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            • 1.

              下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程;图2表示培育优质奶牛的过程。请据图回答下列问题:

              (1) 图1所示过程所用的生物技术有         

              (2) 将经免疫处理后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,获得能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选:一次是通过           培养基,筛选出杂交瘤细胞,另一次是通过            检测,筛选出能分泌抗X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。

              (3) 通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别抗原X,其原因是该抗体具有                   的特点。

              (4) 图2中的重组细胞         (填“①”或“②”)实现了基因的重组。

              (5) 图2中的早期胚胎发育到         阶段才可以移植,在移植之前,需要进行质量检查,用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时,发现活胚胎细胞不能被染色,其原因是                。

              (6) 为了获得多个基因型相同的优质奶牛,可采用的技术手段是         

            • 2.

              回答下列(一)、(二)小题:

              (一)天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。

              (1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度,这是因为酶         

              (2)在酒精发酵阶段,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高        的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。若在酒精发酵环节中温度过低,带来的弊端是           

              (3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如图2:

              ①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如图3。据图2、3分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是         ,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是        (至少答出两项)。

              ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中         (答出什么时期的什么层)的醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。

              ③成熟醋醅中乳酸菌的种类、数量均明显减少,主要原因可能是        

              (二)如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程,请据图回答下列问题。

              (1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比,特有的技术手段是       ,动物的这两种繁殖类型,实质性的区别在于后者仍是        

              (2)对供体母牛做超数排卵处理时,一般可采用         激素。

              (3)如果要培育能产生某种药用蛋白的转基因荷斯坦奶牛,可采用具体的          技术将目的基因导入到受精卵中,并采用“         ”杂交的方法检测受体细胞中的目的基因是否表达。

              (4)在转基因技术中,常需要对相关DNA的碱基序列进行测序。下图中甲、乙为DNA测序仪显示的图像,已知甲图显示的碱基顺序为TCGAAT,则乙图显示的碱基顺序为(   )

              A.TCGCAC        B.ACCGTG        C.ATTCAG        D.TCCGGA

            • 3.

              如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线.图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindⅢ、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点.据图回答:

              (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用________________(限制酶)同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含__________的培养基上进行。
              (2)过程②代表的生物技术是__________,此技术对供体母牛、代孕牛进行选择后,并用激素进行的处理是_____________。如对囊胚阶段的胚胎进行切割,应注意____________________,以免影响胚胎的恢复和进一步发育。
              (3)若转基因牛的乳汁中不含人乳铁蛋白,根据中心法则分析,其可能的原因是_______________________________。

            • 4.

              科学家将人的生长激素基因与质粒重组后,导入牛的受精卵,并成功从牛奶中提取到了人生长激素,操作流程如下图所示,请据图回答。(已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-,限制酶II的识别序列和切点是-↓GATC-)。

                     (1)获取目的基因的主要途径包括从已有物种细胞中提取和_____________。

                     (2)据图分析,在构建重组质粒的过程中,目的基因用________________(填“限制酶I”或“限制酶Ⅱ”)进行了切割。

                     (3)获能的精子和卵细胞相遇后首先发生____________反应,之后精子接触卵黄膜,并进一步与卵结合,在该过程中,_______________和____________________可以防止其它精子入卵。

                     (4)图中“受体”是__________________________;“符合要求的个体”是指_____________________________。

                     (5)将牛受精卵进行人工培养后,一般可选择__________________期的、发育良好的胚胎进行移植。

            • 5.

              豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:

              (1)该培养过程涉及多种现代生物工程技术,属于分子水平的是___________,其原理是______________________。

              (2)PCR过程中,除了要加DNA模板以外,还需加________ 和________,以及所需的酶是_________。温度降低到55℃的目的是__________。

              (3)PSP是______________识别和结合的部位,步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。

              (4)若要获得大量的卵母细胞需要对成年母猪采用___________法以获得大量的卵细胞。

              (5)进行早期胚胎培养时,通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________;另外,需定期更换培养液,目的是___________________。

              (6)步骤⑥中,通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。

              (7)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是____________________________。

            • 6.

              回答下题:

              (一) 酿酒、造醋是我国的传统技艺,为了探究与改进制造工艺,进行了相关研究。请回答有关问题:

              (1)目的菌株筛选后应该利用     培养基进行扩大培养,       是消除污染杂菌的通用方法。

               (2)制作葡萄酒过程中,为了酵母菌迅速发生作用,可加少量      混匀。将葡萄浆放入发酵瓶,装量不超过      (A.1/2 B.2/3 C.3/4 D.100%),当发酵瓶       表示发酵完毕。

               (3)醋的制作中发酵瓶中装锯末至       ,将适量的醋化醋杆菌培养物加在酒-水混合物中,混匀,并调PH至       后,倒入发酵瓶。

              (二)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KIF Ⅱ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF Ⅱ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。请回答相关问题:



              (1)过程①中构建重组表达载体所需要的酶是限制性核酸内切酶和      。(A.DNA聚合酶B.DNA连接酶C.逆转录酶D.解旋酶)

              (2)在过程②中,用       处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞,置于    中培养。

              (3)在过程③中,一般用     激素处理供体母牛,使其超数排卵;对供体母牛和代孕母牛进行           处理。

               (4)从重组细胞到早期胚胎过程中所用的胚胎工程技术是          。在胚胎移植前,通过                技术可获得较多胚胎。

            • 7. 埃博拉病毒(EBO)呈纤维状,EBO衣壳外有包膜,包膜上有5种蛋白棘突(VP系列蛋白和GP蛋白),其中GP蛋白最为关键,能被宿主细胞强烈识别.请回答下列问题:
              (1)基因疫苗指的是DNA疫苗,要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗,首先要提取出病原体的RNA,并将RNA __         ____,要大量获得表达特异抗原的基因,可采用PCR技术进行扩增.
              (2)以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全,其原因是GP蛋白自身没有感染能力,但保留有 ___         _.为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白,在基因导入牛受体细胞前,基因的首段必须含有使其仅能在牛的乳腺细胞中特异性表达的 ___      ___,才能驱动转录过程.这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为 _____     _   
              (3)为了提高胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术.进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的囊胚或 ______进行操作.在对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要注意       ____     .转基因牛是否培育成功,可以通过 __      ____技术从分子水平进行检测.
              (4)科研人员利用经EBO免疫后小鼠的 ___      ___与鼠的瘤细胞进行融合成杂交瘤细胞,培养后可以获得纯净的单一品种抗体,其特点是 _                        _____,可以用此抗体与药物制成“生物导弹”,抗击EBO.
            • 8.

              线粒体神经胃肠脑肌病由线粒体DNA(mtDNA)上的相关基因M控制。以下是采用“一父两母”技术以避免生出患病孩子的流程图。

              请回答:

                    (1)过程①采用的技术是          ,图中的X表示       期的卵母细胞。

                    (2)过程②培养过程中所需气体主要有 ______。

                    (3)过程③需提取早期胚胎细胞中的             ,通过PCR技术进行扩增,并以标记的            基因作为探针进行检测,筛选出合格的胚胎。

            • 9.

              控制哺乳动物的性别对于畜牧业生产有着十分重要的意义.目前,分离精子技术是有效的性别控制方法.例如:牛的X精子的DNA含量比Y精子的高出4%左右,利用这一差异人们借助特殊仪器将它们分离开来,再通过胚胎工程技术就可培育出所需性别的试管牛(如图所示).根据以上信息回答下列相关问题:

               

              (1)图中过程①是通常采用的              技术,在这个过程中刚刚获取的精子必须经过     处理才能与卵细胞结合形成受精卵,为获得更多的卵细胞需要给良种母牛注射适宜剂量的         

              (2)过程②中,受精卵培养发育至     时期,再经           到代孕母牛,从而获得后代.若希望同时获得多个性状相同的个体,可以使用           技术.

              (3)动物“生物反应器”是转基因动物技术中最诱人的部分之一,在利用该技术培育转入牛长激素基因奶牛过程中,常选用的受体细胞是                 ,导入目的基因常用的方法是              

            • 10. 下面为一系列生物技术操作示意图,请据图回答:

              (1)在基因工程中,a过程为________。如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,a过程使用的酶区别于其他酶的特点是_____________________。

              (2)在基因工程中,b过程为________,得到的细胞必须通过检测与鉴定,才能知道目的基因是否被导入,可采用的检测方法为________________。

              (3)为提高胚胎的利用率,可通过________(填字母)过程,此过程要选择发育良好、形态正常的________胚。

              (4)在植物细胞工程中,过程f、g分别为____________________。

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