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            • 1.
              如图为某种哺乳动物体细胞核移植过程图.回答下列问题.

              (1)①处需要用 ______ 等处理,然后分瓶继续培养;细胞培养需要O2和CO2,CO2的主要作用是 ______ .
              (2)卵母细胞在体外培养到 ______ 时进行去核.与去核卵母细胞融合的供体细胞培养一般不会超过10代,原因是 ______ .激活受体细胞除了用电刺激的方法外,还可以用 ______ .(写一种实际方法)
              (3)动物细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植的原因是 ______ .
            • 2.

              [选修3:现代科学技术专题]

              基因编辑技术指对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA 片段的敲除、加入等.

              CRSPRI/Cas9 系统基因编辑技术风靡全球实验至后,我国韩春雨研究团队提出NgAgo-gDNA 基因编辑工具,但却引起了科学界的质疑.为了探究NgAgo-gDNA 系统能否引发斑马鱼的Fabplla基因发生突变导致其眼睛发育缺陷,复旦大学和南通大学联合进行了研究.请回答下列问题.
              (1)探究一:NgAgo-gDNA 系统能否使斑马鱼眼睛缺陷?
              方法:首先推测构成NgAgo 蛋白的 ____________,在试管中合成mRNA,并将其与单链gDNA 混合后注射到斑马鱼胚胎细胞中,进行胚胎培养.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、核苷酸、无机盐、有机盐、维生素和 ________等.小斑马鱼的形成 _____(填“需要”或“不需要”)进行胚胎移植.单链gDNA 与Fabplla 基因的碱基互补配对与Fabplla 基因转录时的碱基互补配对相比,区别是 ______
              结果:实验组斑马鱼胚胎出现了严重的眼睛缺陷.
              (2)探究二:斑马鱼眼睛缺陷是否是由Fabplla 基因发生突变引起的?
              方法:从异常眼部表现型的斑马鱼胚胎细胞中提取Fabplla 基因,对其使用PCR 技术进行扩增,并研究该基因在斑马鱼胚胎发育中的功能.PCR 技术扩增Fabplla 基因时,需要提供模板、原料、 __________、引物等条件.将模板DNA 加热至90~95℃,该处理的目的是 ____________________________.
              结果:NgAgo-gDNA 系统引发的眼睛缺陷可通过外源添加Fabplla 基因的mRNA 来恢复,而且对Fabplla 基因测序结果发现其序列与对照组相同.
              初步结论: ____________________________________.
              (3)转基因技术是一把双刃剑,它既可以造福人类,也可能在使用不当时给人类带来灾难.面对转基因技术可能产生的负面影响,公众不可避免地产生了疑虑,引发了人们在食物安全、生物安全和 ____________三个方面发生激烈的争论.
            • 3.
              如图是动物细胞培养的基本过程示意图.请根据图回答:

              (1)容器B中的动物组织用 ______ 处理,是为了使细胞分散开制成细胞悬液.
              (2)培养首先在C瓶中进行,这时的细胞培养称为 ______ ,悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为 ______ .细胞进行有丝分裂,数量不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的 ______ .
              (3)细胞培养需满足的条件有:无菌无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理,通常在培养液中添加一定量的 ______ ,此外,应定期 ______ ,以便清除代谢产物.营养除了通过合成培养基满足已知的外,还需要添加 ______ 满足不知的成分.需要适宜的温度和酸碱度,满足气体条件,培养瓶或培养皿置于 ______ 的混合气体中培养.其中CO2的主要作用是维持培养液的 ______ .
            • 4.
              如图所示为动物细胞培养过程中,动物细胞增殖情况的变化曲线(图中B、D两点表示经筛选后继续培养),请据图回答下面的问题:
              (1)OA段的培养称为 ______ 培养,AB段可能发生了 ______ 现象,需要用 ______ 酶处理,以使组织细胞分散开来.
              (2)动物细胞培养过程中,为维持培养液的pH,通常在培养液中通入一定浓度的 ______ .
              (3)培育克隆羊时用到的卵母细胞可以从屠宰场收集,并在体外培养到 ______ 期.
              (4)目前使用的或冷冻保存的细胞通常为 ______ 代以内,以保持细胞正常的二倍体核型.
            • 5.
              如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究,请回答下列问题.

              (1)a过程表示基因工程,则其核心步骤是 ______ ,该过程所使用的工具酶有 ______ .
              (2)将基因表达载体导入ES细胞的方法是 ______ ,为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA,可采用 ______ 技术.
              (3)b过程可以获得更多的ES细胞,其采用的技术属于细胞工程中的 ______ 技术.
              (4)完成c、d过程的胚胎工程技术分别是 ______ 、 ______ .若要培养试管动物,除以上两种技术外,还需要运用 ______ 技术.试管动物的生殖方式属于 ______ .
              (5)用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物 ______ ,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞.
            • 6.
              某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用.他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究.
              实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管,培养皿等.
              (1)其中某位同学实验操作如下:(请将实验内容补充完整)
              a.取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用 ______ 处理,使其分散开来,配制成细胞悬液,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号.
              b.取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号l、2、3、4、5,并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入 ______ ,作为对照组.
              c.将步骤b中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间.
              d.取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用 ______ (工具)在显微镜下观察计数并记录.
              (2)请纠正该同学操作上一处明显的错误: ______ .
              (3)另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图.
              ①在该实验中,自变量是 ______ .
              ②根据实验结果,你能得出的结论是 ______ .
              (4)若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞,经24h培养后,取一滴培养液稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察,发现有64个肿瘤细胞,则此肿瘤细胞的细胞周期约为 ______ h.
            • 7.

              某生物兴趣小组从资料上获知:二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。他们推测,二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,能作为一种癌症的化疗药物,并就此问题设计实验进行了探究。

              实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管,培养皿等。

              (1)其中某位同学实验操作如下:(请将实验内容补充完整)

              a.取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用________处理,使其分散开来,配制成细胞悬液,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号。

              b.取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1~4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入________,作为对照组。

              c.将步骤b中配制的溶液分别置于5个培养皿中,摇匀后,在冰箱中培养一段时间。

              d.取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用________制成临时装片在显微镜下观察计数并记录。

              (2)请纠正该同学操作上一处明显的错误:__________________________。

              (3)另一位同学按照正确的方法进行实验,得到的结果如图所示。

              ①在该实验中,自变量是________。②根据实验结果,你能得出的结论是___________。

              (4)若开始培养时取一滴培养液观察有100个肿瘤细胞,经24 h培养后,取一滴培养液稀释100倍后再取一滴(设三次的“一滴”等量)观察,发现有64个肿瘤细胞,则此肿瘤细胞的细胞周期约为________h。

            • 8.

              下图为科研工作者利用小鼠制备H7N9禽流感病毒单克隆抗体的过程。请据图回答有关问题。


              (1)图中X细胞一般选用______________,与植物体细胞杂交相比,诱导X细胞和Y细胞融合还可采用________________。

              (2)在杂种细胞的培养过程中,为了防止污染,通常还要在细胞培养液中添加一定量的________,其培养液与植物组织培养的培养基相比,特有的天然成分________。

              (3)单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选,首先用特定的选择性培养基筛选出________________,还需进行________________和专一抗体检测,最终获得足够数量的________________的细胞,选出符合要求的细胞后,可在体外条件下培养或注射到________________内进行增殖。

              (4)利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒,用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者,这种诊断运用了________________杂交技术,这体现了单克隆抗体________________________的特性。

            • 9. 如图可表示细胞工程技术的过程,请据图回答:
              (1)若A、B为经______酶去除了细胞壁的结构,则A、B到结构C的过程体现了细胞膜的______,形成的D细胞还要应用______技术培养成杂种植株.
              (2)若A细胞为骨髓瘤细胞,B是能产生抗体的B淋巴细胞,在A、B到C的过程中形成的C有______种(仅限于两个细胞的融合),用来培养的D细胞应为______细胞,需要在特定
              的______(填“固体”或“液体”)培养基中筛选出这种细胞.
              (3)在上述单克隆抗体制备过程中,还应用了细胞工程的______技术和______技术.
            • 10. 红细胞生成素(EPO)是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白,可用于治疗肾衰性贫血等疾病.目前临床使用的是重组人红细胞生成素(rhEPO),其简易生成流程如图所示.

              (1)图中①所指的物质是______,②所指的物质是______,③是______.
              (2)③中的______是RNA聚合酶的识别和结合部位,将③导入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)最常用的方法是______法.
              (3)对重组CHO细胞进行体外培养需要一定浓度二氧化碳的目的是______,通常在细胞培养液中添加一定量的______以防止培养过程中的污染.
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