酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用.蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取.为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表.请回答有关问题.
试管编号 项目 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ | V | Ⅵ |
蒸馏水(mL) | 2 | O | 1 | 1 | 1 | 1 |
缓冲液(mL) | 0 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
果胶酶液(mL) | O | 0 | O | 0.5 | O | 0 |
蜗牛酶液(mL) | O | 0 | O | O | 0.5 | 0 |
纤维素酶液(mL) | 0 | O | 0 | O | 0 | 0.5 |
实验结果 (绿色深浅程度) | - | - | - | +++ | ++++ | ++ |
(注:“+”越多表示绿色越深,“一”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ______ ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅.
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 ______ 等多种酶.该实验中 ______ 是空白对照组,其设置意义是 ______ .
(3)用网筛过滤原生质体到离心管内,离心后收集沉淀物,并用 ______ 洗涤.
(4)原生质体是否符合要求还需进行检验,其检验的方法是 ______ .