1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的实验方案：把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，得到的融合细胞就能大量增殖，产生足够数量的特定抗体。请回答下列问题：

（1）从动物体内取出的组织块，需用________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。当细胞________（填“原代”或“传代”）培养至10～50代左右时，部分细胞的细胞核型可能发生变化，从而获得骨髓瘤细胞。在动物细胞培养基中加入血清、血浆等天然成分的原因是________。

（2）制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________细胞,然后对上述细胞进行抗体检测，选取________的细胞克隆化培养；最终获得单克隆抗体。

（3）有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，其过程是取经特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核，移植到去核的________细胞中，构成重组细胞。此方法________（填“能”或“不能”）获得既能分泌抗体，又能无限增殖的细胞，原因是________。

（1）PCR技术利用了_________原理解决了打开DNA双链的问题，从一种细菌中分离到_______，解决了DNA聚合酶失活的新问题。

（2）利用PCR技术从基因文库中提取目的基因时，首先要根据目的基因的核苷酸序列设计并合成出2种引物。在第_________轮开始出现目的基因片段。

（3）试管动物技术正广泛应用于畜牧业生产，此技术中从母牛体内获得的卵母细胞需要到____________________(时期)才能与精子结合。在体外培养受精卵时，需要满足以下条件：_______________、营养、温度和pH以及气体环境。

（4）将外源基因导入小鼠受精卵后，外源基因会随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析:因外源基因的插入导致受精卵死亡的最可能原因_________________。

请回答下列有关现代生物科技专题的问题

(1) 动物细胞培养时，需要利用____________________酶处理组织块，使其分散成单个细胞；培养过程中细胞表现出_______________和_________________等特点；通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________________，以防培养过程中的污染，另外通常需加入__________________等一些天然成分。

(2) 杂交瘤细胞的特点是_________________________，单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有_________________________________________________并可能大量制备的特点。

(3) 植物体细胞杂交之前，需要用________________________去除细胞壁，获得具有活力的__________________，一般用__________________作为诱导剂来诱导其融合。

(4) 试管牛的生产过程中，在试管中完成的步骤为______________________和____________________，将胚胎培养发育至_________________阶段再移植到代孕母体体内。

(5) 对污染的矿山进行生态修复，一般选用耐重金属污染的本地植物进行种植，体现了生态工程的_________________________________原理。

Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子，I（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。

（1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出____________反应最强的培养孔所对应的小鼠M。

（2）实验用骨髓瘤细胞置于恒温培养箱中37℃下培养，融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中_______（填“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。

（3）取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有____________能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用ICAM-1检测，从中选择___________________________的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中__________培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。

（4）若进一步比较实验用抗体和¹³¹I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计。

（6）人体细胞表达的干扰素与转基因家蚕细胞表达的干扰素的氨基酸序列相同，根本原因是                            。

丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：

实验材料：人肝癌细胞(HepG2)，培养液，0.02%二甲亚砜溶液，用0.02%二甲亚砜溶解的0.5ug/mL、1ug/mL、1.5ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等。

①将等量的人肝癌细胞(HepG2)悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%CO₂培养箱中培养24 h，静置、去掉上清液；

②________________________________________________________________________，

再加入等量的培养液，于37℃、5%CO₂培养箱中继续培养；

③培养72h，每24h用细胞计数仪检测癌细胞数。

(1)请完善上述实验步骤中相关内容。

(2)本实验的自变量是________________。实验验中，每组细胞培养瓶不止一个，统计后代求平均值，目的是________________。

(3)设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率(%)＝[(用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数)/(对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数)]×100，得到以下数据：

表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响/%

通过数据分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：___________________________________________________________________。

(4)顺铂(DDP)是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置____________________________用药组才能得出结论。

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）过程①必需用到的酶是                                       

（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和______________       才能构成一个完整的基因表达载体

（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射促性腺激素的方法，做_________处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到                        期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（4）我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程运用了哪些现代生物技术_        _________________________________________________________

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)。请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是__________________________________________________________________。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，还会表现出________等特点。

(4)图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛100%的复制，其原因主要有______________、_____________________。

(5)上图中所示的生物技术整体被称为________，其包括的具体生物技术有________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物____________________具有全能性。

下图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题：

（1）给小鼠注射抗原的目的是                               。

（2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有                  和                     的特性。

（3）由图中可看出，单克隆抗体制备运用了           和             的动物细胞工程技术手段，前者常用的与植物原生质体融合不同的诱导剂是           。

（4）动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基不同的是，还含有               。

（5）在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用         处理所选组织细胞使之分散开。

（6）图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出                                 ，步骤⑤⑥的目的是筛选出                                。

（7）与传统从血清提取的抗体相比，单克隆抗体的优点是                                 。