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          50条信息

            • 1.
              如图是科学家利用小鼠成纤维细胞获得单克隆抗体的示意图.请据图回答:

              (1)获取转录因子基因需要的工具酶是 ______ ,因成纤维细胞较小,过程①将目的基因导入小鼠成纤维细胞时常用的运载体是 ______ .
              (2)过程②称为 ______ ,在此过程中,成纤维细胞在转录因子基因的作用下,转化为iPS胚性细胞,在体外培养条件下,iPS胚性细胞能不断进行 ______ .
              (3)过程③为动物细胞融合,此过程常用 ______ 、灭活病毒、电刺激等诱导细胞融合,融合后的Y细胞具有 ______ 的特性.
              (4)对杂种细胞Y进行 ______ 和 ______ 后,才能筛选出能产生特异性抗体的杂种细胞.
            • 2.
              制备单克隆抗体的过程中,需筛选出杂交瘤细胞.一般情况下,细胞内DNA合成除了主要途径以外还有一条辅助途径,而骨髓瘤细胞没有此辅助途径,DNA合成的主要途径可以被氨基碟呤阻断,利用这一特性可以筛选出杂交瘤细胞.
              (1)制备单克隆抗体时,选用B淋巴细胞的原因是 ______ ,选用骨髓瘤细胞的原因是 ______ .研究发现,被激活的B淋巴细胞内含有发达的粗面内质网,这与 ______ 的功能相适应.
              (2)加入适量氨基碟呤的培养基称为 ______  培养基,氨基喋呤的作用主要是为了淘汰 ______ 细胞.
              (3)诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合常用的化学试剂是 ______ .对杂交瘤细胞进行体外培养需要适CO2,CO2的作用是 ______ .
            • 3.
              如图1为生产HIV单克隆抗体的过程,图2为运用基因工程技术生产HIV疫苗的操作简要路径。据图分析回答。

              (1)图1中,过程①称为 ______ 技术,过程②融合实验完成后得到的杂交瘤细胞所产生的抗体的优点是 ______ 。
              (2)图2中,过程①需要用到 ______ 酶。一个DNA片段进行扩增最简便的方法是使用PCR技术,如果这个过程中消耗了引物62个,则进行了 ______ 轮的DNA复制。
              (3)若将重组质粒导入小鼠受精卵细胞中,通常应采取 ______ 技术。
              (4)用限制酶处理DNA片段,可使特定核苷酸序列特定部位的键断开。若用X、Y两种限制酶作用于图2中的DNA片段,并进行电泳分析,其结果如图3.A至D选项中,关于两种酶切位置的判断,正确的是 ______ 。
            • 4.
              人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,人工制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。回答下列问题。
              (1)制备单克隆抗体过程中要用到 ______ 和 ______ 技术。制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于 ______ ,使小鼠产生能分泌相应抗体的浆细胞。
              (2)在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸,进而合成DNA,而氨基喋呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下,经酶催化合成DNA,而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。根据这样的原理,向经诱导后的浆细胞与骨髓瘤细胞混合培养液中添加氨基喋呤 ______ (填“能”或“不能”)能筛选杂交瘤细胞,原因是 ______ 。
              (3)筛选获得的杂交瘤细胞具有 ______ 的特点。利用杂交瘤细胞生产的单克隆抗体可以与 ______ 特异性结合,从而诊断早孕。
            • 5.
              请回答下列与生物工程有关的问题:
              (1)基因工程中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有 ______ 序列,以便根据这一序列合成 ______ ,我国科学家独创了一种将目的基因导入受体细胞方法研究成功了转基因抗虫棉,该方法是 ______ 。
              (2)与传统方法生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点,单克隆抗体的制备过程主要应用了 ______ 技术。
              (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是 ______ 。
              (4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程的 ______  原理,系统各组分间要有适当的比例关系,并且实现“1+1>2”的效果,体现了生态工程的 ______  原理。
            • 6.
              已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,制备抗A蛋白抗体的部分流程如下图.

              请回答:
              (1)①代表的是______过程.为获得A基因表达载体,需用______酶对A基因和运载体进行切割.将A基因表达载体导入动物细胞常用的方法是______.
              (2)利用PCR技术扩增A基因时,设计引物序列的主要依据是______,加入引物的作用是______.
              (3)与体内DNA复制相比较,PCR反应要在一定的缓冲溶液中才能进行,并且要严格控制______等条件.
              (4)过程③采用的技术是______,获得的X叫______ 细胞.
            • 7.
              抗体的结构如图所示它有两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定,不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。
              (1)在生物体内,抗体是由 ______ 细胞分泌的,该细胞可以来自于 ______ 增殖分化。
              (2)传统方法获取抗体时,需要将相应的抗原反复注射到动物体内,从动物的 ______ 中分离抗体。显然,这种方法产生的抗体产量和纯度等都很低,特异性差,单克隆抗体的出现,克服了传统抗体的不足,单克隆抗体是指 ______ 。
              (3)天然的抗体左右两个V区结构完全相同,只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体(又叫双特异性抗体),它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下:将能分泌抗体1的杂交瘤细胞(A细胞)与能分泌抗体2的淋巴细胞(B细胞)进行融合,形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种一杂交瘤细胞(A-B)。细胞融合时需要用 ______ 、 ______ 或电刺激等方法诱导,融合后总共应该有 ______ 细胞(最多考虑两两融合),用A、B字母表示出这些细胞组合 ______ 。
              (4)双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”:用其中一个V区识别癌细胞表面 ______ ,用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置,这里,T细胞对癌细胞的攻击属于 ______ 免疫。
              (5)细胞融合方法得到的双功能抗体,只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上,人们无法改变V区的结构。通过 ______ 技术,可以对双功能抗体的V区进行设计改造,使其更适合人类的需要。这种改造,最终还必须通过对 ______ 分子的改造来完成。
            • 8.
              请回答下列与基因工程、胚胎工程、生态工程有关的生物学问题:
              (1)基因工程技术中获得目的基因后,利用PCR技术将该基因扩增,前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成______.培育抗病转基因植物时,使用最多的抗病基因是______基因和病毒复制酶基因.
              (2)在胚胎工程中,早期胚胎发育到______阶段即可移植到代孕母体子宫中,移植后的胚胎能在受体了宫内存活的生理基础是______.
              (3)与传统方生成的抗体相比,单克隆抗体具有很多优点.在癌症治疗时,把抗癌细胞的单克隆抗体与放射性同位素、化学药物或______相结合,制成“生物导弹”,借助单克隆抗体的______作用,将药物带到癌细胞位置,将其在原位杀死.单克隆抗体的制备过程应用了______技术.
              (4)我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”.其失败的原因主要是违背了______原理.
            • 9.

              制备杂交瘤细胞时,取免疫后小鼠的B淋巴细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,由于细胞融合是随机的,且融合率达不到100%。结果得到的融合体系中除含有杂交瘤细胞外,还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞、未融合的B淋巴细胞和未融合的骨髓瘤细胞。

                 细胸内DNA合成一般有两条途径:D途径和S途径。B淋巴细胞同时具有两条途径合DNA,骨髓瘤细胞S途径缺失。

              (1)人们创建杂交瘤技术是为了获得具有疾病的诊断、预防、治疗价值的单克隆抗体,单克隆抗体最主要的做点是________。

              (2)如果用可以阻断细胞内DNA合成D途径的培养基进行筛选,在上述融合体系的细胞中,未融合的骨髓瘤细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胸是不能增殖的,其原因是________;但是短期内________(填细胞名称)可以增殖;若利用上述培养基,对存活细胸经多次传代培养,最终只得到杂交瘤细胞,其余细胞不能存活的原因是________。

              (3)为了进一步得到所需的杂交瘤细胞,还需进行克隆化培养和________。

              (4)杂交瘤技术中的细胞融合和抗体分泌都离不开细胞膜,这体现了细胞膜具有________的特点。

            • 10. 单克隆抗体在理论和实践上的应用成为解决生物学和医学问题的重要手段,但是,自单克隆抗体技术问世以来,在临床治疗方面进展缓慢,主要原因是单克隆抗体大多是鼠源性的,而鼠源单抗应用于人体治疗时存在诸多问题。目前基因工程抗体在疾病的预防、诊断及治疗方面已获得广泛应用。请回答下列问题:

              (1)如图为单克隆抗体制备过程中的几个关键性步骤,请用箭头和字母按顺序写出单克隆抗体的制备步骤:______
              (2)杂交瘤细胞兼具两个亲本细胞的遗传特性,其中______为它提供了能无限增殖的遗传基础,而______为其提供了产生______的遗传基础。
              (3)为选育出能产生特定抗体的细胞,要将培养液稀释到每毫升7〜10个细胞,每孔滴入0.1mL细胞稀释液,其目的是______
              (4)鼠源单抗应用于人体治疗时存在的问题之一,就是能被人类免疫系统所识别,鼠源单抗作为______能诱发人的______免疫进而被清除。
              (5)基因工程单克隆抗体的基本原理是将改造后的目的基因导入小鼠的______中,发育到一定阶段后经______技术植入受体动物的子宫中,在抗原的刺激下,该转基因鼠可合成分泌人的抗体。
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