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            • 1. 牛病毒性腹泻病是由牛腹泻病毒(BVDV)引起牛、羊、猪、骆驼等动物的急性接触性传染病,该病毒宿主非常广泛,是危害我国养殖业的重要传染病之一。为了快速分离、检测BVDV,科学家制备了BVDV的单克隆抗体,制备过程如图所示。请据图回答下列问题:
              (1)将BVDV注射入小鼠体内后,从小鼠体内获取的乙细胞为______,其功能是______。随后将甲、乙两种细胞放在同一个试管中,加入______(填一种化学试剂名称)诱导融合,再经过至少______次筛选,获得所需要的杂交瘤细胞,其特点是______。
              (2)实验室通过B途径培养杂交瘤细胞,最终将在______获得单克隆抗体。单克隆抗体的优点是______。若B途径中这些小鼠相互交配,其后代______(填“具备”或“不具备”)产生单克隆抗体的特性。
              (3)由于杂交瘤细胞染色体数目为正常体细胞的______倍,其细胞分裂周期与甲细胞相比会______(填“变长”“变短”或“不变”)。为克服此缺点,科学家欲借助基因工程制备单克隆抗体,从乙细胞中获取______基因,与运载体结合后,通过______法导入甲细胞内,即可获得新型的“杂交瘤细胞”。
            • 2.

              人感染埃博拉病毒(EV)会引起致命的出血热。为了寻找治疗EV病的有效方法,中外科学家进行了系列研究。


                                   图1                                                        图2


                                                        图3

              (1)EV表面的糖蛋白(EV-GP)作为________刺激机体产生________性免疫反应。

              (2)科学家采集了多年前感染EV并已康复的甲、乙两人的血液,检测抗EV-GP抗体的水平。据图1,应选取________的血液分离记忆B细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。

              (3)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率。据图2,抑制效果最好的两种单抗是______________。

              (4)EV-GP具有多个与抗体结合的位点。为了研究上述两种单抗(分别称为A、B)与EV-GP结合的位点是否相同,可按图3所示简要流程进行实验。

              ①请将图3中应使用的抗体填入下表ⅰ、ⅱ、ⅲ、ⅳ处(填“A”“B”或“无关抗体”),完成实验方案(一种即可)。

                 抗体

              组别   

              未标记抗体

              荧光标记抗体

              实验组

              ⅰ________

              ⅱ________

              对照组1

              ⅲ________

              ⅳ________

              对照组2

              同ⅱ

              同ⅱ

              ②若A、B与EV-GP结合的位点不同,与对照组1、2分别比较,实验组的荧光值应____________________________________。

              (5)中国科学家用分子结构成像技术证实了A、B与EV-GP 结合的位点不同。基于上述系列研究,请你为治疗EV病提供一种思路:_________________。

            • 3.

              下图表示利用经抗原免疫后的B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞进行杂交,制备单克隆抗体的过程。请据图回答下列问题:

              (1)在单克隆抗体的制备过程中,应用了细胞工程中的____________和_________两大技术。

              (2)杂交瘤细胞具有___________特点;单克隆抗体具有_______________________的优点。

              (3)培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清,原因是___________;培养的杂交瘤细胞不会出现接触抑制现象,为什么?_____________。

              (4)对筛选出来的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化,克隆化的方法最常用的是有限稀释法,即稀释细胞到3~10个细胞/mL,每孔加入细胞稀释液_     __          _mL(填"0.1""1"或"10"),使每个孔内不多于一个细胞,达到单克隆培养的目的。

              (5)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(如癌变细胞等)并与之结合,而不攻击正常细胞,故可制成“生物导弹”,这是利用了_______的原理。

            • 4. EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体,科研人员用小鼠进行实验。
              (1)将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内,引发小鼠机体的______免疫,产生相应的抗体。
              (2)多次免疫后,分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清,测定抗体与抗原的结合强度,结果如图所示。
              ①EV71免疫的小鼠血清抗体______(填“是”或“不是”)单一抗体,判断依据是______。
              ②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度,目的是排除______的影响。
              ③制备抗EV71单克隆抗体时,选用______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳,依据是______。
              (3)取相应免疫组小鼠的脾脏,剪碎并用______酶处理得到小鼠脾脏细胞,用灭活的病毒诱导,与______细胞融合,筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
              (4)为进一步研究抗体的作用效果,科研人员培养上述杂交瘤细胞株,获得5种单克隆抗体,分别将它们与等量EV71混合,加入到5组RD细胞(EV71的宿主细胞)中,测定______,以分析抗体的作用效果。
            • 5. “生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞,制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一,其过程如图所示:

              (1)在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中,要快速获得大量的A基因可采用______技术.在该技术中,解旋的方法是______;过程③所用的方法是______;④过程一般选择发育良好的______,移植到受体牛的子宫中.
              (2)在⑥-⑨批量生产生物导弹的过程中,⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为______.⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是______,要得到所需的杂交瘤细胞要经过______次筛选,最终筛选出的杂交瘤细胞的特点是______.
            • 6.

              单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。



              (1)病原体注入小鼠体内后,要经过_________细胞处理后形成抗原—MHC复合体,才能被免疫细胞识别。

              (2)制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集,然后用_______________(动物细胞特有)诱导,使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合,如果只考虑两个细胞融合,细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外,还含有____,体系中出现多种类型细胞的原因是________。

              (3)生产单克隆抗体时涉及两次筛选,第一次用选择培养基选出_______________,第二次筛选是选出                 _______________

              (4)单克隆抗体还可以用下面方法制备:



              prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体时,Ⅱ最可能是________细胞。某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因(prG)的重组DNA,如图(c)所示。这三种重组子中,目的基因能在宿主细胞中正确表达的有_________。

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