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            • 1.

              人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如下图所示。回答下列问题:

              (1)如上图所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_______________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是____________________________________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)SRY~PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有______________;其中,dNTP的作用是___________________,引物应选用下图中的_________(填图中标号)。

              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞________(选填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

              (4)从细胞水平鉴定早期胚胎性别的方法是_______________。

            • 2. 回答下列(一)、(二)小题:

                  (一)要获得遗传特性单一的大肠杆菌菌种,一般必须对原有的大肠杆菌菌种进行扩大培养、并利用纯化技术得到单菌落的菌种。请回答下列有关大肠杆菌的培养和分离实验的相关问题:

                  (1)对买回来的大肠杆菌菌种进行扩大培养,一般用LB培养基,在培养基中为微生物提供碳源、氮源和能源的物质主要是__________,为调节渗透压,要加入一定量的___________。为进行大肠杆菌的分离,还要加入琼脂配制成固体培养基,并进行倒平板的操作。

                  (2)获得纯净微生物培养物的关键是_____________________,为此,必须对培养器皿、接种用具和培养基进行严格灭菌。培养器皿和培养基一般采用_____________________法灭菌,接种环采用灼烧法灭菌。同时在接种或倒平板操作时,除了在超净台上进行操作并对实验者的衣着、手和实验空间进行严格清洁和消毒外,还必须_________________________,以防止空气中的杂菌污染。

                  (3)大肠杆菌菌种的扩大培养一般采用液体培养基,接种后将培养基置于37℃摇床振荡条件下培养12小时。菌种的分离时一般在固体培养基上采用____________法,并将培养皿_______________状态。

                  (二)科学家将蜘蛛的蛛丝基因导入山羊体内,创造出转基因山羊,使羊奶中含有一种独特的蛛丝蛋白。生产原理如下图。请回答:

                  (1)将蛛丝蛋白基因和质粒通过甲过程形成的X物质为_____________。如果选取的受体细胞为体细胞,当在培养过程中出现接触抑制现象时,需要进行____________培养。要使重组细胞具有发育的全能性,乙过程需要的技术操作是____________。

                  (2)下列关于丙过程的叙述,正确的是______。

                  A.该过程为动物细胞培养,目的是获得更多的重组细胞

                  B.该过程所用培养液的成分往往是相同的

                  C.该过程在无菌条件下进行,需要提供CO2来调节pH

                  D.通过现代生物技术可以将重组细胞在体外培养成山羊个体

                  (3)为了快速繁殖转基因山羊,还可在丁过程前对早期胚胎进行____________,经培养后再分别移植到____________________的代孕母羊的相应部位。

            • 3.

              有关现代生物科技技术,请回答下列问题。

              (1)动物体内,精细胞经变形后,高尔基体发育形成精子的顶体,顶体内含有的__________能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带。经过______的精子才能与达到 ________期的卵子受精。受精时,先后有__________和 ___________两道屏障防止多精入卵。若在卵黄膜和透明带之间看到_____________,这是判断卵子是否受精的重要标准。_______________ 

              (2)试管动物的培育主要包括________、早期胚胎培养和胚胎移植三个环节。胚胎移植时,为了给移入的外来胚胎提供相同的生理环境,需要对供、受体母牛进行_______处理。

              (3)为了提高胚胎利用率,可以采用____________方法对早期胚胎进行切割,切割时,通常选择发育良好、形态正常的____________胚,特别注意将________均等分割,否则会影响分割后的胚胎恢复和进一步发育,选择______________细胞进行性别鉴定。

              (4) 通常胚胎干细胞可以从_____________________________________(写出两种方法)中分离得到。

            • 4.

              某课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题,引进了具高产奶基因但对本地适应性差的 纯种公牛。

              (1)拟进行如下杂交。

              ♂A(具高产奶基因的纯种)╳♀B(具适宜本地生长基因的纯种)→C

              若C中的母牛表现为适宜本地生长,但产奶量并不提高,说明高产奶是______性状。为获得产奶量高且适宜本地生长的母牛,根据现有类型,最佳杂交组合是________,后代中出现这种母牛的概率是______(假设两对基因分别位于不同对常染色体上)。

              (2)用以上最佳组合,按以下流程可加速获得优良个体。

               

              ①  动物细胞培养是动物细胞工程最基础的技术。在此技术中单细胞的获取通常需要用________进行处理,动物细胞在培养过程中培养箱所需的气体环境为___________。在培养过程中,应定期更换培养液,其目的是__________。

              ② 精子要具有受精能力,需对其进行_________处理;卵子的成熟在过程______(填图中序号)中完成。胚胎发育过程中胚胎从透明带中伸展出来的过程叫做__________。

              ③ 为了提高已有胚胎的利用率,可采取_________技术。④~⑤过程需要用到________技术,在畜牧生产中采用这种技术的优势是_______________。

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