完成下列相关填空

（一）某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂，开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下图所示。

（1）土壤悬液先经80℃处理15分钟，其目的是筛选出             。

（2）在无菌条件下，将经过处理的土壤悬液进行            ，然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到单菌落，其周围出现透明水解圈，圈的直径大小与           强弱相关。

（3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中         的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高                的利用率。

（4）利用物理或化学方法将植酸酶固定在          的介质上称为固定化酶。实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作，其中第一次洗涤的目的是除去             。

（二）下图为绵羊多莉克隆过程，请回答有关问题。

（5）步骤1中若要获得较多数量的卵细胞，通常对母羊注射相关激素使其超数排卵。步骤2可通过降低           浓度，实现对乳腺细胞的营养限制性培养，可以得到大量的          期细胞，从而实现细胞分裂同步化。

（6）步骤3中科研人员采用         技术进行细胞融合，步骤4通过胚胎体外培养获得胚胎，待发育至              胚胎时进行移植，通常移植至代孕母羊的          部位。

（7）若要将目的基因导入乳腺细胞中，在扩增目的基因时，除利用PCR技术外，还可将目的基因所在的重组载体导入大肠杆菌中，利用大肠杆菌  ▲ 使其扩增。

（8）为获得大量的上述克隆羊，可用胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为胚胎成纤维细胞可进行           培养，理论上可获得无限只克隆羊。

回答下列关于现代生物科技的问题：

(1)动物细胞培养时为了将组织分散成单个细胞，常用____________处理剪碎的组织块，并用培养液将细胞稀释制成____________。

(2)动物细胞培养时需要通入5%的CO2，其目的是__________________。

(3)动物细胞核移植时普遍使用的去核方法是______________；常选用处于________(时期)的卵母细胞作为受体细胞，主要是因为卵细胞大，易操作，含有促进______________表达的相关物质。

下图为细胞融合的简略过程示意图，请据图完成问题：

（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁，所用的酶可能是_________，由此生成的Ａ和Ｂ称为_________；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是________。

（２）若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用________使其分散开来；A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞工程的方法是用______________诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为______________，其中CO2的作用是                                                            _。此外，培养液还应进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防​                           。

（３）若Ａ为骨髓瘤细胞，Ｂ为经免疫的Ｂ淋巴细胞，那么Ｄ称为_________，这种细胞既能大量繁殖，又能产生_________。

（４）从A、B到细胞C的过程中，可形成__________种类型的细胞（仅考虑两个细胞间的融合）。若该过程用于单克隆抗体的制备，应筛选出符合要求的Ｄ，方法是用特定的__________培养基培养，为了大规模的生产单克隆抗体，还需对D进行第二次筛选，第二次筛选的目的是____________________。

家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力．将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。

（1）进行转基因操作前，需用            酶短时间处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。

（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的      和      之间；若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达，可以采用的方法是                 。

（3）通过PCR技术可大量获取目的基因。PCR技术的原理是                 ，PCR反应体系主要包括：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水、能量、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、         和与干扰素基因特异性配对的DNA引物。

（4）培养家蚕细胞时，贴壁生长的细胞会产生接触抑制．通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以            ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

（5）“桑基鱼塘”生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成“无废弃物农业”，这主要是遵循生态工程的            原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入，使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的         原理。