植株，其染色体数是_______，基因型是_______。该植株自交后代中，在大于800勒克斯光照下，出现不能生长的植株的概率是________。

小立碗藓是一种苔藓植物,易培养,被广泛应用于生物学实验研究,又因其同源重组的效率很高,已成为研究基因功能的良好材料。请回答下列问题:

(1) 甲同学在使用高倍镜观察小立碗藓的叶绿体时,发现在适宜条件下细胞中的叶绿体长时间静止不动,最可能的原因是______。 

(2) 乙同学用小立碗藓进行了如下实验操作:

步骤一:在洁净的载玻片中央加一滴清水,放置一片小立碗藓的小叶,盖上盖玻片。

步骤二:从盖玻片一侧滴入0.3g·mL^-1的蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧_______,这样重复几次。 

步骤三:在显微镜下观察,若发现叶绿体向细胞中间聚拢,说明_____________。 

(3) 同源重组在细胞中可自然发生,交叉互换的位点必须发生在特定的同源序列中,原理如图1所示。已知由硫酸盐降解酶(K基因编码)催化某种硫酸盐(APS)的降解是高等植物中硫酸盐利用的关键步骤。有人提出,植物体中还存在着该硫酸盐降解的支路(PAPS),但不能确定其相关酶是否在植物体中存在。科研人员利用小立碗藓进行了以下研究:

图2

② 质粒pcDNA3上有Neo基因(新霉素抗性基因)和限制酶Sma Ⅰ、Tth11 Ⅰ和Bsm Ⅰ的酶切位点,如图2所示。为了使Neo基因能与K基因发生同源重组,应选用限制酶_______将Neo基因从质粒上切下来,然后在该基因的两侧增加与K基因两侧相同的____,构建具有Neo基因的表达载体。 

③ 制备小立碗藓的原生质体,将其放在____溶液中,利用聚乙二醇介导直接将Neo基因表达载体导入小立碗藓细胞内。 

④ 在添加了____的培养基中培养上述小立碗藓细胞,若能够发育成完整的植物体,则表明该植株已没有K基因。若通过此转化途径得到的植株__________,说明在小立碗藓中存在PAPS支路。