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            • 1.

              ES细胞(胚胎干细胞)在基础生物学、畜牧学和医学上有十分重要的应用价值。请回答下列问题:

              (1)ES细胞在体外培养时,可以增殖而不发生分化。在ES细胞培养液中加入分化诱导因子___________(只填一种即可)时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。

              (2)将人的ES细胞进行细胞培养时,要用__________酶分散细胞,制成细胞悬液,放入培养瓶中进行培养。使用合成培养基进行细胞培养时,通常需要加入_____________等天然成分。在细胞培养过程中,ES细胞主要通过_______________的方式进行细胞增殖。

              (3)将来源于两种不同哺乳动物的两个ES细胞进行细胞融合,常用的生物诱导因素是____________,经融合后所形成的细胞被称为__________。动物细胞融合技术的意义在于__________________。

            • 2.

              近年来,我国死于狂犬病的人数有上升趋势。狂犬病病毒的核酸是RNA,机体感染病毒后产生的特异性IgG抗体,能消灭狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。

              请根据上述材料,回答下列问题:

              (1)巴斯德利用固定毒株制成减毒活疫苗,预防狂犬病,制成减毒活疫苗需要用________培养。

              (2)特异性抗体获取可用单克隆抗体制备。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是______________________________________________。

              (3)下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              ①图中A过程从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是________细胞,该细胞能够产生________。从小鼠体内提取分离该细胞之前,给小鼠注射的特定的物质是________。

              ②图中B过程是细胞融合,该过程需要用灭活的________、聚乙二醇或电激等诱导。

              ③特异性抗体获取的方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有________________________________________等优点。

              (4)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有_________________________。

              (5)单克隆抗体的制备还有哪些用途?_______________________________________。

            • 3.

              科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒,用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体,如图为单克隆抗体制备过程示意图,图中A~F分别表示生物技术或细胞名称,请回答有关问题:

              (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自感染               的动物或人的细胞,C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是               

              (2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可能形成3种类型的D细胞,因此需用       培养基筛选出既能             又能产生              的E细胞用于培养.

              (3)在动物细胞培养过程中培养液中必须通入气体氧气和二氧化碳,通入CO2的目的是维持培养液的             .随着细胞分裂次数的增多,就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的             ,需要用             等处理使细胞从瓶壁上分离下来.

            • 4. 某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性.供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞.
              请回答下列有关动物细胞培养的问题.
              (1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同.一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量    
              (2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是    细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是    
              (3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长    .药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更    .若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用    处理.
              (4)为了防止基因培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的    
              (5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入    ,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的        合成水平的差异,确定Y的药效.
            • 5. 回答下列有关动物细胞培养的问题:
              (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面    时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的    .此时,瓶壁上形成的细胞层数是    .要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是    
              (2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现    现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成    细胞,该种细胞的黏着性    ,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量    
              (3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是    
              (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到    期的细胞用显微镜进行观察.
              (5)在细胞培养过程中,通常在    条件下保存细胞.因为在这种条件下,细胞中    的活性降低,细胞    的速率降低.
              (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作    进行攻击.
            • 6. 自闭症并不是神经系统的严重的、明显的损伤,而是与神经突触功能与调节息息相关,MeCP2基因表达异常与自闭症发生密切相关.中国科学家通过构建携带MeCP2的转基因食蟹猴模型,为深入研究自闭症的病理与探索可能的治疗干预方法提供了重要基础.
              (1)突触是神经元之间在功能上发生联系的部位,在突触后膜上发生的信号变化为    ,这种变化体现了细胞膜具有    功能.
              (2)将MeCP2基因导入食蟹猴细胞最为有效的方法是    技术,其受体细胞是    
              (3)在体外进行试管胚胎培养时,除了给予一定量的O2以维持    外,还需要提供    维持培养液的PH.
              (4)若要同时获得多只与模式猴相同的小猴,可对    时期的胚胎胚胎进行    操作,操作过程需要特别注意的问题是    
            • 7. 读图,回答下列有关哺乳动物细胞培养的问题:

              (1)培养中的细胞其数目的增加和培养时间的关系如图1.据图读出该细胞完成一个细胞周期所需要的时间是    小时.
              (2)从图1的A点取出6 000个细胞,测定每个细胞的DNA含量,结果如图2.已知S期是DNA复制期,G2期为DNA合成后期,G1期为DNA合成前期,M期为分裂期,则图2的B、C、D中,表示处于S期的是    ,表示处于G2和M期的是    ,表示处于G1期的是    
              (3)若取样的6 000个细胞中,处于M期(分裂期)细胞的数目是300个,则处于S期和G2期的细胞数分别是    个和    个.
              (4)细胞周期中,完成各期所需时间的计算公式是t=T×
              n
              N
              (N是取样的总细胞数,n是各期的细胞数,T是一个细胞周期),则该细胞完成分裂期和间期的时间分别是        小时.
            • 8. 科学家利用基因工程技术可以使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”.目前科学家已在牛和羊等动物的乳腺生物反应器中表达出了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要药品.请回答有关问题:
              (1)将药用蛋白基因和乳腺蛋白基因的启动子、终止子和    等重组在一起,就可构建基因表达载体,再通过    技术导入受精卵中.基因表达载体上的启动子的作用是    
              (2)制备乳腺生物反应器的过程中,目的基因的受体细胞为    ,性染色体组成为    
              (3)为确定受体细胞中染色体的DNA上是否插入了目的基因,可利用    技术进行检测,一般是用放射性同位素标记    作探针.
              (4)转化成功的受精卵发育成胚胎需要进行体外培养,在培养液中要加入    等天然成分.
            • 9. 下面是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

              (1)图中过程②诱导细胞融合的生物因素是    ,细胞融合后还需要用    筛选获得杂交瘤细胞.
              (2)经过③过程可获得足够数量的能分泌所需抗体的D细胞,过程3包括        等.
              (3)培养D细胞时培养液的配方与植物细胞培养基有所不同的是除含有葡萄糖、氨基酸、无机盐等之外,还要含有    ,培养过程需在CO2培养箱中进行,目的是    
              (4)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是    .在制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为让其融合后培养的D细胞具有        的特性.
            • 10. (2016春•临沂校级期中)自然界中有一种含有叶绿体的原生动物--眼虫,这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活.某同学提出问题:“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗?”他尝试设计出下列具体的实验方案.
              结合实验方案回答:
              实验原理:根据眼虫的特点,动物细胞和植物细胞在理论上是可以实现杂交的.实验步骤如下:
              (1)①中选的植物材料细胞中,必须有的细胞器是    
              (2)③过程所用的酶是    
              (3)④过程除了用电激之外,还可以用    等作为诱导因素.
              (4)⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是    .(至少答两点)
              (5)在⑤⑥过程中,通常要添加血清,原因是    
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