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            • 1.

              I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落.回答下列问题:


              KH2PO4

              1.4g

              Na2HPO4

              2.lg

              MgS04•7H2O

              0.2g

              葡萄糖

              10.0g

              尿素

              1.0g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL



              (1)该培养基可筛选的细菌是______,判断的依据是______。
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养______(填“能”或“不能”),理由是__________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用______法接种.为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时,每一次划线前都要进行灼烧,目的是________________________。


              II.叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中,该技术能有效改良植物的品质。回答下列问题:

              (1)转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增,该技术的原理是_______________。

              (2)将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______,再将目的基因导入其中,最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

              (3)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,其遗传方式______  (填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传定律,不会随______(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而保持了母本的遗传特性。

              (4)来自原核生物中有重要价值的外源基因,无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达,原因是 _________________。

            • 2.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”,某同学进行了如下实验:

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是________。

              (2)接种微生物的方法有很多,图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________。用该方法统计样本菌落数后,

              所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 3. 泡菜是中国人喜欢的食品,每年到了白菜、青菜、萝卜收获的季节,各家各户都会选恰当的时间,腌浸过冬食用的泡菜。请回答下列有关问题:

              (1)泡菜制作时发挥主要作用的微生物是乳酸菌,常见的乳酸菌有________两类。泡菜具有独特的酸味,主要是因为________,该反应过程中,底物所含的稳定化学能的主要去向是________。

              (2)实验室可采用________法进行乳酸菌菌种纯化,在对该菌种进行培养时,与常规微生物培养基相比还需要额外在培养基中添加________。实验室测定泡菜中亚硝酸盐的含量时,亚硝酸盐首先与________发生反应,随后再通过相关反应形成玫瑰红色染料,再与已知浓度的________进行比色。

              (3)市场上购买的真空包装泡菜,在没有发生漏气的状态下发生了“胀袋”现象,甲同学怀疑是杂菌污染导致的,乙同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说明理由:________。

            • 4.

              为了调查某学校附近河流的水质状况,该学校生物兴趣小组测定了河流水样中的细菌含量,并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题:

              (1)如图,该小组采用的是_______________分离水样中的细菌。操作时,接种环通过_________灭菌,在第二次及以后的操作时,总是从上一次的末端开始,这样做的目的是____________________________________。

              (2)该实验组将接种好的培养皿在恒温箱中培养时倒置,其目的是_________________________;在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为 __________________。

              (3)根据培养皿上菌落的平均数可以计算河水中该细菌的密度,但计算的数据要比实际活菌的数目少,原因是_____________________________________。除了上述的活菌计数法外,______________也是测定微生物数量的常用方法。

              (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养。结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:________________

            • 5. (15分)为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。回答下列问题:

              (1)该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是__________________________________________;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37, 据此可得出每升水样中的活菌数为___________。

              (2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过___________灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是_____________________________________________________。

              (3)示意图A和B中,________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

               (4)该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀,一部分进行静置培养,另一部分进行振荡培养,结果发现:振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是:振荡培养能提高培养液中________的含量,同时可使菌体与培养液充分接触,提高________的利用率。

            • 6.

              I.现有五种不同的抗生素(甲、乙、丙、丁、戊),要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上,分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果(图中●为添加点)。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答:



                            图1                                                  图2


              (1)由图1可知,_______种抗生素的抗菌效果最好。

              (2)如果给予剂量为2mg,那么________种抗生素最适宜成人使用,理由是_____________。

              (3)已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成,由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

              (4)为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌,将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________(填“涂布平板”或“平板划线”)操作。实验过程中,与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________,以缩短培养时间。

              (5)本实验过程中所使用的无菌技术,除用来防止培养物(金黄色葡萄球菌)被其他外来微生物污染外,还能_______________。



              II.人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA基因母牛,以便通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示。请回答:


                                                          图1


              (1)如图1所示,将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中,该技术称为_________技术;供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞,其原因是_________________________。

              (2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行_______处理。

              (3)采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR反应体系扩增SRY基因(Y染色体上特有的性别决定基因)片段,然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

              ①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP(包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP)、引物以外,还应含有____________;其中,dNTP的作用是____________________________________,引物应选用图2中的________(填图中标号,图2中I、II、III、IV是引物,箭头是延伸方向)。




                                            图2


              ②若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞______(填“能”或“不能”)用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

            • 7.

              请分析回答下列问题:(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。常用的灭菌方法有____________灭菌、干热灭菌和________灭菌。

              (2)稀释涂布平板法分离纯化土壤中微生物的正确操作步骤是        (        )

              ①土壤取样  ②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中制备土壤提取液 

              ③吸取0.1 mL溶液进行平板涂布  ④依次稀释至101、102、103、104、105 、106、107稀释度

              A.①②③④         B.①③②④     C.①②④③         D.①④②③

              (3)利用酵母菌将葡萄汁发酵后是否有酒精产生,可以用重铬酸钾来检验,在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应呈______色。在发酵过程中,随着酒精度的提高,发酵液逐渐呈现深红色,原因是______________________.

              (4)酵母菌适合生活在偏酸性环境,而放线菌则适合生活在偏碱性环境中,分离二者所用的培养基称为____________。

              (5)在腐乳制作的过程中,起主要作用的微生物是____________。

              (6)腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些 (        )

              ①盐的用量  ②酒的种类和用量③发酵温度  ④发酵时间  ⑤香辛料的用量

              A.①②③④⑤     B.①②③     C.①②⑤       D.③④




            • 8.

              利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌(单细胞真菌),未突变菌不能在含有浓度为10﹣5M的β━紫罗酮的培养基上生长.菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色.图甲为选育及提取获得β━胡萝卜素流程. 

              (1)三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是________.   

              (2)为选出高产突变菌种,还应在培养基中添加________.   

              (3)进行③过程时,应选取________色的菌落接种至液体培养基.为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种,采取重复________(填图甲中数字)过程.   

              (4)固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示.该同学的接种方法是____。 

              (5)过程⑥是________,用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品,结果发现颜色较浅,导致该现象的原因可能是萃取时,_______________________________.(写出两点)

            • 9.

              如表所示为某微生物培养基的配方:


              成分

              NaNO3

              K2HPO4

              KCl

              MgSO4•7H2O

              FeSO4

              (CH2O)

              H2O

              抗生素

              含量

              3g

              1g

              0.5g

              0.01g

              0.05g

              30g

              1000mL

              0.1万单位


              (1)依物理性质,该培养基属于_______培养基,依功能看,该培养基属于______培养基。培养基配制时,灭菌与调pH的先后顺序是______________。下列对培养基进行灭菌的最适方法是_____灭菌。
                 A.高压蒸汽  B.紫外灯照射  C.加入适量的广谱抗生素  D.过滤
              (2)若用该培养基培养分解纤维素的细菌,应除去的物质有_____________________。应加入的碳源是___________________。 图甲是细菌纯化培养结果,据图分析,在培养基上划线接种时,划线的顺序依次是_______________(用编号表示)。产生每个菌落的最初细菌数目是__________个细菌。研究者在接种操作培养过程中,得到了一个菌落分布如图乙所示的平板。该接种方法是____________________;推测接种时可能的操作失误是________________________。

            • 10. 纤维素酶的成本能否下降,是能否实现乙醇工业化生产的关键因素.纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取.某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养.
              ①培养纤维素酶分解菌的土样最好选择在 ______ 环境采集.
              ②以下是一种培养基配方:纤维素5g、NaNO31g、Na2HPO4•7H2O1.2g、KH2PO40.9g、MgSO4•7H2O0.5g、KCl 0.5g、酵母膏0.5g、水解酪素0.5g(蒸馏水定容到1000mL).
              该培养基能够增加样品中纤维素分解菌的浓度,其原理是培养基中 ______ 是主要碳源,有利于纤维素分解菌生长,同时抑制其他微生物生长.
              ③为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在鉴别培养基上加入刚果红染液,将筛选获得的菌液稀释后用 ______ 方法接种到鉴别培养基上,然后挑选产生透明圈的菌落作为菌种进行扩大培养.
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