有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示.

（2）纯化菌株时，通常使用的划线工具是___________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________________________________________。

（3）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_________________________，该实验设计是否合理？为什么？_________________________________________________________________。

(1)图甲是利用__________法进行微生物接种，图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是______和_________；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

(2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行？___________________。

(3)接种后，在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养？__________________。

葡萄种植基地为解决葡萄滞销易腐烂问题，引进果酒、果醋生产线进行葡萄的深加工，获得了较好效益，其菌种筛选和生产流程如图所示。其中在纯化菌种A时，共接种了甲、乙、丙、丁、戊五个平板，每个平板接种量均为O.lmL。纯化菌种B釆用的是划线接种。请回答下列问题：

（1）候选菌种A和B在细胞结构上的最大差别是菌种A有           。图中筛选菌种所用的培养基在灭菌时温度为           。

（2）纯化菌种A时，乙平板的菌落分布如上图所示，则纯化菌种A的接种方法为           ，接种乙平板时的操作失误是           。

（3）纯化菌种A的过程中，除乙平板外，其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落数分别是180、 200、420、190，则样品中菌种A的密度为       个/mL，此方法计数的结果常常低于实际值，原因是                。

（4）果醋发酵与果酒发酵相比，提供的不同条件有                      。

如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基，实验操作中的灭菌方法还有_________。

（2）该纯化醋酸菌的接种方法是______________；完成步骤④的操作，接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种；培养过程中，常选择菌落数在__________的平板统计计数。

（3）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素，该酶是一种复合酶，它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________染料，形成________色复合物，若产生__________，则证明有纤维素分解菌存在。

③统计原生质体数量，结果如下。

分析回答：

（1）步骤②中，加酶液的目的是_______________________，洗涤时选用渗透压稳定剂的理由是______________________________________。

（2）结果表明，制备红豆杉内生真菌原生质体的适宜条件是__________、________、_______。

（3）检验原生质体再生能力，需要配制再生固体培养基，培养基灭菌常采用___________ 法，灭菌后需要冷却到_______℃左右才能用来倒平板。

（4）实验中将收集到的原生质体浓度为30×10⁶个/mL培养液先稀释10⁴倍，再各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个再生固体培养基上培养。一段时间后，统计得到的菌落数分别为：27、21、24。则原生质体再生率（能再生的原生质体数占全体部原生质体的比例）约为________________。

果蝇肠道中有包括醋酸杆菌在内的多种微生物，对其进行了分离、研究。

（1）分离醋酸杆菌：培养基中加入一定浓度甘露醇既可为醋酸杆菌提供________，又能抑制其它肠道微生物的生长，因此可作为___________培养基用于分离醋酸杆菌。实验中剥取果蝇肠道并用__________（蒸馏水/无菌水/生理盐水）冲洗，将所得液体涂布于已制备的培养基中，分离得到醋酸杆菌。

（2）为研究醋酸杆菌对果蝇生长发育的影响，研究者分别使用含肠道微生物（A组）、无菌（B组）、醋酸杆菌（C组）的培养基喂养无菌果蝇，测定蛹形成的平均时间，结果如图。

据图可知，醋酸杆菌对果蝇蛹形成具有_________作用，酵母粉含量为_________时作用最显著。若研究者利用此实验证实醋酸杆菌在肠道微生物中起主要作用，则需补充D组的实验处理为_____________。

（3）从细胞结构来看，醋酸杆菌属于_________生物，可在细胞的_________中将醇类、糖类分解为乙酸。醋酸杆菌可降解纤维素，有助于果蝇消化吸收营养物质，果蝇采食时携带醋酸杆菌，利于其传播，二者形成了__________关系。

（4）研究表明果蝇大脑分泌的一种蛋白类激素——促胸腺激素（PTTH）在果蝇生长发育过程中可促进蛹形成，预测醋酸杆菌可___________（提前/延迟/不影响）果蝇PTTH峰值出现的时间。

（5）综上所述，醋酸杆菌影响果蝇生长发育的原因是：___________________________________

农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂(含氮有机物)在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。

(1) 微生物接种是微生物学研究中最常用的基本操作技术，该技术的核心 是_____________，应该在 ________________旁完成。图中B、C所示操作的目的是将聚集的菌种逐步_______________。

(2) 在选育过程中，应将土壤浸出液接种于以_______________为唯一氮源的固体培养基上。为了筛选出高效的目的菌，可比较单菌落周围透明圈的大小。实验结果如下图显示的A～E五种菌株中_______________ 是最理想菌株。    

(3) 若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_______________ 。对分离的细菌数目统计时，统计的菌落数目往往比活菌的实际数目 ________________。原因是_____________________________________。

(4) 操作过程中有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②操作者的双手；③玻棒、试管、烧瓶和吸管。其中需要灭菌的是__________。(填序号）

(5) 在提取胡萝卜素的实验中，所用到的方法是 ________________ 一般情况下，提取胡萝卜素时，选取的有机溶剂为石油醚，选取该溶剂的原因是_________________________________________________________________。

(1)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的____________。实验需要振荡培养，振荡培养的作用是__________________________________，由此推测目的菌的代谢类型是____________。

(2)培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增多。

(3)转为固体培养基时，常采用平板划线法或_____________ 进行接种。平板划线法所使用的工具称_______，这种工具操作时应采用的灭菌方法是_________。接种时，在第二次及其后的划线操作时，总是从__________________开始划线。

(4)某同学将污水样液制成了10¹〜10⁴的四个稀释样液，分别取0.1mL接种到4组(每组4个)固体选择培养基上，若在10³组的4个平板上，获得的菌落数是357、39、38和37，则每升污水样液中的活菌数约为____________个。

(5)在上述实验操作过程中，获得纯净目的菌的关键是_________________。

某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的部分步骤如下图所示。请回答下列问题：

（1）培养基中的化合物A能为目的菌的生长繁殖提供_____   __   _，筛选过程中所用的培养基的常用灭菌方法是_____   ___     。

（2）实验中“重复多次”的目的是_____   ___          ，为了达到分离纯化目的菌的目的，在固体培养基上接种的方法可以是_____   ________         ___。

（3）实验过程中振荡培养，“振荡”的目的是_____   ________   _______   _______

（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌后才能倒掉，目的是_______   _______。

（5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的数目，需要设计_______   _______培养基作为对照组，此对照组的目的是证明培养基是否被杂菌污染，如果被污染，则统计的“目的菌”菌落数可能比实际活菌数_   _______。