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            • 1. 普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。科学家将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄细胞,培育出了抗软化、保鲜时间长的转基因番茄。下图为操作流程图,据图回答问题

              (1)实验中的目的基因是________________________________。

              (2)构建基因表达载体时必需的工具酶有_______________________________________。

              (3)图中步骤①→②使用的生物技术是____________。这种技术可保留番茄植株抗软化、保鲜时间长的优良性状,其原因是____________________。

              (4)根据图中转基因番茄细胞中的信息传递过程,分析转基因番茄抗软化的原因。________________________________________________

              (5)若将得到的二倍体转基因番茄植株自交,F1中抗软化与不抗软化的植株数量比为3:1,则可推测目的基因整合到了_____________。
              A.一对同源染色体的一条上 B.一对同源染色体的两条上

              C.两条非同源染色体上 D.一对同源染色体的非姐妹染色体上

            • 2.

              在转B基因(B基因控制合成毒素蛋白B)抗虫棉商品化的同时,棉虫对毒素蛋白B产生抗性的研究也正成为热点。请分析回答问题。

              (1)棉虫对毒素蛋白B的抗性增强,是在转B基因抗虫棉的______作用下,棉虫种群中抗B基因的__________的结果。为减缓棉虫种群对毒素蛋白B抗性增强的速度,可以在抗虫棉田区间隔种植_________。 

              (2)豇豆胰蛋白酶抑制剂(由D基因控制合成)可抑制昆虫肠道内蛋白酶活性,使害虫减少进食而死亡。研究者将同时含B基因和D基因的___________导入棉花细胞中,获得转基因棉。与只转入B基因的转基因棉相比,棉虫种群对此转基因棉抗性增强的速度减缓,其原因是__

              _。 

              (3)棉花短纤维由基因A控制,研究者获得了多个基因型为AaBD的短纤维抗虫棉植株。其中B基因和D基因位于同一条染色体上,减数分裂时不发生交叉互换。

              ①植株Ⅰ相关基因位置如图1,该植株自交,F1中长纤维不抗虫植株的基因型为___,能够稳定遗传的长纤维抗虫植株的比例是___。 

              ②植株Ⅱ自交,F1性状分离比是短纤维抗虫∶长纤维不抗虫=3∶1,则植株Ⅱ中B基因和D基因位于_____染色体上(填图2中编号)。 

              ③植株Ⅲ自交,F1性状分离比是短纤维抗虫∶短纤维不抗虫∶长纤维抗虫=2∶1∶1,则植株Ⅲ产生的配子的基因型为_______。 

              (4)从防止抗虫基因污染,提高转基因植物安全性的角度分析,理论上可将抗虫基因转入棉花细胞的_____(选填选项前的符号)。 

              a.细胞核           b.叶绿体           c.线粒体               d.核糖体

            • 3.

              下列是利用生物技术制备抗体的两个途径模式简图。请据图回答下列问题:

              (1)过程①至②所获取的抗体1称为____________,其中过程①是指细胞工程中的____________技术。

              (2)④过程需要____________酶,⑤过程需要的工具酶为________________________________。

              (3)②处需要筛选,其培养基称为____________(填“选择培养基”或“鉴别培养基”)。结构甲的组成必须包括启动子________________________________及目的基因等(写两项)。

              (4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用____________菌,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过____________技术获得能产抗体的转基因棉花植株。

            • 4. 目前,精子载体法逐渐成为具有诱惑力的制备转基因动物方法之一,该方法以精子作为外源基因的载体,使精子携带外源基因进入卵细胞受精.如图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程.请据图回答:
              (1)精子载体法过程中外源基因能够整合到精子的 ______ 上是提高转化率的关键,因为受精时只有精子的 ______ 才能进入卵细胞中.
              (2)过程②采用的是 ______ 技术,该过程中应对已经导入外源基因的精子进行 ______ 处理.
              (3)利用转基因动物分泌的乳汁来生产药物的 ______ 反应器是科学家用药用蛋白基因与 ______  的启动子等调控组件重组在一起,然后导入哺乳动物的受精卵中,最终生长发育成转基因动物.
              (4)过程③需要在 ______ (至少写出两点)等条件下进行.由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚,因此在培养细胞时需在培养基中加入 ______ .
            • 5. 病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向,美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移.其具体思路如图所示:

              回答下列问题:
              (1)如果要在短时间内获得较多的目的基因,通常采用______技术,在操作步骤中包括两次升温和一次降温,其中降温的目的是______.
              (2)构建基因表达载体时需要用到的工具酶有______.
              (3)作为接受转移基因的体细胞应具有的特点是______(写出一点即可).在进行细胞培养时,当细胞贴满瓶壁时需用______酶处理,使之分散成单个细胞,培养液中还需通人无菌气体,其中通入CO2的目的主要是______.
              (4)如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞,但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质,应考虑位于目的基因首端的______和末端的______是否设计好,并从这方面进一步改善.
            • 6. 以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图.

              (1)在获取抗体之前,需要向健康人体注射特定抗原(如乙肝疫苗),图中细胞A在人体主要参与 ______ 免疫.
              (2)过程①的完成采用的主要方法是 ______ ,依据的生物学原理是 ______ .过程④需要 ______ 酶.
              (3)在基因表达载体中,氨苄青霉素抗性基因的作用是 ______ ,启动子的作用是 ______ .
              (4)如果想用棉花产生该种抗体,则⑥过程的受体细胞通常选用 ______ ,经过筛选后再侵染棉花体细胞,转化成功后通过 ______ 技术获得能产抗体的转基因棉花植株.
            • 7.

              科学工作者将抗虫毒蛋白基因通过载体转入棉花细胞,对抵抗棉铃虫有很好的作用。请回答与该抗虫棉培育有关的问题。

              (1)抗虫毒蛋白基因是从苏云金芽孢杆菌中获得的,获得该基因需要使用的酶,其作用的化学键是              

              (2)将含有抗虫毒蛋白基因的基因表达载体导入棉花体细胞中的常用方法是      ;要将已经成功接收基因表达载体的棉花体细胞培育成一个新的植株需要用到的生物技术是           

              (3)在研制抗虫棉的过程中,利用标记基因可以快速检测基因表达载体是否导入棉花细胞,然而,即使基因表达载体已经导入棉花细胞,也不能确定转基因过程已经取得成功。因此,在该项工程的最后阶段,需要做一系列检测。例如,用放射性同位素标记的      作探针,可以分别检测棉花细胞中是否有        ;向棉花细胞的匀浆中加入特定的         ,可以检测棉花细胞中是否能够产生抗虫毒蛋白。

              (4)如果目的基因比较小,而且序列已知,则可以通过    方法获取目的基因。

              (5)将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入__________中储存,可以构成基因文库。

            • 8. 普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人将地衣芽孢杆菌的a-淀粉酶基因转入酵母菌中,经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示).

              (1)图甲中,过程①需要的酶有 ______ .为达到筛选目的,平板内的固体培养基应以 ______ 作为唯一碳源.②、③过程需重复几次,目的是 ______ .
              (2)某同学尝试过程③的操作,其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示.该同学的接种方法是 ______ ;推测该同学接种时可能的操作失误是 ______ .
              (3)以淀粉为原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵,接种菌的发酵罐需要先排气,其原因是 ______ .
            • 9. 目前第二、三代病毒疫苗的研制是基于DNA重组技术而建立的.请分析回答下列问题:
              (1)第二代疫苗是以编码病毒抗原蛋白的RNA为模板,经 ______ 酶的作用获得目的基因,再利用 ______ 等工具酶构建基因表达载体.
              (2)要将重组质粒导入大肠杆菌,应先用 ______ 处理大肠杆菌,使大肠杆菌转变为 ______ 态;再将 ______ 在缓冲液中混合培养完成转化过程.
              (3)第三代疫苗即“DNA疫苗”是将编码某种抗原蛋白的DNA注射到动物体内,该DNA可在生物体内 ______ 出相应的抗原蛋白.
              (4)对于基因工程产品安全性的争论越来越激烈,目前转基因生物的安全性主要体现在食物安全方面、 ______ 和 ______ 三个方面.
            • 10. 下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中切割位点相同的酶不重复标注.请回答下列问题:

              (1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用______两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过______酶作用后获得重组质粒.为了扩增重组质粒,需将其转入处于______态的大肠杆菌.
              (2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加______平板上长出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中______.
              (3)若BamH  I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为______,对于该部位,这两种酶______(填“都能”、“都不能”或“只有一种能”)切开.
              (4)若用Sau3A I切图1质粒最多可能获得______种大小不同的DNA片段.
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