[选考]I:某研究小组为了生产梨酿制醋酸，具体流程如图所示，请回答：

 （1）图中乙过程可加入    酶，为证明该酶的效果，可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的    ，预计后者出现的沉淀物比较少。

（2）适宜条件下进行酒精发酵，发酵完毕的标志是     ，待沉淀后，可用    （方法）将上清液（即果酒）取出。若培养液酒精浓度超过    时，酵母菌会死亡。

（3）若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染，欲获得用于醋酸发酵的醋杆菌菌种，常用方法是           。

II:某研究所为了加快优良种牛的繁殖速度，采用了以下方法，请据图回答：

（4）胚胎移植能提高优良性状动物繁殖率的原因之一是：对甲牛进行[a]    处理，一次受精能获得多个受精卵，    (“一”或“多”)头丙牛帮助完成丁牛胚胎发育过程，让甲牛和乙牛专门提供胚胎。

（5）若丁牛是乳汁中含有人干扰素的转基因牛，则上述过程要改变或增加一些环节，如需要将人干扰素基因作为目的基因与适当的载体结合，过程中需要使用两种工具酶分别是  和  ，结合成功并导入受体细胞；为了便于检测目的基因是否导入受体细胞，载体上要有  

（6）若丁牛是乳汁中含有人干扰素的转基因牛，下列叙述中，错误的是  

 A．丁牛的遗传物质只来自甲和乙牛  

 B．可选受精卵作重组DNA的受体细胞

 C．胚胎移植之前需要对胚胎进行检测和筛选

 D．需用含不同成分的培养液来培养不同时期的早期胚胎

（7）若采集丁牛的乳腺细胞，用  处理，可分散为单个的细胞悬浮液，把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫     。未经克隆化的细胞系具有异质性。

[生物—选修3：现代生物科技专题]

下图是转基因猕猴培育过程示意图，请据图回答：

（1）获取绿色荧光蛋白基因的方法包括________、利用PCR技术扩增目的基因和用化学方法直接人工合成等。基因工程的核心步骤是________（用图中数字表示），②过程常用的方法是________。

（2）PCR技术扩增目的基因的原理为________。扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，根据这一序列设计并合成________。

（3）图中过程⑦称为________，所用的早期胚胎通常是发育至________期的胚胎，受体雌猴对移入子宫的外来胚胎不会发生________反应，这为胚胎在受体雌猴内的存活提供了可能。

玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果糖等。流程如下：

                                               
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供_____   _ 。发酵过程中检测酵母菌数量可采用             法或稀释涂布平板法计数。

（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用__   _____法或____法从玉米胚芽中提取。

（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。

（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的__      _____催化。PCR技术一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______ 和 _______ 三步。

36【生物---选修3：生物科学技术】（15分）

应用基因工程和克隆技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳汁生产血清白蛋白，既提高了产量，又有了安全保障。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：

（1）上述过程涉及到的生物技术有                                   （至少答3个）。

（2）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞往往数量不足，请举出一种可以获得更多卵母细胞的方法：  　　　　　　                     。

（3）图中①一般经                （酶）处理可以得到③，在①→③的培养过程中，需向培养液中通入一定量的CO₂，其目的是                        　。

（4）在胚胎发育过程中，囊胚时期的　　          　　　细胞将发育成幼体的各种组织。

（5）③到⑥体现了                      。要实现⑥批量生产血清白蛋白，则要求①的性别是              。

附1：命题双向细目表

(1)步骤①核移植前为获得更多的卵母细胞，采用________处理使其超数排卵，从输卵管中冲出的卵子处于________时期，去除卵母细胞的________(结构)。

(2)培养细胞过程中，要置于CO₂培养箱中，其中CO₂的主要作用是________。

(3)图中ES细胞来自________时期的________细胞。步骤③中需要先利用PCR技术扩增正常基因片段，可以根据正常基因的________设计引物，PCR技术中使用的酶为________。为检测目的基因是否表达，采用的方法为________。

（1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的     　　　   。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到      　　 期时， 可从其内细胞团分离出ES细胞。

（3）步骤③中，需要构建含有Rag₂基因的表达载体。可以根据Rag₂基因的           设计引物，利用PCR技术扩增Rag₂基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有       　　　　　　　　　  酶的酶切位点。

（4）为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的   　　    ，用抗Rag₂蛋白的抗体进行杂交实验。

⑴对猪基因组进行改造，可以选择某种有调控作用的目的基因，重组后导入受体细胞，以达到抑制猪抗原决定基因             的目的。进行 DNA重组时需要使用的工具酶是                                               。

⑵选择猪胚胎干细胞作为受体细胞，胚胎干细胞是由              或            中分离出来的一类细胞。将目的基因导入后，利用标记基因的作用               含有目的基因的受体细胞。

⑶将含目的基因的胚胎干细胞注入猪的囊胚，而后将囊胚通过                          技术移入受体子宫，获得转基因猪。

⑷采用核移植技术克隆转基因猪时，应选用处于                期的卵母细胞作为受体细胞；随后从构建的重组胚胎中分离得到胚胎干细胞，经诱导分化形成多种器官，这是利用了胚胎干细胞的                                。

    （1）ES细胞来自于__________，ES细胞在功能上具有____________，当培养在__________上时，细胞只分裂不分化。

    （2）将绿色荧光蛋白基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成脂质体中，利用脂质体将融合基因表达载体转染到ES中，此过程中绿色荧光蛋白基因表达载体进入ES细胞的方式是为_______。在ES细胞的培养过程中，环境中必须保持一定浓度的CO₂，其目的是__________________。

    （3）为检验ES细胞的染色体上是否含有绿色荧光蛋白基因，在分子水平上可以采用________________方法检测；在细胞水平上，可用激光激发ES细胞并用荧光显微镜观察，可以确定，细胞内有______现象的ES细胞转染了绿色荧光蛋白基因。筛选出转染了绿色荧光蛋白基因的ES细胞，用显微注射法注入到囊胚内的_______部位，将来发育成具有荧光嵌合现象的小鼠。

    （4）图X代表的操作是_____________；甲在乙体内存活的生理学基础是_____________。

（1）图中过程③表示                   技术。

（2）重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物和水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸等必需的营养成分外，往往需要特别加入            ，同时在含5%的         的无菌、恒温培养箱中进行培养。

（3）胚胎干细胞一般是从                         中分离出来的一类细胞，在功能上具有                      。

（4）定向诱导使重组细胞B发生                     ，从而形成功能专一的胰岛样细胞。

(1)步骤①的技术名称是________。

(2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________中分离出ES细胞。

(3)将基因导入ES细胞常用的方法是________，将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞在功能上具有________。

(4)据图分析，在步骤③中构建含有干扰素基因的表达载体时可选用限制酶的组合为________。基因表达载体中除图示组成外还应包含________、终止子、复制原点等。

(5)将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发________色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用________的方法。

（1）来源：___________________。

（2）特点：①形态：体积__      _、细胞核__       _、___               __明显

         ②功能：具有发育的____         ___

         ③体外培养：可增殖而不______   ___