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            • 1.
              骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一.科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向.实验过程如下:
              步骤1  用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间.
              步骤2  取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~200ng•mL-1)的培养基继续培养24h.
              步骤3  对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(未染色细胞数/细胞总数×100%),结果如图1.
              步骤4  分别提取TSA浓度为0ng•mL-1、25ng•mL-1、50ng•mL-1处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(Bax、Bcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2.

              分析回答:
              (1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是 ______ .高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是 ______ ,细胞培养箱中保持5% CO2的作用是 ______ .
              (2)步骤2中,设置0ng•mL-1 TSA实验的主要目的是 ______ .
              (3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是 ______ .
              (4)图1所示结果表明 ______ .
              (5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中 ______ 基因过度表达会加速细胞凋亡.
            • 2.
              蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽,具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应. 体外研究发现,蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用.研究表明,阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡.科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制,进行了以下实验.请完善实验并回答问题.
              ①方法步骤:
              a.取4只相同的培养瓶编号,分别加入等量的完全培养液并接种等量离体胃癌细胞.
              b.1号培养瓶为空白对照,向2~4号培养瓶中分别加入 ______ μg/mL蜂毒素溶液.
              c.培养48小时后,检测并统计 ______ ,结果如图1所示.
              d.重复a、b步骤,检测凋亡基因(Bax、Bel-2)的表达,结果如图2所示.

              ②分析讨论:
              a.图1表明 ______ .
              b.图1、图2表明:从基因水平上看,蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与 ______ 有关.当 Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现 ______ 趋势时,将会诱导胃癌细胞凋亡.
            • 3.
              三羟基异黄酮(简称GST)是从豆科植物根部分离得到的一种天然产物.它具有显著的抗癌、抑菌、抗氧化等作用.经研究发现:GST可通过影响细胞凋亡基因(Bcl-2基因和Bax基因)的表达而诱导癌细胞凋亡.科研人员为研究GST对鼻咽癌细胞的影响和作用机制,进行了以下实验.请完善实验并分析回答相关问题.
              I、实验步骤:
              (1)取5个相同的培养瓶,编号A、B、C、D、E,分别加入等量的培养液.向A瓶接种正常细胞,B、C、D、E瓶接种 ______ .
              (2)向C、D、E瓶中分别加入5μmol/L GST、10μmol/L GST、15μmol/L GST溶液.其他培养条件相同且适宜.
              (3)培养一段时间后,检测并统计 ______ ,结果记录于表1.
              (4)重复上述步骤,检测、统计, ______ 结果记录于表2.
              表1 Bcl-2基因表达率 Bax基因表达率
              正常细胞 不表达 全部表达
              鼻咽癌细胞 90% 19%
              5μmol/L GST干预组 75% 58%
              10μmol/L GST干预组 49% 67%
              15 μmol/L GST干预组 22% 85%
              表2 鼻咽癌细胞凋亡率
              5μmol/L GST干预组 15.72%
              10μmol/L GST干预组 27.33%
              15 μmol/L GST干预组 35.48%
              II、分析与讨论
              ①表1数据说明:从基因水平上看,GST诱导鼻咽癌细胞凋亡与Bcl-2基因和Bax基因的表达有关.当Bcl-2蛋白/Bax蛋白的比值出现 ______ 趋势时,会诱导鼻咽癌细胞凋亡.
              ②表2数据说明GST可诱导鼻咽癌细胞凋亡,且与 ______ 有关.
              ③培养动物细胞要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织,而培养癌细胞不需要相关酶处理的原因是癌细胞膜上的 ______ 等物质减少,易游离而从癌组织转移出去.
            • 4.
              如图表示细胞内发生的一系列重大生命活动,请据图回答下列问题:

              (1)B过程表示一个细胞增殖产生的后代,在形态、结构和功能上发生 ______ 的过程,该过程发生的根本原因是: ______ .
              (2)该生物为 ______ 生物,其中A过程的方式包括 ______ .
              (3)细胞识别是细胞信号传导的前提,它是通过 ______ (填细胞结构)实现的,细胞识别的物质基础是该结构上有 ______ .
              (4)细胞凋亡是由 ______ 决定细胞自动死亡的过程.
              (5)显微镜下观察C过程的细胞,会发现细胞核出现体积 ______ ,染色质 ______ ,染色加深等特征.
              (6)D过程细胞产生根本原因是 ______  基因发生突变.
            • 5.
              请回答下列有关实验的问题:
              (1)在生物实验室里,有下列试剂供实验时选用:①质量分数为15%的HCl溶液;②0.5g/mL的蔗糖溶液;③质量分数为0.2%的秋水仙素溶液;④0.01g/mL的龙胆紫溶液.如果要观察植物细胞的染色体形态,要选用的试剂有 ______ (填序号).欲使普通小麦的单倍体植株结实,可选用试剂 ______ (填序号)处理幼苗.如果用试剂②处理紫色洋葱鳞片叶外表皮的临时装片,过一段时间后,用清水代替试剂②处理再次处理,整个过程中在高倍镜下观察到的现象是 ______ .
              (2)核辐射会诱导细胞凋亡.人白细胞介素18(IL-18)能促进免疫细胞的增殖和分化,提高机体免疫功能.某科研小组开展了“IL-18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的抑制作用“的研究:选取若干实验小鼠,随机分成三组:①组无辐射损伤;②组辐射损伤(60Co照射,下同);③组先同量辐射损伤,1天后注射IL-18.14天后分别取各组小鼠脾细胞进行体外培养,在培养了0h、12h、24h、48h后,进行细胞凋亡检测,得到的细胞凋亡相对值如表:
              组别 处理方法 0h 12h 24h 48h
              无辐射损伤 0.046 0.056 0.048 0.038
              辐射损伤 0.460 0.420 0.530 0.520
              辐射损伤+IL-18 0.239 0.265 0.279 0.269
              从表中数据可知,细胞凋亡相对值越小,说明发生凋亡的脾细胞数目越 ______ ;从 ______ (组别)两组数据可知,IL-18能抑制脾细胞凋亡.
              科研小组还设置了第④组实验,方法是先注射IL-18,3天后进同量辐射损伤,14天后的实验操作同前三组,与第③组相比,设置第④组的目的是 ______ .
              (3)一氧化氮与乙酰胆碱都是与学习记忆有关的神经递质,一氧化氮合成酶(NOS)能促进细胞内一氧化氮的合成.下列为某科研团队探究DHA增加学习记忆的分子机制的实验方案:
              材料与试剂:食用油,添加DHA的食用油,普通饲料,若干只生理状况相同的初断乳大鼠.
              实验步骤:
              第一步:将初断乳大鼠随机分成4组,编号A、B、C、D.
              第二步:每日经口灌喂食物,组成见表
              组别 A组 B组 C组 D组
              食物 普通饲料 普通饲料+小剂量
              添加DHA的食用油
              普通饲料+大剂量
              添加DHA的食用油
              第三步:饲养8周后,测定脑组织中乙酰胆碱酶AChE和NOS的活性,结果如下:
              组虽 A组 B组 C组 D组
              AChE活性(U/mg) 0.4 0.5 0.7 0.8
              NOS活性(U/mg) 1.4 1.2 1.8 2.0
              一氧化氮与乙酰胆碱从突触前膜释放的方式分别是 ______ .方案中B组实验采用的食物是 ______ .选用初断乳大鼠而不选成熟大鼠的原因是 ______ .
            • 6.
              细胞自噬是指细胞通过降解自身结构或物质使细胞存活的自我保护机制.细胞面临代谢压力时,细胞可降解自身大分子或细胞器为生存提供能量.如图1、图2为酵母细胞自噬的信号调控过程,AKT和mTor是抑制酵母菌凋亡和自噬的两种关键蛋白激酶.

              (1)酵母菌的同化作用类型是 ______ .
              (2)据图1所示,营养物质充足时,胰岛素与受体结合,激活 ______ 来抑制凋亡,激活的该酶一方面可促进葡萄糖进入细胞,另一方面可以促进葡萄糖分解为 ______ (中间产物)进入线粒体产生大量ATP.在ATP充足时激活的mTor抑制自噬的发生.
              (3)据图2所示,当环境中营养物质或胰岛素缺乏时,mTor失活,酵母细胞通过启动 ______ 过程为细胞提供ATP;如果上述过程无法满足代谢需要,酵母细胞则启动 ______ 程序.
              (4)酵母菌在饥饿状态下,内质网或高尔基体会产生膜泡包围细胞内容物形成自噬体.酵母菌液泡内富含水解酶,科学家在研究液泡与自噬的关系时,以野生型酵母菌为对照组,液泡水解酶缺陷型酵母菌突变体为实验组,在饥饿状态下,得到图3所示结果.此结果证明 ______ .自噬发生过程中,液泡在酵母细胞中的地位和人体细胞中 ______ 的地位类似.
            • 7.
              目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞.顺铂是常用的化疗药物,但癌细胞易产生顺铂耐药;双氢青蒿素也具有抗癌作用.为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制,研究者进行了如下实验.
              (1)癌细胞不受机体控制,在适宜条件下能 ______ .本实验选用患者的耐顺铂肺腺癌细胞,在CO2恒温培养箱中进行培养,培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有 ______ ,此外培养液中加入一定浓度顺铂,目的是 ______ .
              (2)将上述培养的细胞分为对照组和实验组.实验组用二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素处理,对照组的处理应为 ______ ,其它条件相同且适宜.24小时后均换为含1μg/mL顺铂的细胞培养液,培养36小时后收集细胞,观察并测定细胞凋亡率,结果如下.
              分析以上结果说明 ______ .
              (3)为进一步揭示双氢青蒿素对顺铂耐药性影响的机制,研究者检测了肺腺癌细胞中与凋亡有关的两种蛋白表达量的相对值,结果如下.
              对照组 实验组
              抗凋亡蛋白Bcl-2 135.2 93.8
              促凋亡蛋白Bax 82.6 114.8
              综合上述实验结果,推测双氢青蒿素可能通过 ______ Bcl2基因表达和 ______ Bax基因表达,从而逆转顺铂耐药.
            • 8.
              回答下列与生命科学探究的相关问题.
               
              组别
               
               
               
               
              处理
               
              30天后从尾静脉取血测定
               
              45天后取背部皮肤测定
               
              将适量同龄、健康小鼠分别饲养
               
              LPO含量(μg/mL)
               
              谷胱甘肽过氧化物酶活性(U)
               
               
              肤脯氨酸含量(μg/mL
              A:对照组
               
               
               
               34.1
               
               23.7
               
               26.2
               
              B:高剂量
               
              含不同剂量大豆异黄铜的溶液+饲料
               
               23.5
               
               18.9
               35.7
               
              C:中剂量  30.4  25.6  37.8
              D:低剂量  31.4  241.  30.4
              研究发现随着动物衰老,血液中谷胱甘肽过氧化物酶活性和皮肤胶原蛋白中肤羟脯氨酸含量会下降,而血液中脂质过氧化物(LPO)含量会增加.为研究大豆异黄酮对刚进入衰老期的小鼠相关指标的影响做了以下实验.
              (1)表中对照组的“处理”是 ______ .
              (2)若要将胶原蛋白溶液与肤羟脯氨酸含量溶液区分开,则选择的检测试剂是 ______ .
              A.龙胆紫B.班氏试剂C.双缩脲试剂D.碘液
              (3)为使分散后更有利于肤羟脯氨酸的提取,最好在反应系统中加入 ______ 酶.
              (4)本实验用小鼠而不用牛作为材料的优点主要是 ______ 等;为保证实验数据的准确性,饲料中不能含有的物质是 ______ ,理由是 ______ .
              (5)请在如图中用柱形图描述实验中衰老细胞血液中LPO的含量.
              ______
              (6)上述实验表明,对延缓皮肤衰老的作用最强的是 ______ 剂量的大豆异黄酮;大豆异黄酮对衰老小鼠血液谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响是 ______ ;高剂量的大豆异黄酮通过显著降低 ______ 而对动物衰老有一定的延缓作用.
            • 9.
              DNA作为遗传物质,其完整性的维系是至关重要的.然而,DNA难免会受到外界 环境影响而出现损伤.在进化过程中,生物个体获得了应对DNA损伤的一系列修复功能,当不能完全修复时,细胞可能癌变,也可能衰老或凋亡,在这一过程中,细胞调控因子p53具有重要地位:当其因各种原因失活时,出现肿瘤的机会将大大提高;若该调控因子存在,细胞将更可能衰老或者凋亡而不是癌变.根据上述资料,完成下列有关该过程的分析.
              (1)细胞凋亡是由 ______ 所决定的细胞自动结束生命的过程,因其受到严格的遗传机制调控,也常常被称为细胞 ______ 性死亡.
              (2)外界环境中因素能够影响DNA的复制,但不同环境因素诱发的机理不同,如紫外线、X射线及其他辐射能 ______ ,亚硝酸、碱基类似物等能 ______ ,某些病毒的遗传物质能影响宿主细胞的DNA.
              (3)细胞对DNA损伤的修复,形式虽然多样,但都是以未发生错误的母链为模版,按照 ______ 原则对子链进行修复.
              (4)从上述资料分析,编码细胞调控因子p53的基因属于 ______ (抑癌,原癌)基因.
            • 10.
              请回答下列有关细胞生命历程和线粒体的问题:
              (1)细胞凋亡是指由 ______ 所决定的细胞自动结束生命的过程,也叫做细胞编程性死亡.正常情况下,细胞凋亡对于多细胞生物体完成正常发育,维持 ______ 的稳定,以及抵御外界各种因素的干扰起着重要作用.
              (2)抑癌基因在正常细胞内的功能是 ______ .
              (3)细胞分化的实质是 ______ 的执行情况不同.不同类型的组织细胞内表达的基因 ______ (填“完全相同”、“完全不相同”、“不完全相同”).
              (4) ______ 染液是专一性染线粒体的活细胞染料.
              (5)研究发现,线粒体内膜成分中蛋白质所占比例明显高于外膜,其原因可能是 ______ . (从下面选项中选择)
              ①内膜折叠成嵴,使内膜的表面积大大增加 ②内膜上分布着与ATP合成有关的酶类 ③内膜上有与NADH的氧化有关的酶类
              (6)线粒体生长到一定大小就要开始分裂,形成两个新的线粒体.研究人员将胆碱缺陷突变型脉孢菌培养在含有3H标记胆碱(一种磷脂的前体物)的培养基中,使 ______ 带上放射性3H标记.然后收集细胞,转入不含放射性物质的培养基中继续培养,分别在不同时间收集细胞,再通过放射自显影检查培养时间长短不同的细胞中同位素的分布与含量.随着分裂次数的增加,具有放射性的线粒体的数量 ______ ,放射性均匀分布到新的线粒体中,并且随着分裂次数增加每个线粒体的放射性 ______ ,证明新的线粒体是分裂而来的.
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