为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响，分析回答：

①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在恒温的培养箱中培养22-24h。

②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表。

③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。

④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44-48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5-9天观察囊胚发育情况。

如表亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响

（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO₂的作用是____________。

（2）步骤②中，卵母细胞发育到____________时期才能与获能的精子受精；步骤③中，判断是否受精的依据是____________。

（3）步骤④中，受精卵经过卵裂期、____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是____________。

（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L^-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起____________作用（填“促进”、“抑制”）。

（5）将囊胚移植到受体（代孕母牛）子宫内，最终生出的犊牛和受体遗传上有无亲缘关系？____________原因是___________

____________。

用医学手段培育“三亲婴儿”可以解决遗传基因带来的缺陷，其培养过程如图所示．请据图回答有关问题：

（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前需要注射________激素，促使一次有更多的卵泡发育。重组细胞体外培养所需的气体主要是O₂和CO₂，CO₂的主要作用是___________________。

（2）从受精卵到三亲婴儿的培养还需要______和______等技术。三亲婴儿的培育方式属于____________生殖．

（3）三亲婴儿的培育技术______（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。三亲婴儿的染色体______（填比例）来自母亲提供的细胞核．设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行_____________________。

胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：

(1)应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于__________，细胞B的名称是___________。

(2)应用2中牛完成体内受精的场所是_________，此时卵子需要达到________期，才具备与精子受精的能力。

(3)获得更多基因型完全相同的牛，可采用图中的应用______（填数字）的培养技术。

(4)胚胎干细胞可以从细胞C__________或细胞D__________中分离出来。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其本质原因是____________的结果。

（1）若分离以尿素为氮源的细菌。在含有___酶的细菌菌落周围会出现，这是由于尿素被分解产生的氨气使PH升高，______指示剂产生颜色变化。采用______法将发酵菌株固定在锯末上制成固定化菌株，可大幅缩短生产周期,降低生产成本和提高生产效率。

(2)亚硝酸盐测定原理:亚硝酸盐可与________________发生重氮化反应.这一产物再与____________________偶联,形成__________色产物。

（3）获得目的基因，获取已知目的基因序列用化学方法合成或_________________

基因工程的核心:通常用_________________分别切割目的基因和载体DNA，然后用________将目的基因和载体DNA连接在一起,形成重组DNA分子。

（4）卵巢经超数排卵处理后，要使用__________________确定卵泡的位置。     

 科研人员单独培养胚胎干细胞，首先需要在培养皿底部制备一层______细胞，称为饲养层。 利用动物细胞培养技术中的细胞具有________________和__________________的特点可用烧伤患者自身的健康皮肤细胞培养出大量自身薄层皮肤细胞，用于移植。

（5）植物克隆和动物克隆共有的培养方法是_______

A.原生质体培养、传代培养     B.贴壁培养、传代培养 

C.器官培养、愈伤组织培养     D.悬浮培养、器官培

有关现代生物科技技术，请回答下列问题。

（1）动物体内，精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的__________能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。经过______的精子才能与达到 ________期的卵子受精。受精时，先后有__________和 ___________两道屏障防止多精入卵。若在卵黄膜和透明带之间看到_____________，这是判断卵子是否受精的重要标准。_______________ 

（2）试管动物的培育主要包括________、早期胚胎培养和胚胎移植三个环节。胚胎移植时，为了给移入的外来胚胎提供相同的生理环境，需要对供、受体母牛进行_______处理。

（3）为了提高胚胎利用率，可以采用____________方法对早期胚胎进行切割，切割时，通常选择发育良好、形态正常的____________胚，特别注意将________均等分割，否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育，选择______________细胞进行性别鉴定。

(4) 通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

科学家利用转基因技术将人的高血压相关基因导入大鼠受精卵，培育遗传性高血压转基因模型大鼠，以研究遗传性高血压的致病机理及筛选有效的治疗药物。请回答：

(1)获得目的基因后，常利用_________技术在体外将其大量扩增。在构建基因表达载体的过程中，除了目的基因外，还必须有启动子、终止子、复制原点和__________。

(2)将人的高血压相关基因导入受精卵中的最有效方法是______________。

(3)在体外培养受精卵时，培养液中通常需加入________等一些天然成分，还需要提供CO₂以维持______________。

(4)胚胎移植前应保持供体和受体的_______相同，所以要对供、受体鼠进行________处理。

某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题，引进了具高产奶基因但对本地适应性差的 纯种公牛。

（1）拟进行如下杂交。

♂A（具高产奶基因的纯种）╳♀B（具适宜本地生长基因的纯种）→C

若C中的母牛表现为适宜本地生长，但产奶量并不提高，说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是________，后代中出现这种母牛的概率是______（假设两对基因分别位于不同对常染色体上）。

（2）用以上最佳组合，按以下流程可加速获得优良个体。

①  动物细胞培养是动物细胞工程最基础的技术。在此技术中单细胞的获取通常需要用________进行处理，动物细胞在培养过程中培养箱所需的气体环境为___________。在培养过程中，应定期更换培养液，其目的是__________。

② 精子要具有受精能力，需对其进行_________处理；卵子的成熟在过程______（填图中序号）中完成。胚胎发育过程中胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做__________。

③ 为了提高已有胚胎的利用率，可采取_________技术。④～⑤过程需要用到________技术，在畜牧生产中采用这种技术的优势是_______________。

下图表示科学家采用不同方法培育良种牛的过程, a~h为操作过程,请据图回答有关问题:

(1)“试管牛”技术的操作流程是 (填字母)。

(2)d操作的名称是________,受体子宫内胚胎发育的过程中,细胞不断分裂,其分裂方式为________ 。

(3)图中所示的过程中用到的激素是________,其目的是获得更多的卵母细胞,经受精后可得到早期胚胎;图中早期胚胎属于胚胎发育的________阶段,其中胚胎干细胞来源于________(填数字标号)。

(4)过程h常用的方法是________。

（1）免疫排斥主要是有______细胞引起的，临床上通常使用免疫抑制剂来抑制该细胞的增殖，从而提高器官移植的成功率。

（2）从新生儿脐带血分离出部分细胞保存，需要器官移植的时候进行自体移植，在这些细胞培养液中需加入___________因子，才能培育出需要的器官。但是这些细胞不同于ES细胞，因为ES细胞来源于早期胚胎或____    ____细胞，功能上具有发育的全能性。

（3）利用核移植技术获得器官：哺乳动物核移植分为__   ______核移植和体细胞核移植两种类型。