下图为生产干扰素转基因牛的培育过程示意图，据图回答：

（1）过程①属于基因工程基本操作程序中的第二步基因表达载体的构建，是基因工程的核心。那么这一基因表达载体的组成有目的基因、____________、_________、_____________、复制原点。在这一步骤中把目的基因和质粒结合起来，需要用到的工具是_____________，其作用的部位是____________。

（2）科学家在实际操作中，往往用双酶切目的基因后插入到该双酶切割开的Ti质粒以构成基因表达载体，用两种酶切的目的是_________________。

（3）过程②，采用最多也最有效的方法是_________________。

（4）图中所说的早期胚胎一般指_________________。

【生物－选修3现代生物科技专题】

胚胎工程在生物技术中发展较快，请回答下列问题：

（1）胚胎工程是指对动物早期胚胎或           所进行的多种显微操作和处理技术。

（2）在“试管牛”的培育过程中，要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理。另外，培养的卵母细胞需要发育至         。

（3）判断卵子是否受精的重要标志是                                   。

（4）精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入                 继续培养。

（5）在胚胎移植的流程中，首先要对供体、受体进行选择，并用激素进行     处理。

（6）冲卵能成功进行的生理学基础是                                   。

（7）进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的            进行操作。

（8）要维持ES细胞不分化的状态，可以将ES细胞放在                 细胞上培养。

在生产中,基因工程可以和胚胎工程相结合,可生产出人类需要的产品,如下图所示。

(1)在表达载体的建构过程中,有两种连接酶,其中T4DNA连接酶可“缝合”　　　　末端,并催化形成　　　　键。 

(2)将目的基因导入动物细胞,最常用①　　　　法,其受体细胞通常为          。 

(3)若要同时获得多头产抗凝血酶Ⅲ蛋白的相同奶牛,可进行胚胎分割。应选择发育到　　　　　　　　　时期的胚胎进行操作,进行分割时,应注意将　　　　　　　分割,通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同的　                                 。 

（图甲）

（图乙）

（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射      。冲卵实质上是用特定装置，将供体母牛子宫内的      冲洗出来。

（2）图乙中②指的是      。进行胚胎分割时，应选择发育到      时期的胚进行操作

（3）图甲中标号3为      ，它将来可发育为       。

（4）图乙中A细胞是      ，在进行体外受精前要对精子进行      处理。哺乳动物受精过程有哪些机制阻止多精子入卵受精？（      ）

A．顶体反应　

B．精子穿越卵子透明带触及卵黄膜，导致透明带反应

C．精子触发卵黄膜表面微绒毛的抱合反应　  

D．精子入卵后，触发卵黄膜封闭作用

（5）在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意      。

（6）受体母牛必须和供体牛属于      。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是      。

(1)“试管牛”技术的操作流程是________(用箭头和字母表示)。

(2)写出图中数字标号代表的结构名称：①________；②________；③________。

(3)d操作的名称是________，受体子宫内胚胎发育的过程中细胞不断分裂，其分裂方式为________。

(4)图中用到的激素是________，过程h常用的方法是________。

(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意__________________________________________________________________

________________________________________________________________。

(6) 受体母牛必须和供体牛属于________。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________________________________________________________________。

​

请据图回答下列问题：

（1）在培育转人生长激素基因牛过程中，①过程需要的工具酶是                  ，②过程常用的方法是                。

（2）转人生长激素基因牛可通过分泌的乳汁来生产人生长激素，在基因表达载体中，人生长激素基因的首端必须含有_________________。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用  _____      ___和____技术，培育出多头相同的转基因犊牛。

（1）种畜场购买高产奶牛冷冻胚胎，通过           技术，从一枚胚胎可获得2-4头高产奶牛。

（2）技术人员运用胚胎细胞核移植与胚胎移植等技术手段，从一枚胚胎可获得更多的高产奶牛。用于核移植的卵母细胞要在体外培养到      期，将高产奶牛的          注入去核的卵母细胞后，还要用物理或化学方法激活        细胞，使其完成细胞分裂和发育进程。

（3）所获得的重组胚胎，可用         方法移植到同种的、           相同的受体母牛体内，使之继续发育为新高产奶牛个体。

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(1) 克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是__________。两种动物繁殖的方式相比，实质性的区别为前者是_____________，后者是_____________。

(2) —般用_____________激素对供体母牛做超数排卵处理。

(3) 为了提高胚胎的利用率，可以采用______________技术处理早期胚胎，如果选择囊胚阶段的早期胚胎，在分割时需要注意_____________________。

(4)如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用____________技术将药用蛋白基因导入到受精卵中，并采用__________________技术检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因。

（1）从人体组织中提取EPO的mRNA，通过逆转录得到         ，再通过PCR技术获得大量EPO基因。

（2）供体母鼠通常情况下每次排卵8～12枚，为使其超数排卵，需注射         激素以排出更多的卵子，培养到            时期与获能的精子相遇时，精子首先发生                          

反应，穿越放射冠和透明带，完成体外受精。

（3）①过程构成了基因表达载体，内部包括不可缺少的组成部分，其中           能驱动基因的转录。

（4）采用显微注射技术，将重组表达载体导入小鼠受精卵中，将受精卵移入        培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外，还需添加         、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清（血浆）等物质。

（5）当胚胎发育至桑椹胚或囊胚时期，向        移植，为获得更多个转基因胚胎，要将内细胞团进行均等切割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行            。

（6）若想检验转基因仓鼠是否成功表达EPO，可以采用           技术对血液来进行检测。

（1）基因工程操作的关键步骤是__________________；如果是将目的基因导入植物细胞，采用最多的方法是________________，其次还有________________和花粉管通道法等。

（2）如果是将目的基因导入动物细胞，最常用的方法是________________。此方法的受体细胞多是________________。

（3）重组DNA导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是             。

（4）胚胎移植时，通常将早期胚胎移植到同种且_________与供体相同的动物体内，受体对外来胚胎基本上不发生_________。若需要一次产生两头转基因“蜘蛛羊”，可将        _________阶段的胚胎进行分割，具体操作时要保证_____________。