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            • 1.
              科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为 ______ ,培养的细胞在贴壁成长至充链满培养皿底时停止分裂,这种现象称为 ______
              (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为 ______ ,也可从灰鼠体内取出卵子,通过 ______ 后进行早期胚胎培养获得.
              (3)图中重组囊胚通过 ______ 技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用 ______ 方法保存.
              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的 ______ 分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向 ______ 后用于疾病的细胞治疗.
            • 2. 如图是利用奶牛乳汁生产人血清白蛋白的图解,根据下图回答:

              (1)在形成图中③的过程中,我们称②为 ______ ,获取②的途径主要有 ______ .
              (2)人血清白蛋白的生产说明该工程突破了自然界物种之间的 ______ ,在基因表达载体中,人的血清白蛋白基因前端必须要有 ______ .
              (3)对①处理后的分散细胞进行培养,通常要在培养液中添加一定量的 ______ ,此外应定期 ______ ,以便保证被培养的细胞处于 ______ 的环境中.
            • 3.

              请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题:

              (1)某动物排卵时,减数第一次分裂尚未完成,此时卵子处于___________卵母细胞阶段,当该细胞发育至 ______________________________期时,才具备受精能力.当_____________________________                                  ,说明受精作用已经完成。

              (2)动物的早期胚胎移植到同种且 _______________与供体相同的动物体内,使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎,常用_______________激素对供体进行处理,其目的是获得更多的卵母细胞 ,经人工受精后可得到早期胚胎。

              (3) 用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是活细胞膜___________________________________________ 。

              (4)若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体,可对发育到桑椹期或囊胚期阶段的早期胚胎进行____________ 处理,再植入到受体内,若要对早期胚胎进行长期保存,应将其置于   冷冻条件下。

            • 4. 请回答胚胎工程和基因工程方面的问题:
              (1)应用胚胎工程技术可以培育出“试管牛”.试管牛的培育需经过体外受精、 ______ 、 ______ 以及在母体中发育和产出等过程。
              (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理,使其 ______ 。另外,培养的卵母细胞需要发育至减数第二次分裂的中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和 ______ 。
              (3)通常奶牛每次排出一枚卵母细胞,采用激素处理可使其一次排出多枚卵母细胞,常使用的激素是 ______ 。
              (4)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状.基因工程的四个基本操作步骤是 ______ 、基因表达载体的构建、 ______ 和 ______ .若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、 ______ 、 ______ 、 ______ 和复制原点等。
            • 5. EPO是促红细胞生成素(Erythropoietin)的英文简称,是一种激素样物质,可促进体内新红细胞生成。人类已可通过基因工程合成EPO基因,并采用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统来获取产物。其过程如下:

              请回答下列问题:

              (1)从人体组织中提取EPO的mRNA,通过逆转录得到________,再通过PCR技术获得大量EPO基因。

              (2)供体母鼠通常情况下每次排卵8~12枚,为使其超数排卵,需注射________激素以排出更多的卵子,培养到________期,与获能的精子相遇时,精子首先发生________反应,穿越放射冠和透明带,完成体外受精。

              (3)①过程构成了基因表达载体,内部包括不可缺少的组成部分,其中______能驱动基因的转录。

              (4)采用________技术,将重组表达载体导入小鼠受精卵中,将受精卵移入发育培养液中继续培养。培养液成分除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及________等物质。

              (5)当胚胎发育至________时期,向受体移植,为获得更多个转基因胚胎,要将________均等切割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。此外,移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。

              (6)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量,形成无废弃物农业,这主要遵循了生态工程________的原理。我国西北一些地区年降雨量较少,适宜种植灌木和草,却被硬性规定种植属于乔木的杨树,致使许多地方的杨树长成半死不活状,结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原因主要是违背了____________原理。

            • 6. 试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为 ______ 后,再经过 ______ 产生后代的过程.
            • 7.

              完成下列相关填空

              (一)某工厂为了生产耐高温植酸酶饲料添加剂,开展了产该酶菌株的筛选、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下图所示。



              (1)土壤悬液先经80℃处理15分钟,其目的是筛选出             

              (2)在无菌条件下,将经过处理的土壤悬液进行            ,然后涂布于含有植酸钠的固体培养基上。培养后观察到单菌落,其周围出现透明水解圈,圈的直径大小与           强弱相关。

              (3)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中         的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高                的利用率。

              (4)利用物理或化学方法将植酸酶固定在          的介质上称为固定化酶。实验过程涉及两次蒸馏水洗涤反应柱的操作,其中第一次洗涤的目的是除去             

              (二)下图为绵羊多莉克隆过程,请回答有关问题。


              (5)步骤1中若要获得较多数量的卵细胞,通常对母羊注射相关激素使其超数排卵。步骤2可通过降低           浓度,实现对乳腺细胞的营养限制性培养,可以得到大量的          期细胞,从而实现细胞分裂同步化。

              (6)步骤3中科研人员采用         技术进行细胞融合,步骤4通过胚胎体外培养获得胚胎,待发育至              胚胎时进行移植,通常移植至代孕母羊的          部位。

              (7)若要将目的基因导入乳腺细胞中,在扩增目的基因时,除利用PCR技术外,还可将目的基因所在的重组载体导入大肠杆菌中,利用大肠杆菌  ▲ 使其扩增。

              (8)为获得大量的上述克隆羊,可用胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为胚胎成纤维细胞可进行           培养,理论上可获得无限只克隆羊。

            • 8.

              控制哺乳动物的性别对于畜牧生产有着十分重要的意义。目前,分离精子技术是有效的性别控制方法。例如:牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右,利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来,再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛(如下图所示)。 根据以上信息回答下列相关问题:

              (1)图中过程①通常采用体外受精技术。在这个过程中获能的精子与卵母相遇时,首先快速分裂完成减数第二次分裂,当观察到卵细胞周围有_______时,标志着受精;防止多精入卵的生理反应有_______________________________________________。

              (2)胚胎移植时,受体应处于适合的生理状况,此时可利用激素对受体进行___处理;此外,受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生___反应,这为胚胎在受体内的存活提供了可能。

              (3)为了确保得到所需性别的试管牛,往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定,请举出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法(只需写出名称或简要原理):____________________________。

              (4)人们利用试管动物技术成功培育了转基因动物,在基因工程操作的基本程序中,基因工程的核心是______,科学家利用基因工程技术,使转基因动物本身变成“批量生产药物的工厂”。如建立的生产生长激素的乳房生物反应器,即:科学家将____________________等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌乳汁来生产所需要的药物。

            • 9. (8分)牛胚胎移植的基本程序如下图,请据图回答:

              (1)图中a、c过程分别是指                                

              (2)供体牛的主要职能是                                    ;受体母牛必须具备                                        

              (3)为了提高牛胚胎的利用率,常采取的方法是            ;处理的时期是               ,原因是                          

              (4)从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞,称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有                                                

            • 10.

              近期,中国和韩国的科学家利用某项技术去掉了猪体内的肌肉生长抑制基因,然后把这些“改造过的基因”植入猪的受精卵中,进而发育成肌肉细胞生长不受限制的“肌肉猪”。回答下列问题:

              (1)利用体外受精的方法获得猪的受精卵时,采集卵母细胞时,可用__________激素处理母猪,使其排出更多的卵子,然后从________中冲取卵子,与获能的精子在体外受精。

              (2)“改造过的基因”需与________等拼接成基因表达载体再导入受精卵中。

              (3)将具有“改造过的基因”的受精卵细胞培育成“肌肉猪”需利用_________________等胚胎工程技术。胚胎工程技术最后一道工序在生产实践中的最大意义是__________。

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