知识点挑题 - 高中生物 - 优优班--学霸训练营

肥胖已经严重危害人类健康．为研究发酵大麦提取物对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响，科研人员进行了相关实验．
（1）3T3-L1前脂肪细胞在胰岛素（INS）、地塞米松（DEX）和3-异丁基-1-甲基-黄嘌呤（IBMX）的诱导下，基因 ______ 表达，分化为成熟脂肪细胞，因此经过三种物质诱导的3T3-L1前脂肪细胞是肥胖研究常用的细胞模型．
（2）3T3-L1前脂肪细胞培养液中除了具有基本的营养外，还需加入一定量的 ______ ，并置于 ______ 中培养．
（3）将一定数目的植物乳杆菌接种到经过 ______ 处理的粉碎过筛大麦和水的混合液中，制备发酵大麦提取物（LFBE）．除不接种植物乳杆菌外，其余操作方法相同，制备未发酵大麦提取物（RBE）．
（4）研究发酵大麦提取物对细胞分化的影响，实验处理及结果如下．（表格中+表示加入了该物质，-表示未加入）

组别处理方法	模型组	空白组	对照组（提取物浓度ug/mL）			实验组（提取物浓度ug/mL）
组别处理方法	模型组	空白组	100	200	400	100	200	400
培养液	+	+	+	+	+	+	+	+
1 ______	+	-	-	-	-	-	-	-
2 ______	-	-	+	+	+	-	-	-
3 ______	-	-	-	-	-	+	+	+

①表格处理方法1、2、3分别是 ______ 、 ______ 、 ______ ．
②分析实验结果，说明 ______ ．
（5）为进一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的机理，科研人员提取各组细胞中总RNA，经 ______ 过程获得cDNA，再利用PCR技术扩增出肥胖相关基因．在相同条件下，PCR产物的量可以间接反映细胞中 ______ 的含量．若检测结果是 ______ ，则说明LFBE抑制相关基因转录从而抑制3T3-L1前脂肪细胞分化．

难度：较易

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2．
科学家培育转乳糖分解酶基因奶牛的过程如图所示．请回答下列问题：

（1）图中细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有 ______ ．在进行细胞原代培养时会出现 ______ 和细胞接触抑制现象．为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 ______ ．
（2）图中将乳糖分解酶基因导入胚胎呈纤维细胞中，最常用的方法是 ______ ．
（3）图中的核移植操作需要将经过细胞培养获得的供体细胞的细胞核注入去核的卵母细胞中，去掉卵母细胞细胞核的目的是保证克隆动物的核遗传物质全部来自 ______ ，而所用的供体细胞一般都选用传代培养10代以内的细胞，原因是传代培养10代以内的细胞能保持正常的 ______ ．
（4）重组细胞2在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛体内会生出与图中的黑白花奶牛性状并不完全相同的犊牛，原因可能有 ______ ．（至少答出两点）
（5）单克隆抗体的制备也需要构建重组细胞，该重组细胞是将 ______ 融合而成的．

难度：较易

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3．
人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大，通常从人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重，如果应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能，其大致过程如下：
Ⅰ、采用良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵；
Ⅱ、将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞；
Ⅲ、电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎；
Ⅳ、将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛．
请回答下列问题：
（1）实验步骤Ⅰ中，在体外受精前，需要对奶牛的精子进行 ______ 处理，受精时，往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，受精过程中防止多精入卵的生理反应包括 ______ ．
（2）实验步骤Ⅱ中，将人的血清白蛋白基因导入奶牛受精卵的最为有效的方法是 ______ ．
（3）实验步骤Ⅲ中，进行动物早起胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加 ______ 和动物血清．
（4）实验步骤Ⅳ中，应选择性别为 ______ 的奶牛胚胎进行移植．

难度：较易

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4．
如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养），请据图回答下面的问题：
（1）OA段的培养称为 ______ 培养，AB段可能发生了 ______ 现象，需要用 ______ 酶处理，以使组织细胞分散开来．
（2）动物细胞培养过程中，为维持培养液的pH，通常在培养液中通入一定浓度的 ______ ．
（3）培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集，并在体外培养到 ______ 期．
（4）目前使用的或冷冻保存的细胞通常为 ______ 代以内，以保持细胞正常的二倍体核型．

难度：较易

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5．
多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取，而不能被人体直接合成．科学家通过转基因手段将w-6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）整合到肉牛基因组，以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量，促进人体健康．请回答下列问题：
（1）将w-6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）导入到肉牛细胞中常用的方法是 ______ ，在用PCR技术扩增目的基因时，需要的条件除扩增缓冲液、模板DNA、4种原料和能量外，还需要 ______ ．
（2）构建好的基因表达载体主要包括复制原点、启动子、目的基因、终止子和标记基因，其中启动子功能是 ______ ．
（3）哺乳动物的脂肪细胞来源于前脂肪细胞，脂肪组织体积增大是前脂肪细胞 ______ 和脂肪细胞的 ______ 结果．
（4）在体外培养前脂肪细胞，需过滤脂肪组织血管基质，并经 ______ 酶消化而得到单个前脂肪细胞，进行原代培养．体外培养细胞的操作及培养过程均需要在 ______ 条件下进行．成熟组织细胞间质少、细胞松散，所以随着前脂肪细胞的分化，细胞贴壁生长性能 ______ ．

难度：较易

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6．

亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育．为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响，分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在的培养箱中培养22-24h．
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1．
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精．
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5-9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2．
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

ALA浓度/μmol•L^-1	卵母细胞数	核成熟卵子数
0	229	137
10	201	133
50	227	166
100	215	137
200	215	135

表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响

ALA浓度/μmol•L^-1	培养卵数	分裂数	囊胚数
0	309	171	75
10	325	182	82
50	292	185	97
100	310	188	84
200	231	145	68

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是 ______ ．
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是 ______ ，步骤③中，判断是否受精的依据是 ______ ．
（3）步骤④中，受精卵经过 ______ （时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是 ______ ．
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol•L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起 ______ 作用．
（5）本实验结果表明， ______ 的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，其判断依据是 ______ ．

难度：难

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7．
编码蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示．

回答下列问题：
（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT…CAGGAAGGA），则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是 ______ ．
（2）某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为 ______ ，加入了 ______ 作为合成DNA的原料．
（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2．
①由图2可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是 ______ ．细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO₂浓度，CO₂的作用是 ______ ．
②仅根据图、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少 ______ （填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果．

难度：难

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8．
如图表示利用小鼠胚胎干细胞（ES细胞）做的研究，请回答下列问题．

（1）a过程表示基因工程，则其核心步骤是 ______ ，该过程所使用的工具酶有 ______ ．
（2）将基因表达载体导入ES细胞的方法是 ______ ，为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA，可采用 ______ 技术．
（3）b过程可以获得更多的ES细胞，其采用的技术属于细胞工程中的 ______ 技术．
（4）完成c、d过程的胚胎工程技术分别是 ______ 、 ______ ．若要培养试管动物，除以上两种技术外，还需要运用 ______ 技术．试管动物的生殖方式属于 ______ ．
（5）用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞，再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物 ______ ，该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”，从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞．

难度：较易

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9．
基因工程靶向细胞疗法是细胞治疗和基因工程相结合的前沿生物疗法．治疗过程中先提取患者的免疫细胞，将特定靶向基因导入后，再对其进行扩增并诱导成效应细胞，最后回输至患者体内，以实现对被病毒感染细胞的特异性和主动性杀灭．回答下列问题：
（1）靶向基因需利用质粒、噬菌体衍生物或 ______ 作为载体才能导入免疫细胞，迄今为止，最为有效的导入方法是 ______ ．
（2）成功导入靶向基因后可利用 ______ 技术对免疫细胞进行扩增，该过程中首先要对培养液和用具进行
______ 处理．扩增细胞通常应在10代以内，以保持细胞正常的 ______ ．
（3）用该方法治疗病毒引起的疾病时，靶向基因表达产物的作用是 ______ ．
（4）回输的免疫细胞通过 ______ （填“体液免疫”或“细胞免疫”）清除感染的细胞．因回输的免疫细胞来自患者自身，可避免发生 ______ ．

难度：较易

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10．
P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因，研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变．科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用，请回答下列问题：
（1）切下新鲜的肝癌组织，在37℃下用 ______ 消化30-40分钟，在5% ______ 培养箱中培养，培养基是模拟了人体 ______ 的成分配制的，在培养基中加入一定量的抗生素，其目的是 ______ ．
（2）获取P53基因的方法通常包括 ______ 和 ______ ．
（3）将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合，将混合物滴加至肝癌细胞上，轻轻混匀．最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞．脂质体在这个操作中的作用是 ______ ．
（4）为证明P53基因有抑癌作用，需将两种细胞接入多孔板中，并从次日开始检测每孔的细胞总数，绘制成如图所示的生长曲线．请分析两条曲线分别是哪种细胞，曲线1是 ______ 细胞，曲线2是 ______ 细胞．

难度：难

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