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            • 1.

              科学家从某些能无限增殖的细胞质中分离出无限增殖的调控基因(PrG),该基因能激发许多动物细胞分裂,这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景.请回答下列问题.


              (1)利用细胞融合技术制备单克隆抗体时有两次筛选,第一次筛选的目的是________________________,第二次筛选的目的是_________________。

              (2)有人提出,可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,其思路如图1所示.请回答.

              ①已导入重组质粒的Ⅱ进行“检测”的目的是________________________;

              ②题目中Ⅱ所指的细胞是______________________________,Ⅲ所指的细胞具有的特点是__________________________________________.

              (3)也有人提出用细胞核移植技术构建重组细胞来生产单克隆抗体,在图2中试用相关的图示及文字表示该过程.

            • 2. 流感病毒最早是在1933年由英国人威尔逊•史密斯(Wilson Smith)发现的,他称为HIN1,现有很多变种.请回答下列问题.
              (1)流感病毒遗传物质的基本组成单位有______种.
              (2)流感病毒抗原变异幅度大,容易形成新的亚型,此时人群普遍缺乏对它的免疫力,往往引起较大的流行.人类缺乏对新型病毒的免疫力的原因是______.
              (3)如图是一种RNA流感病毒疫苗研制流程.请回答有关的问题:
              将纯化的某种病毒在特定的______中培养、增殖.图中步骤①所需要的原料是______;②选择性扩增S基因的关键是找到与S基因所对应的______;检验S基因是否表达S蛋白的关键是获得与S蛋白能够特异性结合的______.
              (4)若要生产抗流感病毒的单克隆抗体,需用该流感病毒对小鼠进行反复注射;从小鼠的脾脏中得到相应的B淋巴细胞;将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,再用______进行筛选,得到杂交瘤细胞;对上述杂交瘤细胞,还需进行______和克隆化培养,经多次筛选,就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞;将杂交瘤细胞在体内或体外培养,就可以从中提取出大量的能抗该流感病毒的单克隆抗体.
            • 3.

              某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。


              若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。

              回答下列问题:

              (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上,则小鼠最少需要经过______次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是______小鼠,理由是____________________________________________。

              (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有______________________________,体系中出现多种类型细胞的原因是_______________________。

              (3)杂交瘤细胞中有________个细胞核,染色体数目最多是________条。

              (4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是____________________。

            • 4. 研究表明,HER2/neu是一种原癌基因,它表达的H蛋白是一种跨膜蛋白,在多种恶性肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达.抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长,目前已成为有效的生物治疗手段.图1表示H蛋白的结构,胞外区具有抗原特异性,图2示抗H蛋白单克隆抗体的制作过程,图中的“+”表示含有、“-”表示没有,Ig表示抗体.

              (1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点,是因为H蛋白在成年个体的正常组织中______(填“低表达”或“高表达”).制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时,最简便的做法是根据H蛋白______区结构特点构建目的基因,转入原核细胞表达并提纯.
              (2)将H蛋白注射到小鼠体内,从该小鼠的脾脏中分离______细胞与骨髓瘤细胞进行融合,使用的化学诱导剂是______.
              (3)将融合细胞在选择培养基中培养,一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长.将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养,应用______技术进行抗体阳性检测,从而筛选出______细胞.
              (4)在将筛选得到的杂交瘤细胞通过体外培养获取单克隆抗体的过程中,为避免有害代谢产物的积累,常采取的措施是______.
              (5)治疗乳腺癌时,可单独使用抗H蛋白单克隆抗体,也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”,杀死癌细胞.这充分体现了单克隆抗体______的特点.
            • 5.

              抗体的结构如右图所示,它有两条H链和两条L链。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体的结合抗原的V区氨基酸序列有差异。

              (1)抗体是由___________细胞合成并分泌的。若抗体结构中的肽键数目为p,氨基酸数目为a,则二者的关系式为_____________。

              (2)取免疫后小鼠的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选得到杂交瘤细胞。将得到的杂交瘤细胞进行克隆化培养和_____________检测以获得具有______________________特点的杂交瘤细胞。为获得大量的单克隆抗体,将得到的杂交瘤细胞置于含5%CO2的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________________。

              (3)由于鼠源性抗体会使人产生免疫反应,导致该抗体失效,科学家制备了嵌合性单克隆抗体,初步解决了这一问题。推测嵌合性抗体应由___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)”的C区和___________(填“鼠源性抗体” 或“人抗体)的V区组合而成。

              (4)为进一步获得更符合治疗要求的单克隆抗体,科研人员对抗体结构进行精细研究,找到既不影响抗体空间结构又降低免疫反应的__________序列,通过基因工程技术对抗体结构进行人源化改造。这种人源单克隆抗体属于____________工程的产物。

            • 6.

              Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现,GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子,I(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体,对治疗GD进行了尝试。

              (1)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠,几周后取这些免疫小鼠的血清,分别加入多孔培养板的不同孔中,多孔培养板中需加入      以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果,选出      反应最强的培养孔所对应的小鼠M。

              (2)实验用骨髓瘤细胞置于恒温培养箱中37℃下培养,融合前将部分培养细胞置于含HAT的选择培养基中培养,一段时间后培养基中     (填"有"或"无")骨髓瘤细胞生长,说明培养基符合实验要求。

              (3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液,与实验用骨髓瘤细胞进行融合,用选择培养基筛选得到具有       能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养,用ICAM-1检测,从中选择____________的杂交瘤细胞,植入小鼠腹腔中      培养,一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。

              (4)若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用,可将若干GD模型小鼠等分为三组,请补充下表中的实验设计。

              对照组(A)

              131I治疗组(B)

              单克隆抗体治疗组(C)

              给GD模型小鼠腹腔注射0.1mL无菌生理盐水

              给GD模型小鼠腹腔注射溶于0.1mL无菌生理盐水的131I

               

                             

            • 7.

              下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回答下列问题:


              (1)图甲和图乙所示的过程中,培养动物细胞的培养液中为了保证无菌环境,通常还要添加一定量的______________________。

              (2)图甲中②过程常在_____________(化学试剂)诱导下完成,与诱导植物原生质体融合不同的是,②过程也可用_____________诱导融合。杂交瘤细胞的特点是_________________________ ;

              (3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞,其优点是________________________________。

              (4)若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_____________。原因是____________________________________。

              (5)图乙过程的技术具有多种用途,但是不能    (    )

              A.有选择地繁殖某一性别的家畜    B.繁殖家畜中的优良个体

              C.用于保存物种                  D.改变动物的核基因

            • 8.

              现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题:

              (1)科学家将生长激素基因与_______________的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的_______________中,获得转基因动物,再利用_________________技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器,来生产生长激素,用于治疗矮小症。

              (2)单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,再用特定的____培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞后,还需进行__________培养和抗体检测,经过多次筛选,就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是_____________________________________________________。

              (3)为建设美丽乡村,积极推进生态农业建设,依据生态工程_______________的原理,合理设计食物链,使生态系统中的物质和能量得到分层次多级利用,使废弃物资源化,提高了能量的_____________,减少了环境污染。

            • 9. 生物技术已经渗入到了我们生活的方方面面,比如:
              (1)目前临床用的胰岛素生效较慢,科学家将胰岛素B链的第28和29个氨基酸调换顺序,成功获得了速效胰岛素.生产速效胰岛素,需要对______(胰岛素/胰岛素mRNA/胰岛素基因/胰岛)进行定向改造.
              (2)科学家利用人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,制作出了早早孕试纸.要获得人绒毛膜促性腺激素的单克隆抗体,需要先将______注射到小鼠体内,培养一段时间之后,将从小鼠脾脏中提取出的______和小鼠的骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞.
              (3)许多不孕不育的夫妇受益于试管婴儿技术,在体外受精前,要对采集到的精子进行______处理,才能与卵子受精.受精后形成的受精卵要移入______培养液中继续培养一段时间再移植到母亲体内,早期胚胎发育到______阶段的某一时刻,会冲破透明带,称之为“孵化”.
              (4)生态工程是实现______经济最重要的手段之一.在进行林业工程建设时,一方面要号召农民种树,保护环境.另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题,如粮食、烧柴以及收入等问题,其主要体现的生态工程的基本原理是______(只填一个).
            • 10. 如图为单克隆抗体制备流程示意图.

              (1)单克隆抗体制备技术的基础是______.
              (2)细胞融合是随机的过程,在HAT培养基中培养,目的是______.在细胞培养过程中,培养液中需要添加无机盐,但要注意无机盐的______,以保证生命活动的正常进行.
              (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞,要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7~10个细胞/ml,每孔滴入0.1ml细胞稀释液,其目的是______.
              (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞,放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是______.
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