科学家研究发现绒山羊的羊绒质量与毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIFⅡ)基因密切相关,获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图1所示。图2表示KIFⅡ基因与pZHZ1质粒构建重组质粒的过程,A、B、C、D为四种识别切割序列完全不同的限制酶的酶切位点。已知质粒pZHZ1的长度为3.7 kb(1 kb=1 000对碱基),其中A~
B区域长度为0.8 kb,B~C区域长度为0.2 kb,C~D区域长度为0.5 kb。请回答下列问题:
图1 图2
图3
(1)图1中构建的重组表达载体,目的基因的上游应有____,它是_____酶识别和结合的部位,驱动基因的转录。
(2)在图1过程③中,用_________激素处理以获取更多的卵(母)细胞,这些卵(母)细胞需在体外培养到________,方可进行过程④的操作。
(3)图1中过程④采用的生物技术是________,得到的重组细胞发育为早期胚胎后,可通过_________技术获得较多胚胎。
(4)现分别用限制酶A、D切割图2中重组质粒pZHZ2样品,结果被酶A切割成1.7 kb和3.4 kb两个片段,被酶D切割成1.9 kb和3.2 kb两个片段。据此判断KIFⅡ基因大小为____,并请将目的基因内部的酶D切割位点用相应的字母(D)标注在图3中。