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            • 1． 根据下列有关生物工程技术应用的方案，请分析作答：
              方案Ⅰ抗虫基因
              导入
              棉花受体细胞→抗虫棉
              方案ⅡprG基因
              导入
              免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体
              方案Ⅲ抗血栓基因
              导入
              山羊受精卵→早期胚胎
              移植
              受体母羊→抗血栓山羊
              方案Ⅳ玉米沼气池→生活能源
              （1）方案I中，农杆菌转化法是将目的基因导人植物细胞最常用的方法，其中的Ti质粒上的T-DNA是指    ．从分子水平验测来说，抗虫棉培育已经获得成功的含义是    ．
              （2）方案Ⅱ中，通过基因工程导入该prG基因来制备单克隆抗体体外培养的细胞具有    的特点，单克隆抗体最主要的优点是    ．
              （3）方案 III中，将目的基因导入受精卵的常用方法是    ，若要同时获得多头与此优质山羊相同的山羊，可对囊胚进行    ，操作过程需要特别注意的问题是    ．
              （4）方案Ⅳ中，主要应用的生态工程原理是    ．
              难度：中等
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            • 2． 如今，很多现代生物科学技术应用于我们的生活中，请回答下列有关问题：
              （1）采用细胞工程育种的方法如下：

              甲、乙原生质体经诱导融合完成的标志是    ．人工诱导原生质体融合的化学方法一般用    作为诱导剂．
              （2）屠呦呦研制的抗疟药青蒿素挽救了数百万人的生命．科学家在培育能产生青蒿素的酵母细胞过程中，构建的基因表达载体应该含有    酶识别和结合的部位，以驱动目的基因的转录，该部位称为    ．
              （3）体外受精是对体内受精的模拟操作，首先对实验动物用    激素处理，使其排出更多的卵子，待精子获能后，可以在    或者专用受精溶液中完成受精．
              （4）我国西北一些地区年降雨量少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林称为残败的“灰色长城”．其失败的原因主要是违背了生态工程的    基本原理．
              （5）如今，人们对转基因生物的安全性提出了质疑，主要体现在生物安全、    和食物安全等方面．
              难度：中等
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            • 3． 基因疫苗是指将编码外源性抗原的基因导入人和动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答．某科研所计划采用基因工程和胚胎工程技术培育具有口蹄疫免疫特性的高产奶牛．请回答下列问题：
              （1）基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括启动子、    、    、    ．启动子位于基因的    ，有了它才可以驱动基因转录．
              （2）制备基因疫苗的基因可以从基因文库中获取，基因文库实际上是含有某种生物不同基因的许多DNA片段的    群体．
              （3）检测高产奶牛体内是否出现口蹄疫病毒的抗原蛋白，在分子水平上的检测方法是    ．
              （4）胚胎工程最后一道工序的实质是    ．
              （5）为提高胚胎的利用率，可以采用胚胎分割技术，应该选用    的桑椹胚或囊胚进行分割．
              难度：中等
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            • 4． HIV属于逆转录病毒，人体感染后会患艾滋病，请回答：
              （1）用基因工程方法制备HIV的某蛋白时，可先提取HIV中的    ，以其作为模板，在有关酶的作用下合成目的基因．在基因工程的基本操作程序中，其中核心步骤是    ．检测基因是否插入到受体基因组DNA中的具体方法是    ．
              （2）若使用奶牛的受精卵作为受体细胞，将目的基因导入受体细胞的最有效的方法是    ．在使用培养基对受体细胞进行培养时，通常需加入    等天然成分，除了保证被培养细胞处于无菌、无毒以及充足氧气的环境中，还需保证细胞生活所需的    ．
              （3）若想一次获得大量基因型相同的转基因奶牛，可对早期胚胎进行胚胎分割，操作时需注意    ．
              （4）人的免疫系统对癌细胞具有    功能，艾滋病患者由于免疫功能的缺陷，易发生恶性肿瘤．
              难度：中等
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            • 5． 治疗性克隆是将患者健康体细胞的细胞核，移植到受体卵母细胞中构建成重组细胞，体外培养一段时间后，分离出胚胎干细胞，经定向分化形成特定的组织器官，用于治疗．
              （1）应选处于    期的卵母细胞作为受体．且对受体细胞作去核处理，目的是    ．
              （2）体外培养时，首先应保证重组细胞处于    的环境，当重组细胞达到    期时，可从其内细胞团中分离胚胎干细胞．
              （3）若克隆过程需进行基因改造，核心步骤是构建    ，将其导入动物细胞的最有效方法是    ．
              （4）胚胎干细胞在功能上具有发育的    ，在体外经定向诱导分化，培育出人造组织器官，解决目前临床上供体器官不足和器官移植后    的问题．
              难度：中等
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            • 6． Kanuma是治疗溶酶体酸性脂肪酶缺乏症一种蛋白类药物．将修饰过的Kanuma基因导入奶牛受精卵中，并在奶牛乳腺中表达．请回答：
              （1）构建Kanuma基因的表达载体时，需使用的工具酶是    和    ．在基因表达载体中，除含有目的基因，标记基因和复制原点外，通常还有    ．
              （2）为获得更多的受精卵，需用    对雌性奶牛进行处理以获得更多卵子，并在受精前对精子进行    处理．受精时防止多精入卵的两道屏障分别是    和    ．
              （3）从胚胎的    或原始性腺中分离出来的细胞称为ES细胞．
              （4）为检测基因是否导入奶牛的受精卵中，可采用的方法是    ．
              难度：中等
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            • 7． （1）精细胞经变形后，    发育形成精子的顶体，顶体内含有的顶体酶能协助精子穿过卵母细胞的放射冠和透明带．
              （2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于初级卵母细胞阶段，当该细胞发育至    期时，才具备受精能力．判断卵子是否受精的标志是    ．
              （3）为了防止多精入卵，卵子会出现两道屏障，分别是    和    ．
              难度：中等
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            • 8． 回答下列问题：
              （1）iPS细胞是利用逆转录病毒将Oct3/4、Sox2、Klf4和c-Myc 等四个基因转入分化的体细胞中诱导其成为类似胚胎干细胞的一种细胞．将四个目的基因导入体细胞之前，通过    技术进行迅速扩增，然后再与逆转录病毒结合导入体细胞，逆转录病毒所起的作用是    ．
              （2）体外受精是对体内受精的模拟操作，首先对实验动物用    处理，使其排出更多的卵子，待精子获能后，可以在    或者专用受精溶液中完成受精．
              （3）精卵体外受精后，应将受精卵移入发育培养液培养．它的成分比较复杂，除了一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸、    等物质．
              （4）对于“试管动物”的正确理解是    ．
              A．属于无性生殖       B．属于有性生殖           C．体外受精
              D．体内受精           E．体外发育                 F．体内发育
              G．运用基因工程技术   H．运用细胞工程技术
              （5）我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达培育出了抗虫棉．转基因作物的种植使害虫得到有效控制，减少了农药的使用量，保护了生态环境．与此同时，人们对转基因生物的安全性提出了质疑，主要体现在生物安全、    和    等方面．
              （6）桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成无废弃物农业，这主要遵循了生态工程的    原理．同时，通过饲养家禽、家畜、栽培食用菌，提高农民经济收入，是保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的    原理．我国西北一些地区年降雨量少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林称为残败的“灰色长城”．其失败的原因主要是违背了    原理．
              难度：中等
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            • 9． 课题组为解决本地奶牛产奶量低的问题，引进了具高产奶基因但易感染某种病毒的一头纯种公牛，拟进行如下杂交试验，请回答下列问题：
              （1）试验一：让该头具高产奶基因的纯种公牛与多头具抗病毒基因的纯种本地母牛杂交，得到F1．F1中的母牛表现为抗病毒能力强，但产奶量并不提高，说明高产奶是    性状．
              （2）试验二：为获得产奶量高且抗病毒能力强的母牛，根据现有类型，最佳杂交组合是    ，F2中出现这种母牛的概率是    （假设两对基因分别位于不同对常染色体上）．
              （3）F2中母牛的优良性状与    过程中的基因重组有关．
              （4）若两对基因位于一对常染色体上，重复上述实验，也可能获得产奶量高且抗病毒能力强的母牛，原理是♀F1减数分裂产生卵细胞过程中，同源染色体的    ，导致基因重组．
              难度：中等
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            • 10． 阅读如下材料：
              材料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵内，得到了体型巨大的“超级小鼠”：科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草．
              材料乙：T4溶菌酶在温度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了T4溶菌酶的耐热性．
              材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎可在不同个体的体内发育．
              回答下列问题：
              （1）材料甲属于基因工程的范畴．将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用    法．在培育转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是感染植物，将    转移到受体细胞中．
              （2）材料乙属于    工程范畴．该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对    进行改造，或制造一种    的技术．在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的    序列发生了改变．
              （3）材料丙属于胚胎工程的范畴．胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到    种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术．在材料丙的实例中，兔甲称为    体．
              难度：中等
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