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            • 1.

              为探究生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡是否具有保护作用,研究者提出了以下实验设计思路。

              第一步:进行实验分组,甲组加入培养液+心肌细胞+生理盐水;乙组加入培养液+心肌细胞+阿霉素;丙组加入培养液+心肌细胞+生物制剂Q+阿霉素。每组设置若干个重复样品,每组所加心肌细胞数相同。

              第二步:各组样品在相同且适宜的条件下培养一段时间后,在显微镜下观察记录细胞数。

              第三步:重复第二步若干次,统计计算心肌细胞的存活率。 

              请根据以上实验回答问题。

              (1)该实验的因变量是_____________。 

              (2)预测实验结果及结论:

              ①若_______________,则生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡具有保护作用。 

              ②若_______________,则生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡不具保护作用。  

              (3)上述实验还可以增加一组,加入的物质是_________________。           

            • 2.

              日本福岛核泄漏问题引起全世界的高度关注,核辐射会使人群中的癌症、畸变等疾病的发生率增加,影响几代人的健康。请回答:

              (1)一般而言,一个正常的细胞一旦到了其寿命,它会“自杀身亡”,这种过程属于________。而核辐射会使细胞发生基因突变,导致正常细胞的_________________失控而变成癌细胞。

              (2)某科研单位研制出一种新型药物X,据说对核辐射引起的恶性肿瘤有较好的疗效。某医院为验证其疗效,设计了如下的实验方案。请你补充完成下列实验方案:

              a.将配制的培养液均分为两组,并标号为A、B;

              b.A组加入一定量的药物x,B组不加,将_________________肿瘤细胞置于两组培养液中;

              c.两组放在相同适宜的条件下培养一段时间,显微观察并记录______________________。

              结果预测及结论:_____________________________________________________________________________。

            • 3.

              BAK基因是近年来发现的一种促凋亡基因,癌细胞内的BAK基因表达异常。将体外扩增的BAK基因导入癌细胞,有望成为癌症治疗的新途径。请分析回答:

              (1)正常细胞生命历程包括________等过程,细胞凋亡是由________所决定的细胞自动结束生命的过程。

              (2)癌变是在致癌因子的作用下,细胞内的________发生了突变而导致的。在癌变细胞内,BAK基因的表达水平明显________。

              (3)实验小组为验证导入BAK基因在胃癌细胞中大量表达对胃癌细胞产生的影响,进行如下操作,并得到如图的结果,请补充完整实验步骤。


              ①用胰蛋白酶处理胃癌组织使之分散成单个细胞;

              ②将分散的单个细胞,等量分为甲、乙、丙三组,甲组细胞________,向乙组细胞中导入不携带BAK基因的载体,向丙组细胞导入________;

              ③在相同且适宜的条件下培养5d,统计各组活细胞数,并从分子水平上比较BAK蛋白的含量。

              实验结果:丙组细胞数明显少于甲组和乙组,原因是________。

            • 4.

              为研究K+通道开放剂对缺血、缺氧条件下脑细胞凋亡的保护作用机制,研究人员进行了实验:

              (1)有研究发现,脑细胞代谢非常旺盛,耗氧量大,因此缺血、缺氧时脑细胞主要依赖于_________过程产生ATP,不仅ATP生成量少,也会造成___________在脑细胞中积累。缺血、缺氧还会诱发脑细胞表达出某些___________分子,在这些分子的调控下,细胞出现一系列变化,最终凋亡。

              (2)科研人员利用离体培养的神经元进行实验,处理及结果如下图所示。

              ①本实验乙组的处理是培养液中不加人血淸,并在___________条件下培养。丙、丁组除加入图中所示物质外,其它培养条件与___________(填“甲”或“乙”)组相同。

              ②由实验结果可知,正常培养条件下,随着时间的推移,细胞凋亡率___________。乙组结果与甲组结果比较,说明缺血、缺氧能够___________。由实验结果判断,K+通道开放剂能___________缺血、缺氧诱导的细胞凋亡。

            • 5.

              蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽,具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应。体外研究发现,蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用。请同答:

              (1)在工蜂毒腺细胞的核糖体上,蜂毒素是以                        为模板合成的。

              (2)在适宜的条件下进行体外培养,癌细胞能够                        ,在此过程中细胞内的DNA含量将持续出现周期性的变化。如图表示癌细胞在一定浓度的蜂毒素培养液中培养几小时后,DNA含量不同的细胞数。据此推测,蜂毒素能将癌细胞阻断在有丝分裂的   期。

              (3)研究表明,阻断癌细胞增殖周期可引起细胞凋亡。科研人员为研究蜂毒素对人胃癌细胞的影响及作用机制,进行了以下实验。请完善实验并回答问题。

              ①方法步骤:

              a.取4只相同的培养瓶,编号,分别加入等量的完全培养液并接种等量的离体胃癌细胞。

              b.1号培养瓶为空白对照,向2~4号培养瓶中分别加入       _μg/mL蜂毒素溶液。

              c.培养48 h后,检测并统计                           ,结果如图甲所示。

              d.重复a、b步骤,检测凋亡基因(Bax、Bel-2)的表达,结果如图乙所示。

              ②分析讨论:

              a.图甲表明                          

              b.图甲、图乙表明:                                   

              从基因水平上看,蜂毒素诱导胃癌细胞凋亡与有关。当Bel-2蛋白/Bax蛋白的比值出现       趋势时,将会诱导胃癌细胞凋亡。

            • 6.

              机体的免疫系统对核辐射损伤很敏感,主要表现在核辐射会诱导免疫细胞凋亡。人白细胞介素18(IL—18)能促进免疫细胞的增殖和分化,提高机体免疫功能。某科研小组开展了“(IL—18对核辐射诱导小鼠脾细胞凋亡的影响”的研究:

              选取三只小鼠:①一只无核辐射;②第二只核辐射(60Co照射,下同);③第三只先辐射损伤,1天后注射IL—18。14天后分别取各小鼠脾细胞进行体外培养,在培养了0h、12h、24h、48h后,进行细胞凋亡检测,得到的细胞凋亡相对值如下表:

              组别

              处理方法

              0h

              12h

              24h

              48h

              无核辐射

              0.046

              0.056

              0.048

              0.038

              辐射损伤

              0.460

              0.420

              0.530

              0.520

              辐射损伤+ IL—18

              0.239

              0.265

              0.279

              0.269

              (1)已知IL—18是一种         ,它与          等都属于免疫活性物质。

              (2)细胞凋亡是由遗传机制决定的          死亡。从表中可知,细胞凋亡相对值越小,说明发生凋亡的脾细胞数目越         ;从       (组别)可知,IL—18能够          脾细胞凋亡。

              (3)科研小组还设置了第④组实验,实验方法是先注射IL—18,1天后,进行辐射损伤,14天后的实验操作同前三组。与第③组相比,设置第④组的目的是         

              (4)分析该实验设计,存在的不合理之处          

            • 7. 蜂毒素是工蜂毒腺分泌的多肽,具有抗菌、抗病毒及抗肿瘤等广泛的生物学效应.体外研究发现,蜂毒素对多种癌细胞具有强烈的杀伤作用.其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果:
              实验材料:人肝癌细胞悬液,培养液,二甲亚砜溶液,用二甲亚砜溶液溶解的 2、4、8 μg/mL蜂毒素溶液,培养瓶等.
              实验思路:

              ①________________________________________________________________________________。

              ②____________________________________________________________________________,将这些培养瓶于37℃、5%CO2培养箱中培养;
              ③培养 72h,每 24h 用细胞计数仪检测癌细胞数.
              (1)请完善上述实验步骤中相关内容.
              (2)本实验的自变量是_____________________.

              (3)设对照组癌细胞增殖率为100%,用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率:

              增殖率(%)=[(用药组各时段癌细胞数-用药组开始癌细胞数)/(对照组各时段癌细胞数-对照组开始癌细胞数)]×100。得到如表数据:
                                蜂毒素对人肝癌细胞增殖率的影响%

              组别

              培养时间/h

              24

              48

              72

              对照组

              100

              100

              100

              给药组ug/mL

              2

              78

              62

              48

              4

              68

              26

              21

              8

              48

              12

              5

              ①将表中前48小时的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图。


              ②通过数据和柱形图分析可以得出蜂毒素对人肝癌细胞的作用效果的特点是:______________________________________________________________________________.

              (4)顺铂是一种DNA损伤药物,也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物.若要探究蜂毒素联合顺铂对肝癌细胞生长的影响,应还需设置_____________ 给药组才能得出结论.

            • 8.

              骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一。科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向。实验过程如下:

              步骤1 用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间。

              步骤2 取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~200 ng·mL-1)的培养基继续培养24h。

              步骤3 对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(未染色细胞数/细胞总数×100%),结果如图1。

              步骤4 分别提取TSA浓度为0 ng·mL-1、25 ng·mL-1、50 ng·mL-1处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(BaxBcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2。分析回答:

              (1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是                            。高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是                     ,细胞培养箱中保持5% CO2的作用是                  

              (2)步骤2中,设置0 ng·mL-1 TSA实验的主要目的是                         

              (3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是                                  

              (4)图1所示结果表明                                  

              (5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中          基因过度表达会加速细胞凋亡。

            • 9.

              I.随着肿瘤增长超过了其血管供应,它的内部会缺氧,缺氧能够诱导肿瘤细胞产生一种特异性的转录因子(即能激活特定基因表达的蛋白质—HIF—1),进而促进血管生成。科学家为了探究HIF—1的作用,进行了相关实验,结果如下表,分析并回答问题︰

               

              肿瘤质量(g)

              注射物

              培养9天

              培养21天

              实验鼠

              HIF—1基因缺陷型胚胎干细胞

              0.7

              0.8

              对照鼠

              野生型胚胎干细胞

              1.7

              5.2

              (1)由于肿瘤细胞具有________特点,对营养物质和氧气的需求量较大。在实验过程中可以通过________技术检测HIF—1是否存在,保证实验鼠注入的胚胎干细胞HIF—1基因被成功敲除。

              (2)上表结果表明HIF—1可以________(促进或抑制)肿瘤生长。

              (3)为进一步研究HIF—1作用机理,检测两组鼠血液中血管内皮生长因子(VECF)含量,结果如下表。(注︰VECF是促进血管生成的生长因子)

               

              VECF(p9/ml)

              0天

              4天

              72天

              A组鼠

              25

              25

              50

              100

              B组鼠

              75

              125

              125

              250

              表格中A、B两组鼠中实验组是________组鼠。缺氧情况下,HIF—1可以明显促进________合成,进而促进________生成,增加对肿瘤细胞的快速氧供应,进一步促进肿瘤的生长。

              Ⅱ.目前认为化疗通过多种途径介导细胞凋亡来杀死癌细胞。顺铂是常用的化疗药物,但癌细胞易产生顺铂耐药;双氢青蒿素也具有抗癌作用。为研究双氢青蒿素对顺铂耐药性的影响及其机制,研究者进行了如下实验。

              (1)本实验选用患者的耐顺铂肺腺癌细胞。在________培养箱中进行恒温培养,培养液中除抗生素和一般营养物质外还应含有________,此外培养液中加入一定浓度顺铂,目的是_______________________________________________________________________。

              (2)将上述培养的细胞分为对照组和实验组。实验组用二甲基亚砜溶解的双氢青蒿素处理,对照组的处理应为________,其它条件相同且适宜。24小时后均换为含1μg/ml顺铂的细胞培养液,培养36小时后收集细胞,观察并测定细胞凋亡率,结果如图一。

               

              对照组

              实验组

              抗凋亡蛋白Bcl—2

              135.2

              93.8

              促凋亡蛋白Bax

              82.6

              114.8

              分析图一结果说明________。

              (3)为进一步揭示双氢青蒿素对顺铂耐药性影响的机制,研究者检测了肺腺癌细胞中与凋亡有关的两种蛋白表达量的相对值,结果如图二。分析图二实验结果,推测双氢青蒿素可能通过________(促进或抑制)Bcl—2基因表达和________(促进或抑制)Bax基因表达,从而逆转顺铂耐药。

            • 10.
              为探究生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡是否具有保护作用,研究者提出了以下实验设计思路:
              第一步,进行实验分组:甲组加入培养液+心肌细胞+生理盐水、乙组加入培养液+心肌细胞+阿霉素、丙组加入培养液+心肌细胞+生物制剂Q+阿霉素.每组设置若干个重复样品,每组所加心肌细胞数相同.
              第二步,各组样品在相同且适宜的条件下培养一段时间后,在显微镜下观察记录细胞数.
              第三步,重复第二步若干次,统计计算 ______ (即实验因变量).[填在第(1)小题]请根据以上实验回答问题:
              (1)该实验的因变量是 ______ .
              (2)预测实验结果及结论:
              ①若 ______ ,则生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡具有保护作用.
              ②若 ______ ,则生物制剂Q对阿霉素所导致的心肌细胞凋亡不具保护作用.
              (3)与实验动物相比,采用离体心肌细胞为实验材料,可以避免实验动物的心脏活动受 ______ 调节的干扰.
              (4)上述实验还可以增加一组,加入的物质是 ______ .
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