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            • 1. 在“分解纤维素的微生物的分离”实验中,下列有关选择培养时用液体培养基的目的是(  )
              A.用液体培养基可以使菌体充分利用培养基中的营养
              B.纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长
              C.用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌
              D.用液体培养基可获得大量菌体
            • 2. 利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景.某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行了如下实验.
              实验步骤:
              ①配置以 ______ 为唯一碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是 ______
              ②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间,培养基上出现 ______
              ③将接种针灭菌后,从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种入 ______ (填“固体”、“半固体”或“液体”)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖.
              ④配制与①相同的培养基,并加入少量碘液,用 ______ 法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上.
              ⑤培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小.周围出现 ______ 现象的菌落即为初选菌落,经进一步分裂、纯化后即可达到实验目的.
            • 3. 醋酸菌和纤维素分解菌是工业中常用的微生物.请分析回答下列问题:
              (1)在 ______ 和糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇氧化为 ______ ,进而生成醋酸.
              (2)为了从某细菌样品中筛选出纤维素分解菌,可采用 ______ 染色法进行筛选.如果样品中细菌浓度较低,可以通过 ______ 培养来增加纤维素分解菌的浓度,该过程所用的培养基为 ______ (固体/液体)培养基.为了纯化纤维素分解菌,某同学采用平板划线法进行接种,在做第二次以及其后的划线操作时,应该从上一次划线的 ______ 开始划线.为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在 ______ 附近进行.
              (3)将菌种进行临时保存时,可在低温下使用试管斜面保存,但该方法除保存时间短外,菌种还易 ______ ;若需较长时间保存菌种,可用的方法是 ______
            • 4. 下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述,其中错误的是(  )
              A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
              B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用,需设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作对照
              C.将实验组和对照组平板倒置,25℃恒温培养24-48小时
              D.选择菌落数在30-300之间的实验组平板进行计数
            • 5. 分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是(  )
              A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
              B.富集培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少
              C.经稀释培养后,用刚果红染色
              D.对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上
            • 6. 以下关于分离纤维素分解菌的实验操作错误的是(  )
              A.经选择培养后将样品直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
              B.选择培养这一步可省略,但得到的纤维素分解菌可能会较少
              C.可通过定时测定葡萄糖产量的变化来衡量纤维素分解菌培养液中的纤维素酶产量
              D.可从树林中多年落叶形成的腐殖土中获得纤维素分解菌
            • 7. 分离纤维素分解菌的实验过程中,操作有误的是(  )
              A.经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上
              B.选择培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少
              C.经鉴别培养基培养后加入相应染料进行颜色反应
              D.对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上
            • 8. 纤维素酶能催化纤维素的水解,在植物细胞工程方面有广泛的应用,你认为从下列哪种生物提取纤维素酶较为合理(  )
              A.酿酒酵母
              B.在腐木上生长的霉菌
              C.高等植物细胞
              D.人体内的大肠杆菌
            • 9. 分离分解纤维素的微生物的实验流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑选符合要求的菌落.请回答下列问题.
              (1)“土壤取样”一般选择 ______ 的环境.进行选择培养的目的是 ______
              (2)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将 ______ 分解成 ______
              (3)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)时,CR可与纤维素形成 ______ 色复合物,但不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 ______ .据此可以筛选纤维素分解菌.
              (4)为从土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表):
              酵母膏 无机盐 淀粉 纤维素粉 琼脂 CR溶液
              培养基甲 + + + + - + +
              培养基乙 + + + - + + +
              注:“+”表示有,“-”表示无.
              据表判断,培养基甲 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______ ;培养基乙 ______ (填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 ______
              (5)将样品用 ______ (填“划线法”或“涂布法”)接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上,具体操作都要在 ______ 附近进行.
            • 10. (14分)

              Ⅰ.转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞,进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞,经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内,最终获得转基因克隆猪。请回答:

              (1) 在对猪纤维细胞进行培养时,需要在细胞培养液中添加一定量的           ,以防止培养过程的污染。此外,应定期更换培养液,防止              对细胞自身造成危害。

              (2) 筛选转基因细胞时,需要用到基因表达载体中的               

              (3) 在进行体细胞克隆前,先要从屠宰场收集猪卵巢,采集             ,并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中,再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

              (4) 为了提高重组胚胎的利用率,可对处于           阶段的胚胎进行均等分割,再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地,代孕母猪需要用激素处理,促使其           以利于受孕。

              Ⅱ.土壤中有些细菌含有脲酶,可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验,请回答:

              (1) 分离培养细菌时必须进行无菌操作,包括培养基和各种器皿都必须是无菌的,常用的灭菌方法有              (至少答2种)。

              (2) 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中,要在          旁进行操作,接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

              (3) 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌,若培养基中存在分解尿素的细菌,其菌落周围会出现红色环带,这是由于尿素被分解产生的            使PH升高,使酚红指示剂产生颜色变化,从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大,表明该菌株利用尿素的能力                

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