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            • 1． 苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．下图（一）是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；下图（二）是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的二种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题．
              （1）将图（一）①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有 种DNA片段．过程②需要用到 酶．
              （2）假设图（一）中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图（一）中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？ ，请说明理由 ．
              （3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒 
              A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开       B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
              C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开   D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
              （4）图（二）中α链是 ．不同组织细胞的相同DNA进行过程③时启用的起始点 （在“都相同”、“都不同”、“不完全相同”中选择），其原因是 
              难度：中等
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            • 2． 图1中①～③分别表示人体细胞中发生的3种生物大分子的合成过程．请回答下列问题．
              （1）细胞中过程②发生的主要场所是 
              （2）已知过程②的α链中鸟嘌呤与尿嘧啶之和占碱基总数的54%，α链及其模板链对应区段的碱基中鸟嘌呤分别占29%、19%，则与α链对应的DNA区段中腺嘌呤所占的碱基比例为 

              （3）由于基因中一个碱基对发生替换，而导致过程③合成的肽链中第8位氨基酸由异亮氨酸（密码子有AUU、AUC、AUA）变成苏氨酸（密码子有ACU、ACC、ACA、ACG），则该基因的这个碱基对替换情况是 
              （4）在人体内成熟红细胞、浆细胞、记忆细胞、效应T细胞中，能发生过程①②③的细胞是 
              （5）人体不同组织细胞的相同DNA进行过程②时启用的起始点 　 （填“都相同”“都不同”或“不完全相同”），其原因是 
              （6）图2为某病毒的遗传物质，上有两个限制酶酶切位点（标为P和Q），用相关酶完全切割后得到的每个DNA片段的长度如表格所示．下列说法错误的是 （多选）
              切割位置限制酶得到的每个DNA片段的长度
              QEcoRⅠ3，7
              PBamHⅠ8，2
              A．该病毒的遗传物质是DNA或RNA
              B．该病毒的中心法则是DNA→RNA→蛋白质
              C．若用EcoRⅠ和BamHⅠ完全切割该病毒DNA，新形成了8个游离的磷酸基团
              D．若用EcoRⅠ和BamHⅠ完全切割该病毒DNA，得到的各种长度的DNA片段有3、5、2．
              难度：中等
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            • 3． 下列是在生产实践中培育相应动植物的过程，请回答：
              （1）下面是培育转基因低乳糖奶牛的流程图．
              乳糖分解酶基因​成纤维细胞→转基因胚胎受体母牛转基因低乳糖奶牛
              乳糖分解酶基因是具有 的DNA片段，将其导入成纤维细胞中常用的方法是 ；转基因成功之后，通常还需要通过核移植技术将成纤维细胞的细胞核移入到 细胞中，才能培育出转基因牛胚胎，原因是 ．应选择 时期的胚胎移植到受体母牛体内，受体母牛需要经过 处理才适合进行胚胎移植．
              （2）为保持君子兰亲本的优良性状，科研人员取君子兰幼叶培养出愈伤组织，然后再从愈伤组织分化形成小植株，该过程中君子兰的生殖方式是 ．这种技术称为 ，该技术的实际应用还有 方面（答出一点即可）．
              难度：中等
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            • 4． 回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

              （1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中 ， 并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用．
              （2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的 键．
              （3）组成基因表达载体的单体是 ．基因表达载体中的启动子是 识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过 （填过程）合成mRNA．
              （4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？ 
              （5）将受体细胞培养成植株需要应用 技术，该技术的理论依据是
              难度：中等
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            • 5． 随着生物科学技术的发展，动物、植物乃至人类自身的生殖方式变得越来越多样化．既解决了一些社会的需求，也带来了一些社会的忧虑．请根据下列各种情况，回答有关问题：
              （1）试管婴儿技术：解决了部分夫妻不育的难题或生育健康后代的要求．这种技术和母亲正常怀孕生产过程的相同之处是都是以 为发育起点，不同之处在于试管婴儿是在体外进行受精后，在试管中进行胚胎培养；最后选取健康的胚胎进行 ，保证生出健康的孩子．
              （2）胚胎分割技术：可解决良种动物快速大量繁殖的问题；对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意  ， 否则将影响分割后的胚胎的恢复和进一步发育，如需做性别鉴定，还需从 细胞取样做DNA分析．
              （3）植物体细胞杂交技术：可以用来培育一些种间亲缘关系较近的杂交种，如白菜﹣甘蓝，实质上是利用了和 两大关键技术来实现．
              （4）利用基因工程培育转基因植物：如将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞中，可培育转基因高赖氨酸玉米．选用的表达载体可以是农杆菌的Ti质粒，是因为该质粒的T﹣DNA能 ；除农杆菌转化法外，还有基因枪法、 法等．
              难度：中等
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            • 6． 下列是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．

              （1）过程①和②得到的Y细胞称为 ．得到的单克隆抗体最主要的优点是 ．
              （2）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构是否相同？  ． 为什么？ 
              （3）在基因表达载体中，启动子的作用是 识别和结合的部位，驱动V1基因的 
              （4）质粒上的标记基因的作用是 ．
              （5）过程④要用到的主要酶是
              难度：中等
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            • 7． 请个别同学回答以下关于基因工程和胚胎工程的相关问题：
              （1）基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性．利用基因工程等技术培育转基因生物时，基因工程的四步骤如下：
              第一步：目的基因的获取．获取方法有 （写出两种即可）．
              第二步：基因表达载体的构建．该步骤常用的工具酶是 ．完整的重组载体应具备 种特殊DNA片段．
              第三步：将目的基因导人受体细胞．如受体细胞为动物的  ， 则常用的方法是显微注射法；如受体细胞为微生物细胞，则用 处理细胞，使其处于感受态，然后在一定温度下重组表达载体与缓冲液混合完成转化．
              第四步：  ．
              （2）胚胎工程主要是对哺乳动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育，获得人们所需要的成体动物的新技术．
              ①体外受精：对精子进行获能处理的方法有 ．获能的精子与成熟的卵子需在 中完成受精作用．
              ②早起胚胎的发育：受精卵不断增殖的过程，细胞分化最先出现在 期．
              ③胚胎移植：适合移植的胚胎是 ．
              难度：中等
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            • 8． Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．如图为科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的技术流程图，据图回答有关问题：

              （1）步骤①中，在核移植之前应该采集卵母细胞，采用的主要方法是用 处理，使其排出更多的卵子，然后从 中冲取．
              （2）步骤②中，重组细胞培养到囊胚期，可从其 中分离出ES细胞，该细胞在形态上表现为体积小、 、核仁明显；在功能上具有发育的 
              （3）步骤③中，将含有Rag2基因的表达载体导入ES细胞，常采用 法．为检测Rag2基因是否表达出相应的蛋白质，通常采用 的方法．
              （4）转基因和细胞核移植（克隆）等生物技术存在安全性和伦理问题，如科学家赋予转基因生物某些特殊性状，它们有可能成为“入侵的外来物种”，威胁生态系统中其他生物的生存，这属于转基因生物的 （“食品安全”、“生物安全”或“环境安全”）问题；我国政府对待克隆人的态度是 ，不反对治疗性克隆．
              难度：中等
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            • 9． 回答下列问题：
              （1）iPS细胞是利用逆转录病毒将Oct3/4、Sox2、Klf4和c﹣Myc 等四个基因转入分化的体细胞中诱导其成为类似胚胎干细胞的一种细胞．将四个目的基因导入体细胞之前，通过 技术进行迅速扩增，然后再与逆转录病毒结合导入体细胞，逆转录病毒所起的作用是 ．
              （2）体外受精是对体内受精的模拟操作，首先对实验动物用 处理，使其排出更多的卵子，待精子获能后，可以在 或者专用受精溶液中完成受精．
              （3）精卵体外受精后，应将受精卵移入发育培养液培养．它的成分比较复杂，除了一些无机盐和有机盐类外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸、 等物质．
              （4）对于“试管动物”的正确理解是 
              A．属于无性生殖       B．属于有性生殖           C．体外受精
              D．体内受精           E．体外发育                 F．体内发育
              G．运用基因工程技术   H．运用细胞工程技术
              （5）我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达培育出了抗虫棉．转基因作物的种植使害虫得到有效控制，减少了农药的使用量，保护了生态环境．与此同时，人们对转基因生物的安全性提出了质疑，主要体现在生物安全、 和 等方面．
              （6）桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成无废弃物农业，这主要遵循了生态工程的 原理．同时，通过饲养家禽、家畜、栽培食用菌，提高农民经济收入，是保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的 原理．我国西北一些地区年降雨量少，适宜种植灌木和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林称为残败的“灰色长城”．其失败的原因主要是违背了 原理．
              难度：中等
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            • 10． 白僵菌可感染农业害虫，常作为防治害虫的菌剂．由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感，且杀死害虫的能力较弱，科研人员对其进行基因工程改造，流程如图所示．

              （1）从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因，通过 技术可在体外大量扩增．该扩增过程需要种引物，所需添加的酶是 
              （2）图中形成重组质粒1过程需要的限制酶是 ，其作用是破坏DNA分子中的 ．
              （3）将重组质粒2导入经 处理成为感受态的白僵菌．一段时间后用含有的平板培养基进行筛选，获得含有Bar基因的重组白僵菌．
              （4）科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上，以此饲喂饥饿处理的害虫，记录单位时间内的 ，以判断重组白僵菌的杀虫效果．
              难度：中等
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