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            • 1.

              高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌,其筛选过程如下图所示,请据图回答有关问题:



              (1)过程①②合称为______________________。从功能上看,Ⅰ号培养基属于____________;该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

              (2)对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

              (3)在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________;也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养,得到若干菌落后用碘液作显色处理,看到如下图所示情况,可判断图中周围___

              _________的菌落含有所需菌种。


              (4)如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失,且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性,则应选择下图中的______(填写字母)固定化工艺。

            • 2. 日前微博传言手机细菌比马桶多。如图,央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题:

              (1)图中接种细菌的方法是_________。用该方法接种的目的是观察菌落的________和________。

              (2)图中用于培养细菌的培养基能够为细菌提供的基本营养物质是_______________________,为确定马桶按钮上大肠杆菌数目,需在培养基中加入__________________用于鉴别。

              (3)两个电视台实验操作均正确且完全一致,但报道结果截然不同,你认为可能原因有:

                  ①__________________________      ②____________________________

              (4)根据实验结果为了保证健康我们使用手机一段时间后应对手机进行______________。

            • 3.

              经人工诱变获得的天冬氨酸缺陷型菌株,菌体自身不能合成天冬氨酸,必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。下图是科研人员利用“影印法”筛选天冬氨酸缺陷型菌株的部分过程(注:基本培养基中不含氨基酸,完全培养基中含所有种类的氨基酸)。回答下列问题:


                  (1)过程①接种的方法是________________。待测培养皿中的培养基是___________(答“基本”或“完全”)培养基。

                  (2)过程②是将印在同一块丝绒布上的菌落,先后转印至两个不同的平板上。该过程应该先转印到_______________(答“基本”或“完全”)培养基上,原因是____________________。

                  (3)完成②过程的转印并在28℃的培养箱中培养2天后,两个平板上出现的菌落有的相同,有的不同。完全培养基上出现的菌落A和菌落B中,不可能是天冬氨酸缺陷型菌株的是_________菌落(答“A”或“B”),原因是___________________。

                  (4)为了进一步鉴定筛选到的菌株确实是天冬氨酸缺陷型菌株,科研人员又制备了甲、乙两个平板,这两个平板中营养成分的差异是________________。将待鉴定菌种接种到两个平板中,置于适宜条件下培养一段时间后,若观察到两个平板中菌落的生长情况是__________,则说明该菌株是天冬氨酸缺陷型菌株。

                  (5)临时保存该菌种时,可将菌种接种到试管的______上,在合适的温度下培养。长期保存时可采用________的方法。

            • 4.

              樱桃番茄富含多种天然有机酸、人体必需氨基酸、维生素和多种矿物质,但因其含糖量不高,影响酒精发酵效果,经实践摸索,调整发酵工艺,樱桃番茄成为酿造保健酒的好原料。下图1是利用固定化酵母或游离酵母发酵樱桃番茄果酒的工艺流程,请分析回答:


              (1)主发酵结束后,需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵,为了防止醋酸菌污染,加入容器中液体的量应______(填“注满”、“2/3”或填“1/3”),以保证果酒品质。

              (2)图2是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果,从图中可以看出,两者发酵速率相近,但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多,主要原因是________________;后期游离酵母发酵速度减慢,除了底物浓度降低外,还可能是因为_______________。

              (3)为探究固定化酵母重复使用的效果,对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验,图3是实验的结果,试分析在第2次发酵前期,酵母降糖速度明显加快的原因___________。实验结果说明固定化细胞具有_________________的优点。

              (4)用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞,溶解海藻酸钠时最好采用________的方法,以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应__________后,再与已活化的酵母细胞充分混合。若海藻酸钠浓度过低,会导致__________________,固定效果大大降低。

              (5)为分离纯化优良酵母菌品种,采用平板划线法进行如下操作,排序最合理的是________。

              A. ②①④③    B. ②①④①③②    C. ②①④②③②    D. ①④①③②

            • 5. 为了调查濠河的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:


              (1)制备实验所需的培养基时,在各成分都溶化后和分装前,要进行的是   __   和灭菌,对培养基进行灭菌的常用方法是   __   。倒平板时要待平板冷凝后,将平板倒置,其主要原因是   __   

              (2)该小组可采用上图②所示的   __   (方法)检测水样中的细菌含量。在接种前,随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间,这样做的目的是   __   ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数   __   

              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时,接种环通过灼烧灭菌,在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是   __   

              (4)在纯化过程中,在固体培养基上划线分离过程中,正确的操作是   __   

              A.每次划线时,接种环都需要蘸菌液一次

              B.划线分离时,需要把接种环深入到培养基中进行接种

              C.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连

              D.在超净平台中进行接种时,不能关闭过滤风

            • 6.

              根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜镜检以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌、尿细菌、纤维杆菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容:

              首先配制一系列不同性质的固体培养基,然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。

              (1)利用无氮培养基可筛选出________________。

              (2)用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_________________.

              (3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加人_______________。

              (4)用含较高浓度NaCl的培养基可选择出________________。

              (5)利用伊红一美蓝培养基培养混合菌,菌落呈黑色是____________,挑取该菌落单独培养,结合显微镜镜检和进一步用伊红——美蓝鉴别培养基来确定。

              (6)在无氧环境下培养混合菌,同时加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,利用菌落特征,结合显微镜镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出________________。

              (7)利用碳源为纤维素的液体培养基可筛选______________________。

              (8)若筛选尿细菌,则配制的培养基特点是________________________。初步筛选后为了进一步验证分解尿素的细菌是否存在,常用的方法是        

              (9)在上述实验接种时可采用平板划线法,操作结束为什么仍需要灼烧接种环?                                                           

            • 7. 塑料袋造成的“白色污染”早已成为地球公害,塑料袋的自然分解需要20-1000年不等.2008年7月3日加拿大媒体报道:16岁的高中生丹尼尔-伯德从土壤中找到了一类假单胞杆菌,能将聚乙烯塑料的自然降解过程缩短至3个月,而且分解产物只有水和二氧化碳.伯德也因此被誉为“塑料袋的克星”.以下是伯德寻找到聚乙烯降解菌的大致过程.
              请回答:

              (1)根据你的生活经验推测,伯德这项研究的“土壤样品”最可能取自于               

              (2)图中“…”表示对土壤悬浮液进行一系列的                    ,目的是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而能在Ⅰ号培养基表面形成单个            

              (3)I号培养基属于     培养基,其作用是使目的菌能“脱颖而出”.如图采用的接种方法为      

                           。使用Ⅱ号培养基的目的是使目的菌数目增多,培养基中必须包含水、无机盐、                   等基本营养成分,从物理性质来看,Ⅱ号培养基中不能添加                     

              (4)为避免杂菌污染培养物和环境,微生物培养的培养基在接种前和完成实验后都要进行              。接种时要在                   操作。

            • 8.
              人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:

              (1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是__________(填序号)。

              ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

              (2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌液量不宜过多的原因是____________ _______________________________________________________________________。

              (3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口黏附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是_____________________________________________________________。

              (4)刚果红可以与纤维素形成      复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见下图)。图中降解圈大小与纤维素酶的__________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是__________(填图中序号)。

              (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株__________更适合用于人工瘤胃发酵,理由是__________________________________________________________________________。

            • 9.
              某生物兴趣小组同学为探究牛的瘤胃中是否含有分解尿素的细菌,设计了以下实验。据图分析回答微生物的利用相关知识:

              (1)从营养物质的组成分析,图中所用培养基共有的特点是以____________为唯一氮源。

              (2)转为固体培养基时,常采用平板划线的方法进行接种,这种方法的主要目的是使聚集的接种物___________________。

              (3)为进一步确定取自瘤胃中液体的适当稀释倍数,将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24~48 h,观察并统计尿素分解菌的菌落数,结果如下表,其中_____________倍的稀释比较合适。

              稀释倍数

              103

              104

              105

              106

              107

              菌落数

              >500

              367

              248

              36

              18

              从设计实验的角度看,培养箱中还如何设置一组对照实验________________________________________,此对照实验的目的是________________________________________________________________________。

              (4)鉴定尿素分解菌菌落原理是,微生物产生的______能将尿素分解成氨,使培养基的pH升高,使指示剂变红。实验结束后,使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉,这样做的目的是__________________。

            • 10.
              多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用,是土壤、河水中常见的污染物之一。下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。请回答:

               

              (1)步骤①~③的培养过程中,培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源,目的是             。(2)步骤①~③的培养过程中,需将锥形瓶放在摇床上振荡,一方面使菌株与培养液充分接触,提高营养物质的利用率;另一方面能                    

              (3)步骤④用              纯化菌株Q过程中,在做第二次以及其后的划线操作时,总是从上一次划线的末端开始划线,原因是                             

              (4)接种环通过灼烧来灭菌,完成步骤④中划线操作,共需灼烧接种环      次。采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是                                      

              (5)为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株,研究人员又对菌种Q进行了诱变处理,得到突变株K。为了比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力,设计了下列实验,请补全实验步骤:

              ①取9只锥形瓶均分成三组,编号为A、B、C。

              ②向9支锥形瓶中分别加入等量                                                

              ③向A、B、C三组培养液中分别加入等量                                       

              ④ 28 ℃恒温培养3天后,测定锥形瓶中多环芳烃菲的降解率。

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