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            • 1． 牛病毒性腹泻病是由牛腹泻病毒（BVDV）引起牛、羊、猪、骆驼等动物的急性接触性传染病，该病毒宿主非常广泛，是危害我国养殖业的重要传染病之一。为了快速分离、检测BVDV，科学家制备了BVDV的单克隆抗体，制备过程如图所示。请据图回答下列问题：
              （1）将BVDV注射入小鼠体内后，从小鼠体内获取的乙细胞为______，其功能是______。随后将甲、乙两种细胞放在同一个试管中，加入______（填一种化学试剂名称）诱导融合，再经过至少______次筛选，获得所需要的杂交瘤细胞，其特点是______。
              （2）实验室通过B途径培养杂交瘤细胞，最终将在______获得单克隆抗体。单克隆抗体的优点是______。若B途径中这些小鼠相互交配，其后代______（填“具备”或“不具备”）产生单克隆抗体的特性。
              （3）由于杂交瘤细胞染色体数目为正常体细胞的______倍，其细胞分裂周期与甲细胞相比会______（填“变长”“变短”或“不变”）。为克服此缺点，科学家欲借助基因工程制备单克隆抗体，从乙细胞中获取______基因，与运载体结合后，通过______法导入甲细胞内，即可获得新型的“杂交瘤细胞”。
              难度：较易
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            • 2． 甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B。某研究小组拟培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：
              (1)为了培养该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用______酶和____酶去除细胞壁，获得具有活力的____________________，再用化学诱导剂诱导二者融合。形成的融合细胞进一步培养形成_______组织，然后经过_______形成完整的杂种植株。这种培养技术称为_____________。
              (2)上述杂种植株属于多倍体，多倍体是指_________________。假设甲和乙有性杂交的后代是不育的，而上述杂种植株是可育的，造成这种差异的原因是______________________________。
              (3)这种杂种植株可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的  
              __________________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。
              难度：较难
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            • 3． 铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一，应用组织培养技术培养铁皮石斛拟原球茎(简称PLBs，类似愈伤组织)生产生物碱的实验流程如下：

              在固体培养基上，PLBs的重量、生物碱含量随增殖培养时间的变化如图所示，请回答下列问题：

              ⑴选用新生营养芽为外植体的原因是  ，诱导外植体形成PLBs的过程称  。
              ⑵与黑暗条件下相比，PLBs在光照条件下生长的优势体现在  ，  ，  。
              ⑶脱落酸(ABA)能提高生物碱含量，但会抑制PLBs的生长。若采用液体培养，推测添加适量的ABA可提高生物碱产量。同学们拟开展探究实验验证该推测，在设计实验方案是探讨了以下问题：
              ①ABA的浓度梯度设置和添加方式：设4个ABA处理组，1个空白对照组，3次重复。因ABA受热易分解，故一定浓度的无菌ABA母液应在各组液体培养基  后按比例加入。②实验进程和取样：实验50天完成，每10天取样，将样品(PLBs)称重(g/瓶)后再测定生物碱含量。如初始(第0天)数据已知，实验过程中还需测定的样品数为  。
              ③依所测定数据确定适宜的ABA浓度和培养时间：当某3个样品(重复样)的  时，其对应的ABA浓度为适宜浓度，对应的培养时间是适宜培养时间。
              难度：难
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            • 4． 下图为利用生物技术获得生物新品种的过程。据图回答：

              (1)A→B必需的工具酶有  。
              (2)在基因工程中，B表示  。
              (3)B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到生物技术主要有  。
              (4)若使用棉花的体细胞为受体细胞，⑤表示的生物技术是  。请简述利用棉花受体细胞培育成转基因抗虫棉幼苗的过程：  。
              (5)要确定目的基因(抗虫基因)是否导入受体细胞，检测的方法是  。
              目的基因(抗虫基因)是否能稳定遗传并表达，在个体水平上通过  进行检测和鉴定。
              (6)转基因工程改良动植物的品种，最突出的优点是  。
              难度：中等
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            • 5． 人类在预防与诊疗传染性疾病的过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图，请回答：

              (1)过程①代表的是______________。
              (2)过程②构建A基因表达载体时，必须使用__________和__________两种工具酶。
              (3)过程③采用的实验技术是____________，获得的X是____________。
              (4)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的__________所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可从疑似患者体内分离病毒，与已知病毒进行________比较；或用图中的____________________进行特异性结合检测。
              难度：较易
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            • 6． EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。
              （1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为______分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的______免疫，产生相应的抗体。
              （2）多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。
              ①EV71免疫的小鼠血清抗体______（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是______。
              ②测定各组小鼠血清与非EV71蛋白结合强度，目的是排除______的影响。
              ③制备抗EV71单克隆抗体时，选用______免疫的小鼠脾脏细胞效果最佳，依据是______。
              （3）取相应免疫组小鼠的脾脏，剪碎并用______酶处理得到小鼠脾脏细胞，用灭活的病毒诱导，与______细胞融合，筛选获得5个不同的杂交瘤细胞株。
              （4）为进一步研究抗体的作用效果，科研人员培养上述杂交瘤细胞株，获得5种单克隆抗体，分别将它们与等量EV71混合，加入到5组RD细胞（EV71的宿主细胞）中，测定______，以分析抗体的作用效果。
              难度：较易
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            • 7． “生物导弹”可用于杀死人类某些癌细胞，制备“生物导弹”是单克隆抗体的重要应用之一，其过程如图所示：

              （1）在①-⑤批量生产A蛋白抗原的过程中，要快速获得大量的A基因可采用______技术．在该技术中，解旋的方法是______；过程③所用的方法是______；④过程一般选择发育良好的______，移植到受体牛的子宫中．
              （2）在⑥-⑨批量生产生物导弹的过程中，⑦过程所用的“脾脏中的细胞”为______．⑦过程区别于植物体细胞杂交技术所特有的诱导因素是______，要得到所需的杂交瘤细胞要经过______次筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的特点是______．
              难度：中等
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            • 8． 我国科学家张道远先生通过从耐旱灌木白花柽柳中克隆得到TSOD基因，利用转基因技术转化到棉花中，获得了具备更强抗旱性的T4代转基因棉花株系。下图为转基因抗旱棉花的培育过程示意图，请据图回答：

              (1)①过程表示用______扩增目的基因的方法。②过程用到的工具酶有______。步骤③一般用______处理农杆菌，使其易吸收周围环境中的DNA分子。
              (2)将重组质粒导入棉花细胞除步骤④所示的方法外，还可采用______。如果受体细胞是动物的受精卵，则一般采用的方法是____。
              (3)外植体培养成为试管苗的过程采用了______技术，利用了______的原理，步骤⑤⑥表示________。
              (4)为了确定抗旱转基因棉花是否培育成功，可先用放射性同位素标记的______________作探针进行分子水平鉴定，再_______进行个体水平鉴定棉花植株的抗旱性。
              难度：难
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            • 9．

              单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。



              （1）病原体注入小鼠体内后，要经过_________细胞处理后形成抗原—MHC复合体，才能被免疫细胞识别。

              （2）制备单克隆抗体所用的B淋巴细胞一般从脾中采集，然后用_______________（动物细胞特有）诱导，使B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，如果只考虑两个细胞融合，细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外,还含有____,体系中出现多种类型细胞的原因是________。

              （3）生产单克隆抗体时涉及两次筛选，第一次用选择培养基选出_______________，第二次筛选是选出                 _______________。

              （4）单克隆抗体还可以用下面方法制备：



              prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体时，Ⅱ最可能是________细胞。某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因（prG）的重组DNA，如图(c)所示。这三种重组子中，目的基因能在宿主细胞中正确表达的有_________。

              难度：中等
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            • 10．

              回答下列与生物工程有关的内容：

              （1）基因工程技术中，　              　是将目的基因导入植物细胞最常用的方法．

              试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精，发育成胚胎后，再移植回母体子宫内，以达到受孕目的一种技术．顺受受精必须满足两个条件：来自父方的精子要进行　        　；来自母方的卵母细胞要培养促进成熟（或培养至 II中期）．　       　（填生物技术）是培育试管婴儿最后一道工序．一般来说，该技术操作比较合适的时期是　                          ．与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体逊主要的优点是特异性强、灵敏度高、　  ．在癌症治疗时，把抗癌细胞的单克隆抗体跟　      　相结合，制成的“生物导弹”，借助单克隆抗体的　            　作用，将药物带到癌细胞位置，将其在原位杀死．

              难度：难
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