1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的实验方案：把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞进行融合，得到的融合细胞就能大量增殖，产生足够数量的特定抗体。请回答下列问题：

（1）从动物体内取出的组织块，需用________处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞。当细胞________（填“原代”或“传代”）培养至10～50代左右时，部分细胞的细胞核型可能发生变化，从而获得骨髓瘤细胞。在动物细胞培养基中加入血清、血浆等天然成分的原因是________。

（2）制备单克隆抗体时，先用特定的选择性培养基进行筛选，获得________细胞,然后对上述细胞进行抗体检测，选取________的细胞克隆化培养；最终获得单克隆抗体。

（3）有人提出用核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体，其过程是取经特定抗原刺激的B淋巴细胞的细胞核，移植到去核的________细胞中，构成重组细胞。此方法________（填“能”或“不能”）获得既能分泌抗体，又能无限增殖的细胞，原因是________。

（4）某生态农业把鱼塘、农田、果园和牛羊养殖场有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循系统学与工程学原理中的____________的原理。

​（7）从分子水平检测目的基因存在与鉴定目的基因表达的方法依次为_______________、_______________。

自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。2014年3月，云南农大科研团队把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪，现将两种技术进行比较。

（1）图中过程①②③④是获得孤雌克隆猪的技术流程，那么获得核移植克隆猪的技术流程是过程_____（填序号）。

（2）孤雌生殖克隆猪仍然是二倍体生物，但由于缺少__________方亲本基因，导致其生长发育中出现多种问题，但给研究者提供了很好的材料。

（3）孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞________，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。

（4）体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择____________时期的卵母细胞。

（5）可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究，也可通过________方法得到多种cDNA，并通过______________技术扩增产物。

近日，我国科学家突破了体细胞克隆猴的世界难题，成功培育出世界首个体细胞克隆猴。标志着我国将率先开启以猕猴作为实验动物模型的时代，请回答与培育克隆动物有关的问题。

（1）体细胞克隆猴是通过______技术得到的，即将供体细胞注入到_______内，透过电刺激等方法使两细胞融合，构建重组胚胎。

（2）通过上述技术获得的胚胎，移植到同种的、_________的其他雌性猕猴体内，使之继续发育为体细胞克隆猴。

（3）供体体细胞来自猕猴胎儿，从胎儿体内取出的组织用相应的酶处理一段时间，就会分散成单个体细胞，之后进行的初次培养称为___________，用于核移植的供体细胞一般选用传代10代以内的细胞，原因是_________________。

我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出，这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图，请据图回答：

（1）过程①必需用到的酶是                                       

（2）重组质粒除了带有绿色荧光蛋白基因以外，还必须含有启动子、终止子和______________       才能构成一个完整的基因表达载体

（3）为了获得更多的猪卵母细胞，可通过对母猪注射促性腺激素的方法，做_________处理，并将所采集到的卵母细胞在体外培养到                        期即可通过显微操作将其细胞核去除。

（4）我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程运用了哪些现代生物技术_        _________________________________________________________

2015年2月3日，英国议会下院投票通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。请回答下列问题：

（1）过程①采用的是细胞工程中的__________技术。图中“三亲婴儿”的染色体来自________和父亲提供的细胞核。

（2）进行过程②时，所用的父亲精子是经过__________处理的。过程②中防止多精入卵的屏障有________和卵细胞膜反应。判断卵子是否受精的重要标志是_______________。

（3）过程③采用的是胚胎工程中的___________技术，该过程所用培养液的成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及____________等物质。

（4）若捐献者携带红绿色盲基因，则该基因___________（“能”或“不能”)遗传给“三亲婴儿”。

科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛，如果要加速转基因奶牛的繁育，可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示)。请结合图示回答下列问题：

(1)在进行细胞培养时，要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离，形成单个细胞，这个过程中需要利用________酶处理。

(2)形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞，并去掉其细胞核的原因是__________________________________________________________________。

(3)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，还会表现出________等特点。

(4)图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛100%的复制，其原因主要有______________、_____________________。

(5)上图中所示的生物技术整体被称为________，其包括的具体生物技术有________、________等。转基因奶牛的克隆成功，说明了动物____________________具有全能性。

克隆羊的成功轰动世界，它不仅奠定了克隆性治疗疾病的基础，又解决了器官移植中供体不足的问题，同时也给人类带来了一些过去尚未遇到的问题。下图为人类对克隆羊技术的拓展和应用，请据图回答：

(1)图中所涉及的现代生物技术有__________和_______等。

(2)下列有关胚胎移植的叙述正确的有__________。

A．冲卵指的是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子

B．只有供、受体生理环境高度一致，移入受体的胚胎才能被接受

C．供体和受体要进行免疫检查，防止发生免疫排斥反应

D．不同动物胚胎移植的时间不同，人的胚胎移植最好在原肠胚时期进行

(3)图中两个克隆动物长大后，各方面特征与原型动物相同，这说明__________具有全能性，早期胚胎发育在__________阶段以前的细胞是全能细胞。

(4)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入__________等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需要保证细胞生活所需的__________。

(5)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，一般用__________处理内细胞团，使之分散成单个细胞。

器官移植在当今的疾病治疗中普遍被应用，但在全世界的临床医学上普遍存在供体器官不足和器官移植后发生免疫排斥反应问题。为了解决上述问题，人们提出了很多设想。请根据所学知识回答下列问题：

（1）器官移植发生的免疫排斥反应属于__________（填“体液免疫”或“细胞免疫”）。__________的应用大大提高了器官移植的成功率，给需要进行器官移植的患者带来了福音。

（2）现代医学证明，可从新生儿剂带血中分离出细胞，若将来需进行器官移植，可通过培养该类细胞并加入__________因子以培育出人造组织器官，用于自身移植，这样可避免免疫排斥反应。

（3）借助核移植技术获得器官：哺乳动物核移植可以分为____________核移植（比较容易）和体细胞核移植（比较难）。对于需要进行器官移植的成年患者，可取出病人正常的体细胞，进行细胞培养，将其注入处于____________期的去核卵母细胞中，通过电刺激方法使两细胞融合，然后用物理或化学方法激活受体细胞，使____________发育成器官，由于核基因来自于病人自身，所以器官移植后也不会发生免疫排斥反应。

（4）为了扩大器官供体的来源，科学家试图利用基因工程手段抑制或祛除抗原决定基因，再利用克隆技术，培育出没有免疫排斥反应的猪器官，从而解决供体短缺问题。获得该转基因猪的核心步骤是__________，在该过程中，能驱动基因转录出mRNA的是_______________。

猪的肌肉生长抑制素(MSTN)基因可抑制肌细胞的增殖和分化。CRISPR/Cas9是一种最新出现的基因编辑技术，其主要过程是向导RNA(gRNA，含与目的基因部分序列配对的单链区)与Cas9核酸酶结合，引导Cas9核酸酶对DNA局部解旋并进行定点切割。科研人员利用该技术定向敲除猪胎儿成纤维细胞中MSTN基因，以期获得生长速度快、瘦肉率高的新品种。过程如下图，其中BsmBⅠ、KpnⅠ、EcoRⅠ表示相应限制酶的识别位点。分析回答：

(1)图中①过程用到的工具酶有________，图中gRNA基因序列设计的主要依据是_  _。

(2)科研人员可利用____                ____(方法)将重组质粒导入猪成纤维细胞，经_______           _过程合成Cas9核酸酶。

(3)过程③与DNA复制相比，特有的碱基配对方式有___________      ___。

(4)分析发现某基因敲除细胞株中MSTN基因的表达水平为正常细胞的50%，说明__________________。

(5)欲利用MSTN基因缺失成纤维细胞培育成MSTN基因缺失猪，请简要写出基本的流程。________________                                               ___。