2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。

据图回答下列问题：

(1)由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射________激素，促使一次有更多的卵泡发育。

(2)重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备________。

(3)从受精卵到三亲婴儿的培育还需要________和________等技术。

(4)三亲婴儿的培育技术________(填“能”或“不能”)避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而________(填“能”或“不能”)避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。三亲婴儿的染色体________(填比例)来自母亲提供的细胞核。

(5)设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行____________________。

(6)我国对于“克隆人”这一技术总体上来说是禁止________性克隆，但不反对________性克隆。

下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是_________________。

(2)图甲中②过程常在___________诱导下完成(动物特有)，④过程与体外培养相比，其优点是____           ____________________________________________________________________。

(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_________________________。

(4)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是(   )   A．卵细胞大，便于操作                      B．卵细胞含有的营养物质多

   C．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达  D．重组细胞才具有全能性

 (5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能   (   )

   A．有选择地繁殖某一性别的家畜   B．繁殖家畜中的优良个体

   C．用于保存物种                 D．改变动物的核基因

科学家用转基因克隆技术将人的岩藻糖转移酶基因植入牛的基因组内，使其在牛奶中含有岩藻糖抗原。这种转基因牛奶可作为口服药，用来防治各种胃病，具有重要的医学价值和经济社会价值。转基因克隆牛的过程示意如下。

（1）上述流程图中用到的生物工程技术除基因工程外，还用到的技术有_____________、_____________、____________、___________________。

 (2)在岩藻糖转移酶的cDNA融合基因的首端需加上牛乳蛋白启动子序列，目的是______。

（3）在细胞核移植时通常选用_____________________时期卵母细胞作受体细胞。这个时期的卵母细胞可在母牛的_______________中直接获得。核移植成功后，用物理或化学方法激活受体细胞，目的是________________。

(4)重组细胞在发育培养液中培养，培养液成分除无机盐、有机盐、维生素、激素等营养物质外，还需特别添加________等物质，形成的早期胚胎一般要发育到______________阶段才进行移植，胚胎移植成功与否的关键是________。

GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：

（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是              。

（2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的               限制酶进行酶切。

（3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第  泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。

（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的          与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行         培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。

如图表示动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养）。请据图回答下列问题：

（1）0～A段的培养称为________培养，AB段可能发生了________现象。

（2）动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，动植物细胞都要进行________，不同的是植物细胞还要进行________

（3）为制备单克隆抗体，需将________注射到小鼠体内，以获取某种细胞，同时可选取图中________点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞，所选取细胞的细胞膜上________比正常细胞的少；为筛选能够产生单克隆抗体的杂交细胞，可用选择性培养基进行筛选。

实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示，根据动物细胞工程的相关知识，回答下列问题：

（1）动物细胞工程常用的技术手段中，________技术是其他动物细胞工程技术的基础，图中过程③为________，过程④为________。

（2）培养瓶的悬液中分散的细胞会贴附在瓶壁上，称为________。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为________。图中“细胞培养Ⅱ”中有少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得________，朝着等同于癌细胞的方向发展。

（3）在细胞内DNA合成一般有两条途径，主要途径是在细胞内以糖和氨基酸等为原料合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化作用合成DNA，而小鼠骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。利用DNA合成途径不同的特点配制的培养基中添加的________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用，筛选出来的杂交瘤细胞还要进行________和抗体检测，才能获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

[生物选修3：现代生物技术专题]

图甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是____________。

（4）核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

（5）在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，第一次筛选是利用HAT______（填“选择”或“鉴别”）培养基，由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存，故只有____________细胞能长期存活；第二次筛选获得____________。

（6）通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

以下为人工合成 reAnti 基因，转入猪成纤维细胞，做成转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）基因工程的核心是 ________  (用序号回答）

（2）基因工程基本工具之一的限制酶主要从原核生物中分离纯化出来，大多数限制酶的识别序列是由________个核苷酸组成。                                  

（3）在基因工程中使用的载体除质粒外，还有________、噬菌体衍生物等。

（4）目的基因进入受体细胞，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为 ________。                                                                                                                                  

（5）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞后，要通过 DNA 分子杂交技术，  来检测reAnti基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的________上。

（6）从猪中取胎儿成纤维细胞，用胰蛋白酶处理，然后进行分散培养。多数细胞生存的适宜 PH 范围是________。

（7）去核前的卵母细胞应培养到________期。其去核后与成纤维细胞通过电刺激后融合，形成重组细胞，再利用物理或化学方法刺激，使之完

成细胞________，在体外培养成重组早期胚胎。

（8）在进行过程⑦操作前，应用激素对受体母猪进行__________处理。

（1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。

（2）图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下，培养液中加入_________因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。

（3) 在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________的结果。

（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。

（5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是___________。

（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。

（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多次筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。

(1)小鼠胚胎干细胞分化成M细胞的过程中,遗传物质 (填“发生”或“不发生”)改变。 

(2)根据实验结果可以判定M细胞已具有 细胞的功能。 

(3)若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中,重组细胞能否分化为其他类型的细胞? 。请说明理由: 。