【生物一选修1：生物技术实践】

   我们人类生活在微生物的海洋中，我们应当正确看待微生物与人类的关系，微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友。人类应该了解微生物，让微生物与人类和平共处。

请回答下列问题：

（1）获得纯净的培养物的关键是          ，这是研究和应用微生物的前提。消毒和灭菌是两种非常重要的       技术，它们之间最主要的区别是能否杀灭微生物的              。

（2）某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL。实验过程如图所示：

​

①该培养基能筛选出目的菌的原因是                    。

②图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是             ，

其中             还常用来统计样品中活菌数目，统计结果一般用            来表示。除了上述的活菌计数法外，       也是测定微生物数量的常用方法。

[选考]I:某研究小组为了生产梨酿制醋酸，具体流程如图所示，请回答：

 （1）图中乙过程可加入    酶，为证明该酶的效果，可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的    ，预计后者出现的沉淀物比较少。

（2）适宜条件下进行酒精发酵，发酵完毕的标志是     ，待沉淀后，可用    （方法）将上清液（即果酒）取出。若培养液酒精浓度超过    时，酵母菌会死亡。

（3）若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染，欲获得用于醋酸发酵的醋杆菌菌种，常用方法是           。

II:某研究所为了加快优良种牛的繁殖速度，采用了以下方法，请据图回答：

（4）胚胎移植能提高优良性状动物繁殖率的原因之一是：对甲牛进行[a]    处理，一次受精能获得多个受精卵，    (“一”或“多”)头丙牛帮助完成丁牛胚胎发育过程，让甲牛和乙牛专门提供胚胎。

（5）若丁牛是乳汁中含有人干扰素的转基因牛，则上述过程要改变或增加一些环节，如需要将人干扰素基因作为目的基因与适当的载体结合，过程中需要使用两种工具酶分别是  和  ，结合成功并导入受体细胞；为了便于检测目的基因是否导入受体细胞，载体上要有  

（6）若丁牛是乳汁中含有人干扰素的转基因牛，下列叙述中，错误的是  

 A．丁牛的遗传物质只来自甲和乙牛  

 B．可选受精卵作重组DNA的受体细胞

 C．胚胎移植之前需要对胚胎进行检测和筛选

 D．需用含不同成分的培养液来培养不同时期的早期胚胎

（7）若采集丁牛的乳腺细胞，用  处理，可分散为单个的细胞悬浮液，把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫     。未经克隆化的细胞系具有异质性。

（1） 筛选微生物 L时，用            作为培养基中的唯一氮源，加入            凝固剂。接种时应采用           方法

（2） 下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是           灭菌

   A高压蒸汽     B 紫外灯照射      C 70%的酒精侵泡液      D过滤

（3）对微生物L进行扩大培养时宜采用            培养基，接种时采用           方法对接种环进行灭菌

（4）脲酶宜采用共价偶联法进行固定化，可通过检测固定化脲酶的           确定其应用价值。除此法外，酶的固定化方法还包括           及交联法等。

（二）下面是关于获得能产生人干扰素大肠杆菌的问题。请回答：

（5）用限制性核酸内切酶识别人干扰素基因和质粒中一段特定的          并切割，然后用           连接形成重组DNA。该质粒是一种含抗生素抗性基因的          核酸分子

 A.双链环状  B.单链环状  C.双链线状  D.单链线状

（6）将含有人干扰素基因的重组质粒导人到大肠杆菌，经含有           的培养基筛选等过程，最终获得能产生人干扰素的大肠杆菌。

(1)②过程所使用的接种方法是________。用该接种方法对微生物进行计数时，通常选用菌落数在________个的平板进行计数，统计的菌落数往往比活菌的实际数目________，原因是________。

(2)从用途上来说，1号培养基属于________培养基，制备该培养基的步骤是：计算→称量→溶化→________→倒平板。

(3)该实验中酶活性鉴定是鉴定________酶的活性，可以加入________指示剂，如果指示剂变为________色，说明该酶的检测为阳性。

废纸主要成分是木质纤维。左下图是工业上利用废纸生产乙醇的基本工作流程。回答下列问题。

（1）自然界中①环节需要的微生物大多分布在        的环境中。②中获得的酶是        酶。
（2）若从土壤中分离出上述微生物,应以        为唯一碳源的培养基进行培养,并加入        形成红色复合物进行筛选,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的        。
（3）接种后一个平板经培养后的菌落分布如右上图所示,推测接种时可能的操作失误是        。向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是        。
（4）生产中可以满足④环节的常见菌种是        。玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可为该微生物的生长提供        。从玉米胚芽中提取的胚芽油不易挥发,宜选用        法从玉米胚芽中提取。

Ⅰ.苯胺是一种致癌物质，土壤中有分解苯胺的异养型细菌，下表是筛选分解苯胺的异养型细菌的培养基配方。

(1)此培养基中的成分X除了为目的菌提供能源外，还能提供        和　　   　，该培养基从功能看属于　　　　　              。

(2)下图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图。则获得图A效果的接种方法是_____________________，图B效果的接种方法是____________________。

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Ⅱ.根据植物组织培养和生物有效成分 的提取的知识回答下列问题：

(1)菊花的组织培养常用的培养基是　　　           ，原理是　　　　　       　。

(2)从油菜籽中提取菜籽油最好采用　　　　 　法，工业上提取胡萝卜素一般采用萃取法，鉴定该色素的方法是　　　　   　法。

（一）下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）

（1）制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应     ；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是               。

（2）为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的__________         酶。

（3）若是从混杂的微生物中分离酵母菌，从功能上看，应使用________   培养基。从微生物培养的角度分析，樱桃果汁能够为酵母菌的生长提供水、无机盐和              。

（4）樱桃果酒制作是否成功，发酵后可在酸性条件下用________           溶液来鉴定。在酒精发酵旺盛时，醋酸菌________（能/否）将果汁中的糖发酵成醋酸，乳酸菌________ (能/否)将乳酸分解成CO₂和水。

（二）生物组织中存在多种有机物，不同的有机物提取和鉴定方法不相同。

（1）图甲所示装置可用于提取________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”）。

（2）若用萃取法提取胡萝卜素，对萃取剂的要求是      ，萃取的效率主要取决于萃取剂的       ，充分萃取后，对过滤得到的滤液通常采用蒸馏装置进行________，从而得到产品。

（3）如图为β­胡萝卜素的纸层析结果示意图，请据图回答问题：

在实验过程中，为了防止层析液挥发，应将滤纸放置在     中，并盖上玻璃盖。基线的AD两点是________，点样操作时应注意________，在图中的层析谱中，②代表的物质是________

(1)腐乳制作过程中，在多种微生物的作用下，普通豆腐变成风味独特的腐乳，其中起主要作用的是________。

(2)月季花的花粉在适宜的培养基上培养产生花粉植株的两种途径：一种是________：另一种是花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。这两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中的________。

(3)在培养微生物的过程中，微生物接种常用的方法是________：无菌技术主要通过________处理来避免杂菌污染。在纯化土壤中某目的菌时，发现培养基上的菌落连成一片。可能的原因是________。

(4)工业生产中，提取胡萝卜素的方法主要有三种，一是从________中提取，二是从大面积养殖的岩藻中获得，三是利用________生产。从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是________，用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、________、萃取、________、浓缩。胡萝卜素粗品的鉴定方法是________。