为探究SHH基因与角化囊肿发生的相关性，科研人员利用SHH基因的非模板链转录合成的RNA作为探针，进行分子杂交实验，以检测SHH基因在角化囊肿中的表达情况。其基本流程如下图（Amp表示氨苄青霉素抗性基因；LacZ基因被SHH基因插入后不表达）。

请回答：

（1）获得大量目的基因常用________技术，其原理是_________。

（2）步骤②中，用Ca^2＋处理大肠杆菌，使之成为________细胞，然后导入重组载体。实验中，用添加氨苄青霉素的培养基培养大肠杆菌，未导入质粒的细菌将会死亡，原因是这些细菌不含有________基因。

（3）能表达LacZ基因的大肠杆菌在含有IPTG和X-gal的培养基上会形成蓝色菌落，易于识别。根据上述原理可以初步判断_______（填“蓝色”或“白色”）菌落中的大肠杆菌为重组菌。

（4）将制备的探针加入角化囊肿切片中，探针将与________形成杂交带，进而判断SHH基因的转录情况。

（5）除了基因工程外，细胞工程和胚胎工程也在人类生活中发挥了巨大作用。例如“试管婴儿”自诞生就引起了世界科学界的轰动，甚至被称为人类生殖技术的一大创举。也为治疗不孕不育症开辟了新途径。“试管婴儿”的诞生实际上结合了________、早期胚胎培养、胚胎移植等多种技术手段。再如，通过动物细胞杂交技术制备的单克隆抗体具有__________和灵敏度高等特性，因而广泛应用于疾病的检测、肿瘤的定位等方面。

已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但有些淋巴细胞不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖。将这两种细胞在培养皿中混合，加促融剂促进细胞融合，获得杂种细胞，并生产单克隆抗体。请回答：

（1）生产单克隆抗体时，不直接利用浆细胞，主要原因是_______________ 。

（2）①过程中，常用的与植物细胞融合相同的诱导剂是_____________________。

（3）②过程为_______培养，培养液中还需通入气体物质，其中通入CO₂的目的是__________。

（4）④表示杂交瘤细胞的扩大培养,其既可在体外培养，也可注射到小鼠_______内培养.体内培养与体外培养相比,其优点是_____________________。

（5）为了从培养液中分离出杂交瘤细胞，需在③过程向培养液中加入________________，理由是杂交瘤细胞可利用____________________途径合成DNA，从而才能在该培养液中增殖。

下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题：

(1) 图1所示过程所用的生物技术有         。

(2) 将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选：一次是通过           培养基，筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过            检测，筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(3) 通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X，其原因是该抗体具有                   的特点。

(4) 图2中的重组细胞         (填“①”或“②”)实现了基因的重组。

(5) 图2中的早期胚胎发育到         阶段才可以移植，在移植之前，需要进行质量检查，用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是                。

(6) 为了获得多个基因型相同的优质奶牛，可采用的技术手段是         。

如图所示为细胞融合技术的一些过程：

 (1) 若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，可以用_______（ 写出一种）方法诱导融合。融合后的细胞种类多样，需要用特定的选择培养基筛选既能_____又能_______的D细胞。之后将D细胞在体外大规模培养，就可以从细胞培养液可以提取大量的纯度高、______的单克隆抗体了。      

 (2) 若A、B为单倍体烟草植物的原生质体，那么已经用___________酶降解脱掉了细胞壁。D细胞成活的标志是________。利用该技术培育烟草新品种依据的生物学原理是 ________________。

(3) 若将二倍体基因型为AaBB的白菜体细胞，与二倍体基因型为ccDd的甘蓝体细胞融合，再由融合细胞培养成新个体，完成整个过程所用到的技术是________，新个体的基因型是______，是____倍体生物。

细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：

(1)若a、b分别为精子和卵母细胞，则从良种母牛体内采集的卵母细胞，一般要培养到________________阶段才能进行体外受精。

(2)若a、b表示两种植物体细胞，在融合前，往往用____________________去除细胞壁。采用化学法形成c时，一般是用________________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是______________________，这种育种方法的优点是____________________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________。用特定的选择培养基筛选获得d细胞，然后经_________________筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。其中d细胞克隆化培养的方法有两种：______________，这样经克隆化培养后制备的抗体有____________________________的特点。

科学家从某无限增殖细胞的细胞质中分离出无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更为广阔的前景。请回答：

 ( 2 )也有人提出，可以直接通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，其思路如图。

①酶A是指________，酶B是指__________________________。

②图中Ⅰ表示________，对Ⅱ进行检测与鉴定的目的是______________，Ⅲ所指的细胞具有的特点是_______________。

下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的_________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为___________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，______________ 、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。假定在该DNA复制中，其中以a链为模板的复制，其子链是由左向右延伸的。

则在流程图的过程①中应选择___________（填字母）作为引物。如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________和_______________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中_________和__________ 等技术的支持。

请回答下列有关细胞工程和胚胎工程两方面的问题：

（1）植物体细胞杂交过程中，原生质体经诱导融合成功的标志是_______________。为了防止杂种细胞培养过程中细菌的污染，可向培养基中加入适量的_____________。为了诱导杂种植株生根，须设置培养基中生长素与细胞分裂素的比例_______ 1（填“大于”“等于”或“小于”）。

（2）图中为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经筛选后继续培养）。

Ⅰ.AB段可能发生了____________现象。动物细胞培养和植物组织培养过程中，就细胞增殖、分化来说，二者除了都需要增殖外，植物细胞不同于动物细胞的是还要进行_________。

Ⅱ.为制备单克隆抗体，需将特定抗原注射到小鼠体内，以此获取B细胞，同时可选取图中_____点的细胞与该细胞融合形成杂交细胞。单克隆抗体制备过程中，经过融合和初步筛选后得到的杂交细胞还需要再经过_____和_____才能得到符合要求的杂交瘤细胞。单克隆抗体的应用主要有两个方面,一个是作为_______试剂,能准确地识别各种抗原物质的细微差别,并跟一定抗原发生特异性反应。另一方面可以用于治疗疾病和______________。

（3）雌性动物卵泡的形成是在______时期完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。体内受精过程中，防止多精入卵的第一道屏障是___________。早期胚胎发育中初次发生分化的时期，在胚胎的一端有一团细胞，称___________________，将发育为胎儿的各个组织。此时，胚胎中央的腔体称为___________________。胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做___________________，此后，胚胎进一步发育为___________________。

下图为细胞融合的简略过程示意图，请据图完成问题：

（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用酶处理去掉了细胞壁，所用的酶可能是____________，由此生成的A和B称为____________；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法有离心、振动、电激。融合完成的标志是____________。

（2）若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物的器官、组织，然后用使其分散开来；A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞工程的方法是用____________诱导细胞融合。对融合得到的D进行大规模培养时需要提供的气体环境为____________，其中CO₂的作用是____________。此外，培养液还应进行无菌处理，通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防____________。

（3）若A为骨髓瘤细胞，B为经免疫的B淋巴细胞，那么D称为____________，这种细胞既能大量繁殖，又能产生____________。

（4）若该过程用于单克隆抗体的制备，应筛选出符合要求的D，为了大规模的生产单克隆抗体，还需对D进行第二次筛选，第二次筛选的目的是______________________。 

疫苗和抗体已被广泛应用于预防与诊疗传染性疾病的过程，已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。疫苗的生产和抗体的制备流程如下图所示，请回答下列问题：

(1)③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的________所识别，以便于其催化转录过程。

(2)下图为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2 000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是____个。

(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的____     ____数目。过程⑥的实质为________________。

(4)在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次筛选出_________        _____   _，第二次筛

选出 ________  _              _,扩大培养的原理是_____________。

(5)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的________来制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的________与分离出的病毒进行特异性检测。