某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题：

（1）培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供_____   __   _，筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是_____   ___     。

（2）实验中“重复多次”的目的是_____   ___          ，为了达到分离纯化目的菌的目的，在固体培养基上接种的方法可以是_____   ________         ___。

（3）实验过程中振荡培养，“振荡”的目的是_____   ________   _______   _______

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉，目的是_______   _______。

（5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目，需要设计_______   _______培养基作为对照组，此对照组的目的是证明培养基是否被杂菌污染，如果被污染，则统计的“目的菌”菌落数可能比实际活菌数_   _______。

有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制是实验过程如图甲、乙所示。

（1）微生物生长繁殖所需要的主要营养物质有碳源、水、_____四类，该实验所用的选择培养只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_________。

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是______。划线的某个平板培养后，第一划线区域上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有                  （填二项）。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示的实验。该实验的假设是_________，该实验设计是否合理？为什么？

(1)酿酒所需的微生物是        ，产生的酒精可以与            (试剂)发生显色反应。

(2)在变酸的酒的表面观察到的菌膜是           在液面大量繁殖而形成的。若要对该菌进行初步分离纯化，比较便捷的操作是：采用            法(填“平板划线”或“稀释涂布平板”)把它们接种到          (填“固体”或“液体”)培养基上，经培养得到肉眼可见的           。

(3)实验室中常用                法对培养基及器皿进行灭菌。不同培养基的具体配方不同，但一般都含有水、            、           和无机盐。

下图表示微生物的接种实验中的一些步骤。请回答下列有关问题。

①把接种工具燃烧至变红②将接种工具在火焰旁边冷却③接种

（1）图中接种工具的名称是____________，制备培养微生物的培养时，灭菌与调pH的先后顺序是________。

（2）步骤②中，将接种工具冷却的原因是____________。

（3）步骤③中，将接种工具灼烧____________次

（4）苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。

①小明纯化菌种的接种方法为________，该方法不仅可以进行纯化，还可以进行____________

②采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为____________。

如果废水为100mg/L苯酚溶液，降解后约有25%的苯酚残留，则需将残留液稀释____________（填序号：①10②20③30）倍后，再进行比色。

有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：

(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。

(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________________和______________。接种时所用的接种环通过________灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，该分离纯化方法称________法。

(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。

(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、____________和____________________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有              。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为                。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为                    ，接种乙平板时的操作失误是                  。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                           。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                          。

已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：

(1)显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用__________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。

(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养，培养基灭菌采用的最适方法是____________   法。

(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用______________法进行计数。

(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10 g油脂所需酶量依次为4 mg、1 mg、6 mg，则上述三个温度中，______ ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________ ℃设计后续实验。

豆浆是深受中国百姓喜爱的饮品，但易变质，保质期较短。科研人员对变质豆浆中的腐败细菌进行分离，并研究了乳酸链球菌素对腐败细菌的抑制效果，为生产豆浆时，优化保质方法提供依据。主要研究过程如下：

①豆浆变质处理 将2种市售豆浆A、B和自制豆浆在无菌操作台上分别装入已灭菌的250mL三角瓶中，密封、37℃条件下，放置7d后，豆浆发生变质。

②腐败细菌的初步分离和计数 取变质的豆浆在无菌条件下接种到细菌培养基上，培养一段时间后，统计各培养基上菌落种类和数量。结果如下表：

③比较乳酸链球菌素添加量对腐败细菌的抑制效果 以自制的新鲜豆浆为材料，经相应处理后，在37℃下放置35d后，统计豆浆中腐败细菌数量，结果如图。

请回答下列问题：

（1）步骤①中三角瓶的常用灭菌方法是         ，步骤②中培养基的常用灭菌方法是                。

（2）步骤②中适宜采用的接种方法是              。区分菌落种类的依据是                  。统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止              。

（3）乳酸链球菌素是一种天然食品防腐剂，它是由34个氨基酸组成的多肽。步骤③结果表明，最能耐受乳酸链球菌素的细菌是         ；为有效防止豆浆腐败，在生产中乳酸链球菌素的添加量应控制在              左右。

（4）与用抗生素防腐相比，使用乳酸链球菌素防腐的优点是                。

2017年7月郑州市卫生计生委发布的第3期卫生监测信息显示有15家美容美发场所的毛巾、理发(美容)用具大肠杆菌严重超标。如图甲为大肠杆菌含量检测操作简图，图乙为伊红美蓝培养基配方。

回答下列相关问题：

(1)图甲中滤膜的孔径应________(“大于”或“小于”)大肠杆菌。受此启发，对某些不耐高温的试剂可以怎样除菌？____________________。

(2)配制图乙中的基础培养基时，除了水分、无机盐以外，还应加入________(一种营养成分)，以及____________。待各成分都溶化后和分装前，要进行的是____________，对培养基进行灭菌的常用器具是________________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是________________________________。伊红美蓝培养基上生长的大肠杆菌菌落呈现黑色，从功能上划分，该培养基属于________培养基。

(3)用平板划线法分离样液中的大肠杆菌，操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线的目的是_______________ _______。要检测样液中的大肠杆菌含量，取25 cm²毛巾样本，加5 mL蒸馏水，浸润半小时，然后在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL样液；在37 ℃的培养箱中放置48小时，3个平板上的黑色菌落数分别为49、48和47。据此可得出25 cm²毛巾样液中的活菌数为________。

下表是培养某微生物的培养基的配方，请回答下列问题：

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是____________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行________处理。

(2)在配制培养基时，除考虑营养条件外，还要考虑________、____________和渗透压等条件。

(3)在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养器皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)；操作者的双手需进行清洗和________；空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质________，还能损伤DNA的结构。

(4)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和________________。