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            • 1.

              阅读下列材料并回答问题:

              材料甲:科学家将人胰岛素基因导入大肠杆菌,获得了能合成胰岛素的大肠杆菌。

              材料乙:科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得了诱导性多能干细胞(iPS细胞),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。

              材料丙:科学家将高产奶牛的受精卵发育成的胚胎移植到雌性普通黄牛体内,后者成功产出高产奶牛的犊牛。

              (1)材料甲涉及基因工程技术,基因工程的核心步骤是___________。需用Ca2+处理大肠杆菌,使细胞处于一种能吸收周围环境中___________的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。

              (2)材料乙中从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为___________,培养的细胞在贴壁生长增殖至充满培养皿底时停止分裂,这种现象称为___________。iPS细胞与ES细胞特点相似,如在功能上具有___________,有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的治疗。

              (3)材料丙涉及胚胎工程技术。在胚胎移植操作中,应对供体和受体母畜进行_____________处理,目的是______________________________,使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致,进行胚胎移植的优势是__________________________________________________。

            • 2. [生物-选修3:现代生物科技专题]
              1981年Evans和Kaufman首次成功分离出小鼠胚胎干细胞(ES细胞),医学界对其的研究虽颇有争议但也如火如荼.2008年1月17日《干细胞》杂志报道,美国加州的科学家使用了进行试管受精的年轻女性捐献的卵子去核,以及2名志愿者的皮肤成纤维细胞的细胞核,成功克隆出了5个人体胚胎,进而可以开发出有研究价值的干细胞.请回答下列问题.
              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至囊胚期的______或胎儿的______中分离得到的一类细胞.
              (2)上述过程中主要应用的动物细胞工程技术有______、______.
              (3)胚胎干细胞可诱导分化为皮肤干细胞,进而分化成皮肤细胞的根本原因是______.
              (4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的,骨髓移植治疗的实质是将______移植到患者体内.
              (5)在培养胚胎干细胞时,培养基中通常需要加入______等天然成分,培养过程中所需气体主要有______.
              (6)胚胎干细胞也可作为基因工程的受体细胞,将目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是______,将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是______.
            • 3.

              回答下列有关动物细胞培养的问题:

              (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的__________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是________________。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是____________。

              (2)在细胞培养过程中,通常在__________条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中___________的活性降低,细胞________________的速率降低。

              (3)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作__________进行攻击。

              (4)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不被染色,原因是___________________________________________。

            • 4.

              近日,我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题,成功培育出世界首个体细胞克隆猴。标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代,请回答与培育克隆动物有关的问题。

              (1)体细胞克隆猴是通过______技术得到的,即将供体细胞注入到_______内,透过电刺激等方法使两细胞融合,构建重组胚胎。

              (2)通过上述技术获得的胚胎,移植到同种的、_________的其他雌性猕猴体内,使之继续发育为体细胞克隆猴。

              (3)供体体细胞来自猕猴胎儿,从胎儿体内取出的组织用相应的酶处理一段时间,就会分散成单个体细胞,之后进行的初次培养称为___________,用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞,原因是_________________。

            • 5.

              据《自然》杂志介绍,日本研究人员利用实验鼠的胚胎干细胞人工培育出了名为“视杯”的视网膜雏形结构。据悉,在一种特殊的培养介质中,来自实验鼠的胚胎干细胞能逐渐发育成感光细胞、神经细胞等,进而形成视网膜的雏形结构。研究人员现正在测试该“视杯”是否真能感受光线刺激,并将相关神经信号传递给实验鼠的大脑。

              (1)实验鼠的胚胎干细胞________(填“具有”或“不具有”)细胞周期,可取白________。

              (2)利用实验鼠的胚胎干细胞能培育出视网膜雏形,其根本原理是________。该过程是否实现了细胞的全能性?________。在体外诱导培养时,“特殊的培养介质”中除了加入________等天然成分,很可能还应添加有________,以诱导胚胎干细胞向视网膜雏形分化。

              (3)用ATP合成酶基因作为探针,如果能与胚胎干细胞诱导培养过程中某细胞内的mRNA杂交,能否说明该细胞已发生分化?________,理由是________。

              (4)假如研究人员在对“视杯”细胞中的某种酶进行提取时,向“视杯”细胞悬液中加入一定量的pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,获得了破碎的“视杯”细胞。与生理盐水相比,使用缓冲液的优点:________。

            • 6. 1975年,英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的实验方案:把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合,得到的融合细胞就能大量增殖,产生足够数量的特定抗体。请回答下列问题:

              (1)从动物体内取出的组织块,需用________处理一段时间,这样组织就会分散成单个细胞。当细胞________(填“原代”或“传代”)培养至10~50代左右时,部分细胞的细胞核型可能发生变化,从而获得骨髓瘤细胞。在动物细胞培养基中加入血清、血浆等天然成分的原因是________。

              (2)制备单克隆抗体时,先用特定的选择性培养基进行筛选,获得________细胞;然后对上述细胞进行抗体检测,选取________的细胞克隆化培养;最终获得单克隆抗体。

              (3)有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,其过程是取经特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核,移植到去核的骨髓瘤细胞中,构成重组细胞。此方法________(填“能”或“不能”)获得既能分泌抗体,又能无限增殖的细胞,原因是________。

            • 7.

              回答下列关于现代生物科技的问题:

              (1)动物细胞培养时为了将组织分散成单个细胞,常用____________处理剪碎的组织块,并用培养液将细胞稀释制成____________。

              (2)动物细胞培养时需要通入5%的CO2,其目的是__________________。

              (3)动物细胞核移植时普遍使用的去核方法是______________;常选用处于________(时期)的卵母细胞作为受体细胞,主要是因为卵细胞大,易操作,含有促进______________表达的相关物质。

            • 8.

              科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为_________;培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂,这种现象称为_______。

              (2)图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为__________;也可从灰鼠体内取出卵子,通过_____________后进行早期胚胎培养获得。

              (3)图中重组囊胚通过____________技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用_________方法保存。

              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的______________分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有发育的_______性,有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗。

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