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            • 1. 天然漆酶在造纸业中常作为漂白助剂使用,但天然漆酶的稳定性较差,在应用环境条件下易失活,某研究小组采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,研究酶热稳定性的变化情况。请分析回答:
              (1)漆酶可以催化木质素的降解,不能催化纤维素的降解,这表明酶具有                         

              (2)下图1表示不同温度下漆酶对纸浆中两种染料的漂白效果的差异,漂白效果最适的温度是          ,   60℃时两条曲线重合的原因是            


              (3)采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,实验如下:

              步骤

              A

              B

              C

              D

              天然漆酶

              Pa修饰酶

              SA修饰酶

              Ma修饰酶

              1

              加酶液

              0.5mL

              0.5mL

              0.5mL

              0.5mL

              2

              加缓冲液

              lmL

              lmL

              lmL

              lmL

              3

              加底物

              lmL

              lmL

              lmL

              lmL

              4

              条件控制

              分别置于50℃的水浴中,每隔lh取样,冰浴冷却 至0℃后,测定酶活力(天然漆酶活力记为100%)。

              步骤2中加缓冲液的目的是                          ,步骤4中冰浴的目的是                      实验结果如上图2所示,可以看出:50℃条件下,三种化学修饰                         (填“都能提高”或“都不能提高”或“部分提高”)酶的热稳定性。

              (4)根据上述实验分析,酶制剂                   (填“能”或“不能”)在最适温度下长期保存,原因是:                                        

            • 2.

              工业生产果汁时,常常利用果胶酶破除果肉细胞的细胞壁以提高出汁率。为研究温度对果胶酶活性的影响,某学生设计了如下图所示的实验:


              ①将果胶酶与苹果泥分装于不同的试管,在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图A)。

              ②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合再次在10 ℃水浴中恒温处理10 min(如图B)。

              ③将步骤②处理后的混合物过滤,收集滤液,测量果汁量(如图C)。

              ④在不同温度条件下重复以上实验步骤,并记录果汁量,结果如下表:

              温度/℃

              10

              20

              30

              40

              50

              60

              70

              80

              果汁量/mL

              8

              13

              15

              25

              15

              12

              11

              10

              根据上述实验,请分析并回答下列问题:

              (1)果胶酶能破除细胞壁,是因为果胶酶可以促进细胞壁中_________的水解。

              (2)实验步骤①的目的是_______________________________。

              (3)实验步骤中要有玻璃棒搅拌的操作,其目的是使__________,以减少实验误差。

              (4)实验结果表明,在上述8组实验中,当温度为________时果汁量最多,此时果胶酶的活性________。当温度再升高时,果汁量降低,说明________________。

              (5)能不能确定该温度就是果胶酶的最适温度?如果不能,请设计出进一步探究果胶酶的最适温度的实验方案:______________________________________。

            • 3.

              天然漆酶在造纸业中常作为漂白助剂使用,但天然漆酶的稳定性较差,在应用环境条件下易失活,某研究小组采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,研究酶热稳定性的变化情况。请分析回答:

              (1) 漆酶可以催化木质素的降解,不能催化纤维素的降解,这表明酶具有____。 

              (2) 下图1表示不同温度下漆酶对纸浆中两种染料的漂白效果的差异,漂白效果最适的温度是___,60 ℃时两条曲线重合的原因是___________________。 

              图1图2


              (3) 采用PA、SA、MA三种化学试剂对天然漆酶进行修饰,实验如下:

                    分组

              步骤      

              A

              B

              C

              D

              天然漆酶

              PA修饰酶

              SA修饰酶

              MA修饰酶

              1

              加酶液

              0.5 mL

              0.5 mL

              0.5 mL

              0.5 mL

              2

              加缓冲液

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              3

              加底物

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              1 mL

              4

              条件控制

              分别置于50 ℃的水浴中,每隔1 h取样,冰浴冷却至0 ℃后,测定酶活力(天然漆酶活力记为100%)


              步骤2中加缓冲液的目的是_________,步骤4中冰浴的目的是__________。 

              实验结果如上图2所示,可以看出:50 ℃条件下,三种化学修饰______(选填“都能提高”“都不能提高”或“部分提高”)酶的热稳定性。 

              (4) 根据上述实验分析,酶制剂____(选填“能”或“不能”)在最适温度下长期保存,原因是___________________。 

            • 4.
              已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶.脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产.回答有关问题:
              (1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用 ______ 染色.微生物A产生的油脂不易挥发,可选用 ______ (填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取.
              (2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以 ______ 为碳源的固体培养基进行培养.从功能上划分该培养基属于 ______ 培养基
              (3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用 ______ 直接计数;若要测定其活菌数量,可选用 ______ 法进行计数.
              (4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中, ______ ℃条件下该酶活力最小.为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕 ______ ℃设计后续实验.
            • 5.
              如图表示利用“果胶酶-酵母菌联合固定凝胶珠”生产红葡萄酒的部分过程,请问答下列问题.

              (1)海荡酸钠能作为固定裁体的特点是 ______ ,在联合固定果胶酶和酵母菌之前,对海藻酸钠所作的操作是 ______ .
              (2)果胶酶在果汁生产中具有重要的作用,把果胶酶和酵母菌固定在一起生产红葡萄酒的重要意义在于 ______ .
              (3)果胶酶通常先与戊二醛交联,然后与活化的酵母菌一起用海藻酸钠包埋固定,这是因为 ______ .
              (4)在初级发酵时一般温度控制在 ______ ,在发酵过程中,尤其要随时监控和调整发酵罐中的温度和pH,使其在适宜的范围内波动,其主要目的是 ______ .
            • 6.
              嗜热土壤芽胞杆菌产生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一种耐热纤维素酶,为使其在工业生产中更好地应用,开展了以下试验:
              Ⅰ.利用大肠杆菌表达BglB酶
              (1)PCR扩增bglB基因时,选用 ______ 基因组DNA作模板.
              (2)图1为质粒限制酶酶切图谱.bglB基因不含图中限制酶识别序列.为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的bglB基因两端需分别引入 ______ 和 ______ 不同限制酶的识别序列.
              (3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为 ______ .
              Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响

              (4)据图2、3可知,80℃保温30分钟后,BglB酶会 ______ ;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在 ______ (单选).
              A.50℃B.60℃C.70℃D.80℃
              Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性
              在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率.经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因.
              (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中 ______ (多选).
              A.仅针对bglB基因进行诱变     B.bglB基因产生了定向突变
              C.bglB基因可快速累积突变    D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变.
            • 7.
              某科研小组开展紫外线诱变选育脂肪酶高产菌株的研究.原始菌株1444粗壮假丝酵母经连续两次紫外线诱变,反复筛选,得到的突变株Z6和Z8.在40℃、pH 7.5条件下测定所产脂肪酶活性,分别比原始菌株提高了l26%、150%.回答下列问题:
              (1)由于突变是不定向,突变导致脂肪酶活性变化的可能结果有 ______ .
              (2)科研人员对上述三个菌株所产生的脂肪酶特性进行研究,获如下结果

              实验一:为测定脂肪酶在不同pH值条件下的稳定性,科研人员分别取上述三种菌株所产的酶液各20mL,分别与等体积的pH5~9的缓冲液混匀,置于4℃冰箱保存24小时后,将pH调至7.5,再加入等量的底物溶液,测定酶的相对活性.结果如图,与原始菌株1 444相比,z6和z8的酶在不同pH条件下的 ______ .测定酶的活性的实验温度为 ______ ℃.
              (3)实验二:分别取上述三种菌株的酶液各20ml,置于50℃恒温水浴处理60min,每隔10min取样一次,测定酶活性,同时测定三个对照组的酶活性并进行比较.本实验目的是 ______ ,对照组所用的酶液应如何处理? ______ .
            • 8.
              为了比较甲、乙、丙三种微生物所产生的淀粉酶的活性,某生物兴趣小组以三种微生物提取液(提取液中淀粉酶浓度相同)为材料进行了如下实验:
              试管1 试管2 试管3 试管4
              实验操作 蒸馏水(mL 2 2 2 A
              pH=8缓冲液 0.5 0.5 0.5 0.5
              淀粉溶液(mL) 1 1 B 1
              甲生物提取液(mL) C
              乙生物提取液(mL) D
              丙生物提取液(mL) E
              37℃的水浴,保温1小时
              总体积(mL) 3.8 3.8 3.8 3.8
              滴加等量的碘液
              实验结果 颜色深浅程度 ++ - + F
              注:“+”显色,“+”越多显色越深;“-”不显色
              (1)F的颜色深浅程度为 ______ (用“+”或“-”表示).
              (2)该实验的自变量是 ______ ;温度属于无关变量,保持相同即可,该说法是 ______ (填“对”、“错”)的.
              (3)生物体内酶的化学本质是 ______ ,其特性有 ______ 、 ______ .
            • 9.

              研究酶的化学性质和作用机理,有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践。 请回答下列问题:

              (1)甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是          

              (2)在实际生产中,固定化细胞技术实质上固定的是         。制备固定化酵母细胞时,常用的方法是下图2中[  ]         (填数字序号及名称)。




              (3)在生活实践中,酶制剂在洗衣粉中被广泛应用。某研究性学习小组为探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最适温度,设计了如下装置进行实验,并将结果用曲线图A、B表示(如图3)。


              ①使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为                

              ②在0℃和75℃时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45℃时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为                                    

              (4)在现代生物工程中,可用酶在体外处理“蛋白质-DNA复合体”以获得包裹在蛋白质中的DNA片段信息,过程如图4所示。


              ①a、b过程中,酶作用的部位依次是                         

              ②若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增,与细胞内的DNA复制过程相比,利用PCR技术扩增DNA时所需酶的不同之处是                                          

            • 10. 我国食品加工企业每年都会产生大量高浓度有机废水,如直接排放会造成严重污染.固定化酶技术可应用于高浓度有机废水的处理,科研人员对固定化蛋白酶进行了以下实验研究.
              实验一:研究人员选择了硅胶、活性炭和大孔树脂为载体制备固定化蛋白酶,三种载体的固定化率如图1所示.
              实验二:为探究pH对三种载体固定化酶活性的影响.研究人员将高浓度污水的pH值分别调至4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0,各取500ml.分别使其与等量不同载体的固定化酶混合,然后在37℃的水浴中反应6小时.测定每个反应器中氨基酸的生成速率.测定结果如图2所示.据图回答下列问题:

              (1)由图1可知,三种载体蛋白酶固定化率最低的是______.与水溶性酶相比,固定化酶处理高浓度污水的优点是______.
              (2)实验二的自变量是______,无关变量是______.(至少写两点)
              (3)从图2中可得出的结论:______;______.
              (4)结合图1和图2分析,进行高浓度污水的净化时应选择______载体的固定化酶.
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