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            • 1. 下图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答:

              (1)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。

              (2)图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下,培养液中加入_________因子,可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。

              (3) 在机体内,皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因________的结果。

              (4)某患者不能产生正常的白细胞,通过骨髓移植可以达到治疗的目的,骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。

              (5)若要克隆某种哺乳动物,从理论上分析,上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________,其原因是___________。

              (6)若某药物可抑制肝肿瘤细胞DNA的复制,使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。

              (7)在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段,用__________细胞与骨髓细胞融合,经多次筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。

                 

            • 2.    (13分)近年来,有关肿瘤细胞特定分子的靶向治疗研究进展迅速。研究发现,蛋白X是细胞膜上的一种受体,由原癌基因X编码。在一些肿瘤细胞中,原癌基因X过量表达会持续激活细胞内的信号传导,启动细胞DNA的复制,导致细胞异常增殖。利用动物细胞融合技术制备的单克隆抗体,可用于诊断和治疗原癌基因X过量表达的肿瘤。请回答下列问题:

              (1)  同一个体各种体细胞来源于受精卵的分裂与分化。正常情况下,体细胞核遗传信息相同的原因是______________

              (2)通过检测原癌基因X的________和________可判断其是否转录和翻译。检测成人多种正常组织后,发现原癌基因X只在乳腺、呼吸道等上皮细胞中有微弱表达,这说明__________________________________________________________。(2分)

              (3)根据以上信息,可推测原癌基因的主要功能是_______________________________________________________。(2分)

              (4)制备该单克隆抗体时,免疫动物的抗原可以是________。B淋巴细胞识别抗原并与之结合,之后在适当的信号作用下增殖分化为________和________。

              (5)用该单克隆抗体处理原癌基因X过量表达的某肿瘤细胞株,发现其增殖能力明显下降。这是因为________________。(2分)

               

            • 3.

              人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

              (1)制备单克隆抗体过程中要用___________和_______技术。

              (2)制备单克隆抗体的过程中,给小鼠注射的HCG相当于___________,使小鼠产生分泌相应_________的淋巴细胞,此过程属于特异性免疫中的______免疫。

              (3)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。

              ①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的_______成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

              ②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是___________________________________。
              (4)哺乳动物在怀孕初期由于_______________________________,为胚胎的收集提供了可能。在胚胎移植技术中收集到胚胎后还要进行 ________,________以及移植后的检查等步骤。

            • 4.

              人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体,科研人员进行研究。

              (1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠,取小鼠的脾脏细胞与_________细胞诱导融合。用_________培养基筛选融合细胞,得到杂交瘤细胞。

              (2)将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作,多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo抗体_________的杂交瘤细胞。

              (3)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如下图:固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合,这是由于不同抗体与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是_________。


              (4)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体,分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行_________组实验,检测并比较各组实验的_________。

            • 5.

              如图为细胞融合过程示意图,请据图回答下列问题:


              (1)若A、B是植物细胞,则其融合形成的D细胞培养成植株,还要应用___________________技术。

              (2)若A、B是动物细胞,则一般取自________、幼龄动物的器官或组织。A、B到C的过程中,常用的不同于植物细胞工程的方法是用___________诱导细胞融合。

              (3)若该过程用于制备单克隆抗体,A是已免疫的B淋巴细胞,则B为_______细胞。为筛选出符合要求的D细胞,方法是用特定的____________________培养基培养,筛选出的D细胞称为_____________________。单克隆抗体的优点是____________________,并可大量制备。

            • 6.

              白细胞介素4(IL-4)是具有多种免疫学调节功能的细胞因子,临床及研究中需要大量高纯度的IL-4,以及其高效检测试剂。下图是利用单克隆抗体技术制备抗IL-4特异性抗体的过程。回答相关问题:


              (1)在免疫系统组成中,IL-4属于 ___物质。研究人员从外周血中提取到IL-4蛋白分子的mRNA,将其反转录成________ ,构建特定表达载体,利用工程菌获得用于临床及研究需要的高纯度的IL-4蛋白。

              (2)图中所示的a培养瓶中培养的是________细胞,其与M细胞融合产生双核或多核细胞,再经________,进一步形成两个新的单核杂交细胞。

              (3)b培养瓶所示过程中,要用特定的选择性培养基进行细胞筛选,得到的            细胞能在体外培养增殖生长。经b获得的细胞,还需要进行  ____。

              (4)c培养瓶中培养的细胞是___的杂交瘤细胞。制备IL-4单克隆抗体的过程中,细胞培养瓶通常置于特定培养箱中进行细胞培养,要求培养瓶松盖,主要目的是____。

            • 7. 下图是制备抗埃博拉病毒VP40蛋白的单克隆抗体的过程,请回答下列问题:

              (1)质粒DNA分子上有一个或多个限制酶切割位点,目的是________。过程①将处理过的质粒和含VP40基因的DNA片段拼接成重组质粒是靠________来完成的。

              (2)过程②中首先需要用Ca2+处理大肠杆菌,使其处于感受态,VP40基因进入大肠杆菌后维持稳定并表达的过程称为________。

              (3)过程③产生的VP40蛋白对于小鼠来说相当于________,一段时间后,若小鼠血清中抗________的抗体检测呈阳性,说明小鼠体内产生了________反应,再从小鼠的________中获取B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经过程④得到的杂交瘤细胞的特点是________________________________。

              (4)用此抗体与放射性同位素、化学药物或细胞毒素相结合,制成________,抗击埃博拉病毒。

            • 8.

              禽流感疫情有逐渐蔓延的趋势,有些国家还出现了人感染的病例。现在,科学家们已陆续从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1亚型禽流感病毒(一种RNA病毒)。 若生产可以用于预防和治疗禽流感的抗体,请根据下面的单克隆抗体制备过程示意图回答有关问题:

               


              (1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞,则B细胞是取自                体内的            细胞,促进d过程的最常用诱导剂是                       

              (2)假设仅考虑某两个细胞的融合,则可形成       种类型的C细胞,因此需用         培养基筛选出                          (填特点)的D细胞用于培养。D细胞的名称是            

              (3)制备的单克隆抗体有                                                   特点,用到的动物细胞工程技术手段有                                                

              (4)静脉注入而不是口服单克隆抗体的原因是                                  

            • 9. 人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关,抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV,从而及时监控宫颈癌的发生,以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程,请据图回答:

              (1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________________。

              (2)若要分析杂交瘤细胞中染色体,可通过________等过程制成装片,然后在显微镜下观察。杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是________________,在HAT培养基上存活的细胞可能包括________(填下列序号)。

              ①无抗体分泌的细胞②抗HPV抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞

              (3)对于抗体检测呈________性的杂交克隆应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个/mL,每孔加入细胞稀释液________mL(填“0.1”“1”或“10”),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。

              (4)由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体,理由是______________________。

              (5)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG),该基因能激发动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外,请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路:_____________________________。

            • 10. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有_____________________.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的________________,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为___________________________。
              (2)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的______________________进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意将_________________________________。转基因牛是否培育成功,可以通过______________________________________技术从分子水平进行检测。
              (3)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的B淋巴细胞与鼠的瘤细胞进行融合的细胞,其特点是_______________________________,对上述细胞还需进行______________和抗体检测,经多次筛选后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是____________________________________________________________________,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
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