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          50条信息

            • 1.

              ES细胞(胚胎干细胞)在基础生物学、畜牧学和医学上有十分重要的应用价值。请回答下列问题:

              (1)ES细胞在体外培养时,可以增殖而不发生分化。在ES细胞培养液中加入分化诱导因子___________(只填一种即可)时,就可以诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化。

              (2)将人的ES细胞进行细胞培养时,要用__________酶分散细胞,制成细胞悬液,放入培养瓶中进行培养。使用合成培养基进行细胞培养时,通常需要加入_____________等天然成分。在细胞培养过程中,ES细胞主要通过_______________的方式进行细胞增殖。

              (3)将来源于两种不同哺乳动物的两个ES细胞进行细胞融合,常用的生物诱导因素是____________,经融合后所形成的细胞被称为__________。动物细胞融合技术的意义在于__________________。

            • 2.

              (1)ES细胞能分化出成体动物的所有组织和器官,这体现了ES细胞的_____________。为获得适合人体移植的猪器官,减弱或消除排斥反应,可对ES细胞进行___________。

              (2)—个ES细胞变成ES细胞群的过程中,细胞_________(填“可能”、“不可能”)出现接触抑制现象。下列关于动物细胞培养和核移植的叙述,正确的是__________。

              A.从原代培养物或细胞系中选择和纯化无法获得细胞株

              B.动物细胞培养基中添加胰岛素的目的是调节血糖浓度

              C.胚胎干细胞培养时,加滋养层是为了抑制胚胎干细胞分化

              D.核移植形成的重组细胞在初次分裂时核基因不转录

              (3)为获得含兔褐毛基因的转基因小鼠,可将褐毛基因通过_________法导入ES细胞核中,再将该核移植到去核的卵细胞中,经过_____________、胚胎培养、胚胎移植,最终由代孕母鼠产下克隆小鼠。

              (4)为获得大量的上述克隆小鼠,可用转基因的小鼠胚胎成纤维细胞进行体细胞克隆。因为含有褐毛基因的胚胎成纤维细胞可进行__________培养,理论上可获得无限个转基因小鼠。

            • 3.

              据《自然》杂志介绍,日本研究人员利用实验鼠的胚胎干细胞人工培育出了名为“视杯”的视网膜雏形结构。据悉,在一种特殊的培养介质中,来自实验鼠的胚胎干细胞能逐渐发育成感光细胞、神经细胞等,进而形成视网膜的雏形结构。研究人员现正在测试该“视杯”是否真能感受光线刺激,并将相关神经信号传递给实验鼠的大脑。

              (1)实验鼠的胚胎干细胞________(填“具有”或“不具有”)细胞周期,可取白________。

              (2)利用实验鼠的胚胎干细胞能培育出视网膜雏形,其根本原理是________。该过程是否实现了细胞的全能性?________。在体外诱导培养时,“特殊的培养介质”中除了加入________等天然成分,很可能还应添加有________,以诱导胚胎干细胞向视网膜雏形分化。

              (3)用ATP合成酶基因作为探针,如果能与胚胎干细胞诱导培养过程中某细胞内的mRNA杂交,能否说明该细胞已发生分化?________,理由是________。

              (4)假如研究人员在对“视杯”细胞中的某种酶进行提取时,向“视杯”细胞悬液中加入一定量的pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,获得了破碎的“视杯”细胞。与生理盐水相比,使用缓冲液的优点:________。

            • 4.

              科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为_________;培养的细胞在贴壁生长至充满培养皿底时停止分裂,这种现象称为_______。

              (2)图中2—细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为__________;也可从灰鼠体内取出卵子,通过_____________后进行早期胚胎培养获得。

              (3)图中重组囊胚通过____________技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用_________方法保存。

              (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的______________分离培养获得,iPS与ES细胞同样具有发育的_______性,有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗。

            • 5. 科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如下图1:

              (1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的______.
              (2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为______.
              (3)步骤③中,需要构建含有干扰素基因的______.构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取______作为引物.对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为______.
              (4)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发______色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用______的方法.
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