2016年10月19日美国新希望生殖医学中心正式宣布，世界首个核移植“三父母”男婴已于2016年4月诞生。为中东一位线粒体携带有亚急性坏死脑病基因的母亲带来了希望。培养过程如下图，据图回答：

（1）获得重组卵母细胞A也会用到体细胞核移植技术，完成①过程需要用微型吸管吸出______，完成④过程的B细胞需要选择_________（时期）的卵母细胞。

（2）卵母细胞的获取过程中，需要对女性进行超数排卵处理，超数排卵的方法是给女性注射_______激素，超数排卵技术带来的危害之一是_________。

（3）细胞A的培养过程③所需气体主要有O₂和CO₂，CO₂的主要作用是________________。

（4）为了提高已有胚胎的利用率，可采用________________技术。若选用囊胚期的胚胎，操作过程中要特别注意的问题是____________。

（5）设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行___________________。

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题：

（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过__________________技术获得重组细胞，接受细胞核的去核卵母细胞应该处于___________________时期。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其_______________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的__________________。

（3）将基因导入ES细胞常用的方法是________________________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的_________________。

（4）为检测干扰素基因的表达情况，可采用__________________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。

回答下列（一）、（二）小题：

（一）天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。

（1）在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度，这是因为酶         。

（2）在酒精发酵阶段，发酵罐先通气，后密闭。通气能提高        的数量，有利于密闭时获得更多的酒精产物。若在酒精发酵环节中温度过低，带来的弊端是           。

（3）在醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如图2：

①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图3。据图2、3分析，与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是         ，由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是        （至少答出两项）。

②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中         （答出什么时期的什么层）的醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少，主要原因可能是        。

（二）如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。

（1）克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是       ，动物的这两种繁殖类型，实质性的区别在于后者仍是        。

（2）对供体母牛做超数排卵处理时，一般可采用         激素。

（3）如果要培育能产生某种药用蛋白的转基因荷斯坦奶牛，可采用具体的          技术将目的基因导入到受精卵中，并采用“         ”杂交的方法检测受体细胞中的目的基因是否表达。

（4）在转基因技术中，常需要对相关DNA的碱基序列进行测序。下图中甲、乙为DNA测序仪显示的图像，已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT，则乙图显示的碱基顺序为（   ）

A.TCGCAC        B.ACCGTG        C.ATTCAG        D.TCCGGA

豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图，图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子，neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题：

（1）该培养过程涉及多种现代生物工程技术，属于分子水平的是___________，其原理是______________________。

（2）PCR过程中，除了要加DNA模板以外，还需加________ 和________，以及所需的酶是_________。温度降低到55℃的目的是__________。

（3）PSP是______________识别和结合的部位，步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。

（4）若要获得大量的卵母细胞需要对成年母猪采用___________法以获得大量的卵细胞。

（5）进行早期胚胎培养时，通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养，其中CO₂的主要作用是____________________；另外，需定期更换培养液，目的是___________________。

（6）步骤⑥中，通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。

（7）与饲养普通猪相比，饲养转基因猪的优势是____________________________。

下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是_______。

(2)图甲中②过程所形成的两两融合的细胞有____种，从中得到所需细胞的方法是用_______培养基培养。图乙中过程b所选择的早期胚胎一般是_______,④过程与体外培养相比，其优点是不需_______________及不需严格的外界环境条件。

(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_________的特点。

(4)若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？______。原因是_______________________________________________________。

(5)为检测杂交瘤细胞是否成功的合成了单克隆抗体，可以采用___________杂交的方法。

克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了克隆性治疗的基础，又解决了器官移植中供体不足的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展和应用图。请据图回答问题。

(1)图中所涉及的现代生物技术有 _________________和_______________等。

(2)图中两个胚胎能正常发育成个体，这说明________具有全能性。婴儿1与婴儿2之间______（选择填入“能”或“不能”）进行器官移植，原因是____

(3)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入____________等天然成分。

(4)图中早期胚胎发育到________阶段以前的细胞是全能细胞。

(5)胚胎干细胞除了由从囊胚的内细胞团也可从__________中分离得到。

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)，请结合图示回答下列问题：

(1)图中所采用的生物技术主要是_______________。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物的________具有全能性。

(2)用于核移植的供体细胞，一般都选用传代10代以内的细胞，原因是_____________________________________________________________。

(3)在进行原代培养时，细胞增殖的方式是________，此外，细胞增殖还表现出________和接触抑制等特点。

2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，为了避免夫妻把生理缺陷遗传给孩子，允许以医学方法创造携带三人DNA的婴儿，即允许给婴儿加入父母以外第三人的遗传基因。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。

据图回答下列问题：

（1）图中“三亲婴儿”的染色体来自        和父亲提供的细胞核。

（2）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。

（3）进行体外受精时，所用的父亲精子是经过              处理的。上述防止多精入卵的屏障有              和卵细胞膜反应。重组细胞体外培养所需的气体主要是O₂和CO₂，CO₂的主要作用是_____________。

（4）体外受精以后要采用胚胎工程中的          技术和胚胎移植技术，该过程所用的培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及           等物质。

（5）三亲婴儿的培育技术          （填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代 ，________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。

线粒体神经胃肠脑肌病由线粒体DNA（mtDNA）上的相关基因M控制。以下是采用“一父两母”技术以避免生出患病孩子的流程图。

请回答：

      （1）过程①采用的技术是          ，图中的X表示       期的卵母细胞。

      （2）过程②培养过程中所需气体主要有 ______。

      （3）过程③需提取早期胚胎细胞中的             ，通过PCR技术进行扩增，并以标记的            基因作为探针进行检测，筛选出合格的胚胎。

(1)通过方法1得到的试管牛其生殖方式属于____________，方法2得到的克隆牛其生殖方式属于________________。