如图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料.图中质粒表示基因工程中经常用的载体-pBR322质粒,Amp
r表示青霉素抗性基因,Tet
r表示四环素抗性基因.根据如图回答下列问题(限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ切割形成的末端均不相同):
(1)只能从垂体细胞提取人生长激素mRNA,不能从其他细胞提取的原因是 ______ .
(2)过程③往往通过PCR获得,此过程须添加引物,所以设计引物时一定要有一段已知 ______ 的脱氧核苷酸序列.
(3)过程④顺利进行的前提之一是需要在目的基因两侧位置上连接合适的限制酶识别序列.以下组合正确的是 ______ .
A.EcoRⅠ和PstⅠ | B.PstⅠ和HindⅢ | C.HindⅢ和EcoRⅠ |
(4)如果目的基因两侧只连接限制酶PstⅠ的识别序列,现用限制酶PstⅠ切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Amp
r、Tet
r抗性质粒)先接种到甲培养基上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示.接种到甲培养基上的目的是筛选 ______ 的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存货状态分别是 ______ 、 ______ .转化后的细胞中是否含有人生长激素基因,也可以用 ______ 方法进行检测.
(5)酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞,与大肠杆菌等细菌相比,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行 ______ 并分泌到细胞外,便于提取.