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            • 1. 经过世界各国科学家的漫长探索,植物细胞工程技术已进入高速发展阶段,动物细胞工程技术已成为生物科学领域一颗十分耀眼的明珠。请回答下列相关问题:
              (1)植物组织培养过程中,由于培养细胞处于______状态,因此容易受到培养条件和外界影响而发生突变。若对愈伤组织进行物理或化学诱变处理,促使其发生突变,再通过______形成植株,从中筛选出抗病、高产优质的突变体,就可以培育成新品种。
              (2)用植物体细胞杂交技术培育番茄一马铃薯,就是将这两种植物体细胞,在一定条件下______。这项研究虽然没有地上长番茄,地下结马铃薯,但是在______上取得了重大突破。
              (3)一种由正常体细胞经人工逆转后形成的多能干细胞iPSC经基因修饰后分化成特定的T淋巴细胞。体外培养iPSC过程中,通常需要在培养基中添加______等天然成分。
              (4)制备抗人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体过程中,需要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞,该细胞的特点是______,对杂交瘤细胞还需进行______培养,并用______对其进行专一抗体检测,经多次筛选获得足够数量的所需细胞进行体内或体外培养。
            • 2. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:

              (1)①中在核移植前通常使用______ 去除卵母细胞的细胞核。
              (2)步骤中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其______分离出ES细胞。在培养液中添加______,如牛黄酸等化学物质时,就可诱导ES细胞向不同组织分化。
              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2因的表达载体。可以根据Rag2基因的______设计引物,利用______ 技术扩增Rag2基因片段。该基因表达载体的组成,还必须有______、______以及标记基因等。
              (4)为检测Rag2基因的表达情况,除分子检测外,有时还管要进行______水平的坚定。
            • 3. 现代生物工程技术推动了免疫学、畜牧业和生态工程的发展,回答下列相关问题:
              (1)某高校研发的幽门螺杆菌疫苗为基因工程疫苗,实验证明,一定时间内间隔口服该疫苗3次效果更好,其主要原因是体内产生的______细胞数量增多,该类细胞在病原体再次进入人体后会迅速增殖分化产生更多的浆细胞,进而产生更多的______导致获得的免疫预防作用更强,持续时间更久。
              (2)对大面积烧伤病人,利用自身健康皮肤细胞借助______技术可获取大量用于移植的皮肤,培养细胞时的条件为:______的环境、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体。CO2的作用是______。
              (3)用细胞核移植技术繁育良种牛的过程需要进行胚胎移植,移植前需要对供体和受体牛进行______处理,受体对外来胚胎基本不发生______,为胚胎在受体内的存活提供了可能。
              (4)依据生态工程的______原理,黄河三角洲自然保护区的建立需考虑提高农民经济收入,使保护环境和经济发展相互协调。
            • 4. 糖尿病病因复杂、类型多、患者多,基于精准诊断的精准治疗有巨大医疗潜力。下图是科学家设计的利用现代生物工程技术治疗某种新生儿糖尿病(胰岛B细胞合成分泌胰岛素过程中起关键作用的γ基因缺陷,导致不能正常合成胰岛素)的过程图解,请回答问题:

              (1)图中①所示的结构是细胞核;②所示的细胞是______,图中③④所示的生物工程技术分别是______。图中获取②细胞要破坏、遗弃早期人类胚胎,故该研究引发了生物技术的______问题。近年人们从新生婴儿的______分离的干细胞解决了上述问题。
              (2)在图中④所示的生物工程技术中,首先要获取目的基因γ,现要通过逆转录方法获取Y基因,应从______细胞中提取并分离到相应的mRNA.逆转录方法获取的Y基因与健康人的γ基因相比,缺少______。
              (3)一个重组细胞b经一定的诱导培养,可以形成众多的具有正常胰岛B细胞功能的细胞,其内在原因是发生了______。培养重组细胞b的培养液的配制与培养条件设置的主要依据______。
              (4)采用患儿本人脐带血细胞代替②细胞的优点是______。
            • 5. 回答下列问题:
              (1)用头发将蝶螈的受精卵横缢为有核和无核的两半,有核的一半能分裂,无核的一半不能分裂。当有核的一半分裂到16~32个细胞时,科学家将其中一个细胞的细胞核挤到无核的一半,结果发现这一半也开始分裂,并且像有核的那一半一样,最终发育成正常的胚胎。科学家通过这个实验证明了______,从而为核移植技术的发展奠定了理论基础。
              (2)进行体细胞核移植前,从具有优良性状的动物体中取体细胞进行培养,培养条件除营养、温度和pH适宜外,还应保证______(答出3点)。核移植前还需对受体卵母细胞进行去核操作,其目的是______。
              (3)经核移植得到重组细胞后,一般还需经过______等技术环节,才能获得克隆动物。
              (4)体细胞的细胞核必须被移植到去核卵母细胞后才能表现出全能性,原因主要是______。根据这一启示,请提出一种恢复体细胞分裂分化能力的新思路:______。
            • 6.
              2016年4月,世界首例经过线粒体移植技术的“三亲婴儿”哈桑在墨西哥出生。图是培育“三亲婴儿”的示意图,请回答下列问题:

              (1)“三亲婴儿”共有三位生物学意义上的父母,即所谓的“ ______ 爸 ______ 妈”(填“一”或“二”);由于女性自然周期产生的卵子太少,捐献者在取卵前通常需要注射 ______ 激素,促使一次有更多的卵泡发育。
              (2)引入的线粒体基因相当于对婴儿原来的基因进行了修饰,这一过程类似于 ______ 技术。
              (3)去除细胞核时普遍使用 ______ 去核法。从受精卵到“三亲婴儿”的出生还需要 ______ 和 ______   等技术。
              (4)“三亲婴儿”的培育技术能避免母亲的 ______ 遗传病基因传递给后代,但其染色体仍有 ______
              (填比例)来自母亲提供的细胞核。
            • 7.
              如图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程.

              回答下列问题:
              (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为 ______ .
              过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用 ______ 的方法.②代表的过程是 ______ .
              (2)经过多次传代后,供体细胞中 ______ 的稳定性会降低.因此,选材时必须关注传代次数.
              (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是 ______ .
              (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了 ______ .
            • 8.
              2018年1月25日报道,两只克猕猴“中中”和“华华”在中国诞生,突破了现有技术无法克隆灵长类动物的世界难题,将为阿尔茨海默症、自闭症等脑疾病带来前所未有的光明前景,图为过程流程图,请回答下列有关问题:

              (1)欲获得单个雌猕猴体细胞,可用 ______ 酶处理动物组织块。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至 ______ 时期再进行,目前使用的去核方法是显微操作法。
              (2)A细胞的获得过程属于 ______ (有性/无性)生殖,在培养早期胚胎时,培养液中通常要添加 ______ 等一些天然成分,当胚胎发育到 ______ 阶段时,将进行② ______ (填过程名称)。
              (3)获得的“中中”和“华华”小猕猴与供体动物的遗传物质不完全相同,遗传物质不相同地方是 ______ 。
              (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,“中中”和“华华”猕猴克隆动物的成功证明了 ______ 。
            • 9. Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:

              (1)步骤①中,在核移植前如何对卵母细胞进行改造?______。
              (2)步骤②中,重组胚胎培养到______期时,可从其______细胞中分离出ES细胞。
              (3)步骤③中,需要构建含有基因Rag2的表达载体。利用PCR技术扩增Rag2基因片段时,可以根据已知的Rag2基因的______设计引物,且利用______原理,通过控制______来控制双链的解聚与结合。
              (4)用HindIII和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段,为将该片段直接连接到载体上,所选择的载体应具有______酶的酶切位点。
              (5)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的______,用相应抗体进行杂交实验。
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