2.
回答下列(一)、(二)小题:
(一)牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏;牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。
(1)为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如图操作。用无菌吸管从三角烧瓶中吸取1 mL生牛奶稀释液至盛有9 mL无菌水的试管中,如此重复3次,将10 mL生牛奶稀释到10-4浓度后,取0.1 mL滴在培养基上。
①将牛奶稀释液滴加在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是_______________。
②该涂布工具最合适的灭菌方法是_______________________。
(2)图中所示方法为稀释培养法,按此方法培养得到的3个培养皿中菌落数分别为25个、23个、24个,则生牛奶中每毫升含细菌数为______个。
(3)消毒后牛奶中绝大部分细菌被杀死,若用稀释平板法检测消毒后牛奶是否含有细菌,则在操作步骤上应作什么改动?______________________。
(4)涂布结束后将培养皿______,在37℃______________中培养。
(5)细菌种群进化过程中,起主要作用的变异是______。
A.环境条件 B.基因重组 C.基因突变 D.染色体变异
(二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶,拟利用基因工程技术将基因E转移入矮牵牛中,以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力,请回答:
(1)从兔肝细胞中提取mRNA,在_________酶的作用下形成互补DNA。然后以此DNA为模板在体外利用____________反应大量扩增,得到基因E。在相关酶的作用下,将基因E与Ti质粒连接在一起,形成___________,再导入用氯化钙处理的_______________,侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养,最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是________________(A.叶片在含合适浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织 B.愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽 C.再生的芽在细胞分裂素含量高的培养基上生根 D.愈伤组织在含合适浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。
(2)取转基因矮牵牛叶片,放入含MS液体培养基和适量浓度甲醛且密封的试管中,将试管置于__________上,进行液体悬浮培养。一段时间后测定培养基中甲醛的含量,以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用:一是提供营养;二是__________,从而使叶片保持正常形态。