（一）[生物——选修1：生物技术实践]

为了调查饮用水的水质状况，某实验小组测定了饮用水样中的大肠杆菌含量，并进行细菌分离等丁作。回答下列问题：

（1）检测饮用水中大肠杆菌的含量需将水样进行________，再以涂布器分别涂布到固体培养基表面培养、计数，这种方法是________。

（2）实验小组人员培养大肠杆菌时，使用的允许大肠杆菌生长同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基称为________；实验小组人员为使实验结果更加准确，使用强烈的理化因素杀死用于培养微生物的器皿、接种用具等内外所有微生物（包括芽孢和孢子），该过程称为________。

（3）将1mL水样稀释100倍，在3个平板上分别加入0.1mL的稀释液；经适当培养后，3个平板的菌落数分别为62、64和66。据此可得出每升水样中的活菌数为________。通常运用该方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

（4）实验小组将得到的大肠杆菌接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现，振荡培养的大肠杆菌比静置培养的生长速度快，其可能原因是振荡培养能提高培养液中________的含量，同时可使大肠杆菌与培养液充分接触，提高________的利用率。

（二）[生物——选修3：现代生物科技专题]

下图是利用现代生物丁程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素）的过程设计图解。回答下列问题：

（1）图中①、②所示的结构分别是________、________。

（2）图中③、④所涉及的生物工程技术分别是________、________。

（3）过程③通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有营养物质丰富外，还因其________。

（4）过程④通常采用的方法是________。

（5）过程④的完成需要用到的基因操作工具有________。

（6）图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是________。

A[选修l：生物技术实践]

请回答下列问题：

(1)从土壤中筛选纤维素分解菌时，需要在培养基中加入的特殊染料是________。某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是___________________________________________________________。

(2)制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是___________。从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是______________。

(3)腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是______ __。豆腐发酵主要利用了微生物产生的_____________，通过发酵，豆腐中营养物质的种类增多，且更易于消化和吸收。

(4)有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，为了提高出油率，需将柑橘皮干燥去水，并用______浸泡，浸泡时间为10h以上，这样压榨时不会滑脱。

(5)某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用花药离体培养技术大量繁殖，则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。

B[选修3：现代生物科技专题]

图示方案为人们获得生物新品种的过程，请回答下列问题：

方案I、抗冻蛋白基因烟草细胞→抗冻烟草

方案Ⅱ、A基因全免疫过的B细胞→体外培养→单克隆抗体

方案III、人的生长激素基因牛的受精卵→早期胚胎受体母牛→转基因牛

(1)基因工程的核心步骤是_________。农杆菌上转化法中，根据农杆菌的特点，如果将抗冻蛋白基因插入到_________上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入到植物细胞中____________上。

(2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________，请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则_____________。   

(3)方案III中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定一般是取处于______时期的______细胞进行检测。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，使供体生产的后代数是自然繁殖的十几倍到几十倍。回答有关培育高产奶牛的胚胎移植的相关问题：

（1）胚胎移植时供体母牛要选用________和生产性能优秀的个体，用促性腺激素处理使其超数排卵，牛排出的卵子实际上是________（填“初级卵母细胞”“次级卵母细胞”或“卵细胞”）。

（2）若移植的胚胎来自体内受精，则受精的场所是________。如果要在移植前确定胚胎的性别，则在囊胚期取________细胞做________分析性别鉴定，这是因为该部位细胞与将来发育成新个体的________都来自于同一个受精卵，它们所含的________相同。

（3）在胚胎移植过程中需要对供体和受体母牛进行同期发情处理的原因是同期发情处理后________。的信息进行________后再将兴奋传给效应器，图中显示的效应器有________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

请回答下列有关基因工程和胚胎工程的问题：

（1）在基因工程中，获取目的基因的方法包括：①从基因文库中获取目的基因，②利用________扩增目的基因，③________。

（2）在基因表达载体中，启动子是________识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的受体细胞，最常用的原核生物是________。

（3）将目的基因导入微生物常用________处理受体细胞，使之变成感受态细胞。我国科学家发明的将目的基因导入植物细胞的方法是________。

（4）研究还发现胚胎干细胞可以诱导分化为造血干细胞，这体现了胚胎干细胞具有________。临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官，从而解决了________问题。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

研究发现，人体内的N基因是正常基因，无N基因的人会患严重肾病而早年夭折，科学家为治愈此病进行了相关探索。下图是对标记基因(绿色荧光蛋白基因，用GFP表示) 和N基因的酶切过程。请据图分析回答下列问题：

(1)切割基因时选用不同限制酶的目的是_______。切割完成后，需用DNA连接酶将两基因连接成GFP—N融合基因(以下称融合基因)，该融合基因的上游基因为______________。

(2)若用质粒做运载体，需用图中的______酶切割质粒。在构建的融合基因表达载体中，调控融合基因转录的结构为________。

(3)将融合基因表达载体包埋在由磷脂双分子层构成的脂质体内并转染ES细胞，融合基因表达载体进入ES细胞的方式为_______________。用激光激发ES细胞并用荧光显微镜观察，可确定细胞内有________现象的ES细胞转染了融合基因。

(4)ES细胞在功能上具有___________，当培养在________上时，细胞只分裂不分化。将整合了融合基因的ES细胞，在培养液中培养并加入相应的分化诱导因子后，ES细胞进行____________，最终形成正常的肾小球足突细胞，可用于该肾病的治疗。

下表是4组生物学实验培养基。请回答下列问题

（1）进行动物细胞培养应选用培养基      （填组别）。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或         消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为        ，这层细胞具有                    点胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有         性和           核型。

（2）分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有       酶的细菌菌落周围会出现               ，这是由于尿素被分解产生的         使PH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力          。该实验用的分离方法是             。

（3）用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入               。

（4）下表对应关系中，错误的是             

回答下列（一）、（二）小题：

(一）请回答与“固定化酶”实验有关的问题：

（1）—淀粉酶可以通过培养枯草杆菌来生产，         是筛选高表达量菌株的最简便方法之一。筛选出的菌株在发酵生产之前还需利用          培养基进行扩大培养。

(2)利用物理或化学的方法将—淀粉酶固定后，成为     且又有酶活性的制剂。若用吸附法固定时，在装柱后需要用     缓慢冲洗，直至流出液不使淀粉-碘混合液发生      为止。

(3)将淀粉溶液以一定流速从反应柱上端滴入，再在下端接取少量流出液进行KI-I₂颜色测试，结果不呈现红色。对此现象的解释错误的是        

  A.反应柱中没有—淀粉酶被固定      B.流速过快淀粉未被水解    

  C.接取的流出液是蒸馏水              D.流速过慢淀粉被水解成葡萄糖

(二）欲利用基因工程技术将人胰岛素基因转入到小鼠基因组中，以期利用小鼠生产出人胰岛素，请回答：

(1)若用逆转录的方法获得人胰岛素基因，则需要从人体相应的       细胞中提取mRNA，获得的人胰岛素基因经过相应处理后，再利用显微注射技术将其注入到受体细胞中，下列最不适合作为受体细胞的是        

 A.受精卵     B.胚胎干细胞     C.第一次卵裂形成的细胞    D.第三次卵裂形成的细胞

(2)为获得更多的受体细胞，可先对成年雌鼠注射激素进行         处理,将获得的卵母细胞培养成熟，与经        处理的精子结合形成受精卵后再进行后期操作。

(3)导入胰岛素基因的受体细胞还需借助        、        等技术才能成为转基因小鼠。

下表是4组生物学实验培养基。请回答下列问题

（1）进行动物细胞培养应选用培养基            （填组别）。在进行细胞培养时，首先，将动物体内的一部分组织取出，经过机械消化或            消化，使其分散成单个的细胞。如果是培养胚胎干细胞，则首先需要在培养皿底部制备一层胚胎成纤维细胞，称为           ，这层细胞具有             特点。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有                性和                 核型。

（2）分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基b。在含有              酶的细菌菌落周围会出现                 ，这是由于尿素被分解产生的                使PH升高，酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力               。该实验用的分离方法是                     。

（3）用培养基a进行植物组织培养，则培养基还需要加入                    。

A.A        B.B                  C.C               D.D 

[生物——选修3：现代生物科技专题]

α-抗胰蛋白酶是一种重要的药用蛋白，可在转基因母羊的乳汁中获得。流程如图：

（1）目的基因与表达载体用________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。

（2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其________。采集的精子需要经过________，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行________。利用________和胚胎移植技术可获得多个转基因个体。

（4）检测目的基因是否已转录出了mRNA，可采用________技术。若要检测羊乳汁中是否含α-抗胰蛋白酶，需用________法，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。