5.
由于人突变细胞中含胸苷激酶(TK)而缺乏HGPRT酶,小鼠正常细胞中含HGPRT酶而缺乏TK,两种细胞均不能在HAT培养基中生长,但可在普通培养基中生长.利用上述两类细胞融合获得杂种细胞,在杂种细胞传代过程中,鼠的染色体被保留下来,人的染色体随机丢失,以至最后只剩一条或几条人染色体(如下图,图中数字代表保留的人染色体编号).科研人员运用这一方法确定了胸苷激酶基因所在的染色体.分析回答:
(1)人、鼠细胞融合的原理是
.过程A常用化学诱导剂是
,与植物原生质体融合过程相比特有的诱导方法是
.
(2)动物细胞培养过程中,人工合成的培养基需要加入一定量的
,以满足细胞生长的需求.培养液中还要添加一定量的抗生素的目的是
,培养箱中充入5%的CO
2气体的主要作用是
.
(3)过程B用HAT培养基进行培养,目的是筛选出
.
(4)为了使人的全部染色体分别包含于各种不同的人鼠杂交细胞中,人鼠融合细胞应在
(填“HAT”或“普通”)培养基中传代培养.为检查杂种细胞中含有的人染色体数目和形态,最好选取
(时期)的杂种细胞进行观察.
(5)若将某次实验获得的各种人鼠杂种细胞分别在HAT培养基中培养,一段时间后,发现在HAT培养基中只有A、B、C三种杂种细胞能够生长,检查杂种细胞中保留的人染色体情况如表(表中“+”表示有相应染色体,“-”表示无相应染色体):
杂种细胞 | 保留的人染色体 |
2号 | 3号 | 5号 | 9号 | 12号 | 17号 | 21号 |
A | + | + | + | + | - | + | - |
B | - | + | - | - | + | + | - |
C | + | - | + | - | + | + | + |
根据表中信息,可推测人细胞中胸苷激酶基因位于
号染色体上.