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            • 1. 某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种、培养及菌落观察与计数。请回答与此实验相关的问题。
              (1)培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了______和______。除此之外,培养基还必须含有的基本成分是______和______。
              (2)对培养基进行灭菌,应该采用的方法是______。
              (3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果,应将接种了湖水样品的平板置于______中培养,培养的温度设定在37℃.要使该实验所得结果可靠,还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验。
              (4)培养20小时后,观察到平板上有各种形态和颜色不同的菌落,这说明湖水样品中有______种细菌。一般说来,菌落总数越多,湖水遭受细菌污染的程度越______。
              (5)如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐______细菌,这种培养基被称为______。
            • 2. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
              (1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的C1酶和CX酶可将______分解成______。
              (2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成______色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______。
              (3)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
              酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液
              培养基甲 + + + + + + +
              培养基乙 + + + - + + +
              注:“+”表示有,“-”表示无。
              据表判断,哪种培养基不可以用于分离和鉴别纤维素分解菌:______(填“甲”或“乙”),原因是______。
            • 3.

              将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。回答下列问题:

              (1)M培养基若用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素一抑制__________的生长,加入了链霉素的培养基属于__________培养基。

              (2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有____________________(答出两点即可)。氮源进入细菌后,可参与合成的生物大分子有____________________(答出两点即可)。

              (3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物,加入的显色剂是__________,该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理___________________________________。

              (4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:

              甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133。

              乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。

              有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是:_______________________________________。

            • 4.

              工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞的细胞壁以提高出汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响,某学生设计了如下图所示的实验:


              ①将果胶酶与苹果泥分装于不同的试管,在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图A)。

              ②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合再次在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图B)。

              ③将步骤②处理后的混合物过滤,收集滤液,测量果汁量(如图C)。

              ④在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量,结果如下表:

              温度/℃

              10

              20

              30

              40

              50

              60

              70

              80

              果汁量/mL

              8

              13

              15

              25

              15

              12

              11

              10

              根据上述实验,请分析并回答下列问题:

              (1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中_________的水解。

              (2)实验步骤①的目的是_______________________________。

              (3)实验步骤中要有玻璃棒搅拌的操作,其目的是使__________,以减少实验误差。

              (4)实验结果表明,在上述8组实验中,当温度为________时果汁量最多,此时果胶酶的活性________。当温度再升高时,果汁量降低,说明________________。

              (5)能不能确定该温度就是果胶酶的最适温度?如果不能,请设计出进一步探究果胶酶的最适温度的实验方案:______________________________________。

            • 5. 幽门螺杆菌是栖息在胃黏膜的螺旋状短杆菌,具有很强的脲酶活性。如表是某实验小组培养幽门螺杆菌所用培养基的配方(培养细菌一般用牛肉膏蛋白胨培养基).请回答下列问题:
              成分 葡萄糖 KH2PO4 MgCl NaCl CaSO4 CaCO3 琼脂 蒸馏水
              含量 10g 0.2g 0.2g 0.2g 0.2g 5g 3.5g 1L
              (1)实验室筛选微生物通常须人为提供有利于目的菌生长的______、______、pH等条件,抑制或阻断其他微生物的生长,能达到此目的培养基称为______。
              (2)在选择培养幽门螺杆菌时,培养基中要加入尿素和酚红指示剂,这是因为幽门螺杆菌可以合成______,能分解尿素。若有幽门螺杆菌,则菌落周围会出现______ 色环带。
              (3)将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中,置于37℃下培养一段时间后,该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时少,主要原因是______。
              (4)某小组采用平板划线法分离该细菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是______。
            • 6.

              反刍动物如牛和山羊,具有特殊的器官一瘤胃,瘤胃中生活着多种微生物,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究,请回答:


              (1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是_____(多选)。

              A.酒精灯    B.培养皿    C.显微镜    D.无菌水    E.接种环

              (2)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是_______。

              (3)刚果红可与_______形成红色复合物,研究人员在刚果红培养基平板上,筛选到了几株有透明降解圈的菌落(见图1)。图中降解圈大小与纤维素酶的_________________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是____________(填图中序号)。

              (4)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株A和B,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见图2,推测菌株______更适合用于人工瘤胃发酵,理由是___________________。

            • 7.

              回答下列有关微生物培养的相关问题:

              Ⅰ.已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题:

              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发,可用____________(填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法")从菌体中提取。

              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以_______为碳源的______(物理状态)培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少,可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

              (3)若要测定微生物B的菌体数,可在显微镜下用____________直接计数,若要测定活菌数量,可选用____________法进行计数。

              Ⅱ.某医院有一个罕见的细菌感染患者,医生想通过抑菌实验,从常用的抗生素一青霉素(A),氨苄青霉素(B),庆大霉素(C),氯霉素(D),环丙沙星(E)中寻找对病人最有效的一种.部分实验步骤如下:

              第一步:按下方所列配方配置培养基:

              牛肉膏

              蛋白胨

              NaCl

              H2O

              5.0g

              10.0g

              5.0g

              1000mL

              第二步:取单菌落适当稀释,用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴,滴于3个平板培养基表面,然后分别用3个无菌涂布棒涂匀,37℃恒温箱中培养,使细菌长满平板表面。

              (4)上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

              (5)如图圆环表示一个培养皿平面,用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土,如下图所示。

              培养2d后,A滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对青霉素____________;B滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对氨苄青霉素____________;C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小,说明____________;D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是氯霉素的____________。

              (6)经测量透明圈大小,得到如下结果(单位mm):

              A

              B

              C

              D

              E

              7

              0

              3

              5

              10

              那么,你建议医生使用哪一种抗生素?____________.

            • 8.

              回答下列与酵母菌有关的问题:

              (1)培养酵母菌的培养基应采用________法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后会观察到菌落,菌落的含义是_______________。

              (2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进______(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”)。

              (3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是___________。

              (4)为筛选和纯化酵母菌,根据用途应选用 ____________培养基,常用的接种方法____________和____________.扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数,取0.2mL样品,用固体培养基对其培养,最后统计了三个平板,菌落数分别是200、180、220.则样品中微生物的数量为__________个/mL.该统计结果_____________(低于、高于)实际值。

            • 9. 生物技术在人类生产和生活中有广泛的应用。请回答下列问题。
              (1)制作泡菜过程中需用 ______法测定亚硝酸盐的含量。果酒敞口放置较久对变酸,这与醋酸菌有关而与乳酸菌无关的理由是______。
              (2)欲从土壤中筛选能分解脂肪的细菌,需要配制以脂肪为______的选择
              培养基;为检测配制的培养基灭菌是否彻底,应进行的操作是______。
              (3)从胡萝卜中提取胡萝卜素,干燥是应该控制好______,以防止胡萝卜素分解;萃取液在浓缩前需要进行______。
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