（一）回答与果酒、果醋制作有关的问题。

（1）在酿酒过程中，酵母菌只有在无氧条件下才能进行__________。发酵开始时，发酵瓶内看不到气泡冒出的原因可能是酵母菌的________使发酵瓶内出现负压。

（2）下列各项中，与果酒中的酒精浓度有关的是 ____________________（多选）。

A.发酵时间                                     B.发酵温度

C.培养液中糖的含量                  D.酵母菌对酒精浓度的耐受程度

（3）不同地域所酿制的葡萄酒风味会有一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土壤、气候等地理环境因素和葡萄品种有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的_____________________等生物因素有关。

（4）在利用果酒制作果醋过程中，如果已获得醋化醋杆菌菌种，可先在液体培养基中进行·              培养，然后接种到发酵瓶中。发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂棉球，其作用是_______________。开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的_____________________。

（二）毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIF-Ⅱ）基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转 KIF-Ⅱ 基因的高绒质绒山羊的简单流程如图：

（1）转基因过程用到的工具酶有___________和_______________________。

（2）在过程②中，用_________________处理将皮肤租住分散成单个成纤维细胞。由于人们对动 物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的 __________________________ ，在培养过程中，应将培养瓶置于_____________________中培养。

（3）要获得多只相同的转基因山羊， 可对图中早期胚胎进行___________后进行胚胎移植。

（4）下列有关基因工程的叙述，正确的是______________________  。

A.切割目的基因和载体DNA 时为获得相同的粘性末端，必须用相同的核酸内切酶

B.基因工程的原理是基因重组，其核心是上图中的过程④

C.图示过程获得的转基因绒山羊并不是克隆动物

D.重组表达载体上含有 RNA 聚合酶的识别位点

（1）生产用菌种一般选用快速增殖阶段的菌体，由表中数据分析，第         天的酵母菌最适宜用于固定化。与固定化酶相比，固定化细胞的突出优点是          。

（2）配制海藻酸钠溶液过程中，溶解海藻酸钠时应         加热。若海藻酸钠溶液浓度适宜，操作过程规范，但制作的凝胶珠颜色偏浅，则原因可能是          。

（3）用图1装置先制作果酒，然后制作果醋，葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，其目的是         。根据图2曲线判断，接种醋酸菌在          时刻（填写图中字母）。

（4）与酒精发酵相比，醋酸发酵需要改变的条件是          。

（5）若将图2纵坐标改为发酵瓶中酒精量的变化，请在答题纸相应位置画出发酵瓶中酒精量随时间变化的曲线。

酵母菌是来源于自然界的菌种，它种类繁多、分布很广、繁殖极快。如何筛选、纯化、诱导对葡萄酒发酵有利的酵母菌种，是酿酒师们长期研究的课题。

（1）像其他微生物一样，酵母需要适当的营养和合适的环境条件，培养时培养液中的营养物质主要有 _____________________________________等。(要求回答4种营养物质)

（2）从含有酵母菌、醋酸菌、蓝藻的培养液中分离出酵母菌，最简单的培养方法是：在 _____________并且 _______________条件下进行培养．

（4）葡萄酒制作是否成功，发酵后需用 _______________________来鉴定，在 ____________条件下，该物质与酒精反应呈现 ____________色。

（5）当酵母繁殖时，没有糖转化为酒精，此时酵母菌为 ________________呼吸．

I.[生物一选修1:生物技术实践]

酵母菌是生物科学研穷中一种重要的生物材料，请回答：

（1）酵母菌的新陈代谢类型是__________，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于__________。

（2）某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒、为验证发酵液中含有酒精，取2mL发酵液加入试管中，滴加O.5mL浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻震荡，观察到溶液变__________色，则证明发酵液中含酒精。

（3）研究者利用基因工程技术改造酵母菌，得到如下四种变异菌株：①菌株Ⅰ——不能合成纤维素酶，菌株Ⅱ——合成的纤维素酶不能分泌到细胞外，菌株Ⅲ——合成的纤维素酶能分泌到细胞外，菌株Ⅳ——合成的纤维素酶分泌并固定于细胞壁。

在以纤维素为唯一碳源的培莽基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_______，若在培养基中加入_______，则菌落周围会出现透明圈。在利用纤维素生产酒精时，与菌株Ⅲ相比，菌株Ⅳ的纤维素酶的利用率高，因为______________________________________________________________。

（4）为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了，那么判断取样顺序的主要依据基__________（填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”）。

II.[生物一选修3:现代生物科技专题]

内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物，由胶原XⅤⅢ（广泛存在于肝脏等组织中）降解产生。我国科学家研制成含转入内皮抑素基因双歧杆菌的口服液，口服后，双歧杆菌在肠道定植、繁殖，双歧杆菌死亡裂解后，其产生的内皮抑素活性片段被吞噬、转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题：

（1）要利用逆转录的方法合成人内皮抑素基因，应从__________组织细胞中提取mRNA，与细胞中内皮抑素基因相比，这种方法合成的cDNA没有__________、启动子、终止子等。

（2）根据内皮抑素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物，利用__________技术得到大量内皮抑素基因。

（3）临床上也有通过静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，使肿瘤生长受到抑制。在进入临床使用前需要进行目的基因的检测与鉴定：用胰蛋白酶将血管内皮组织___________，制成细胞悬液→转入

含_____________________等天然成分的培养液中培养得到大量血管内皮细胞→用重组腺病毒感染血管内皮细胞，若抗原—抗体杂交检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明_________________。

（4）口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液、静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒，两种方法都能使肿瘤生长受到抑制，其中属于体内基因治疗的是__________（填“第一种”或“第二种”）。

请回答下列问题：

（1）果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌的代谢类型是________；多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是________，泡菜的制作离不开________；

（2）醋酸菌发酵过程，当缺少糖源时，醋酸菌将________变成________，再将其变为________；

（3）在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是________；

（4）在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的________将尿素分解成了________，从而使培养基碱性增强。

（5）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成________色复合物，用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌对，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________，这种培养基属于________（填“选择”或“鉴别”）培养基。

请完成与传统发酵技术有关的问题：

（1）为什么制作泡菜的时候，要在泡菜坛盖边沿的水槽中注满水？因为坛内进行发酵的主要微生物是_________________，其发酵需要________________环境，在这种条件下，它们能将______________分解成__________________。

（2）测定泡菜中的亚硝酸盐含量的原理是，在____________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________________________色染料，将显色样品与__________________________比较，找出________________________________________，估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

（3）当氧气、糖源都_______________时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将__________________转变成____________________，最后再转变成醋酸。

A.某生物兴趣小组积极参加当地盛产苹果的乡镇生产苹果酒、苹果醋的调研项目。下面是他们调查之后发现的一系列问题，请帮助回答：

（1）制备高产果酒的酵母菌菌株：

①在秋季的葡萄园中，在________的周围土壤中酵母菌大量生长繁殖。

②为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用________倍稀释，用________法接种上述所得酵母菌稀释液。

③在________的发酵液中，酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。

（2）苹果酒、苹果醋的生产：

①小组同学在制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应________。

A．一直打开

B．打开并盖上一层纱布

C．定时拧松

D．始终拧紧

②苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变________进行，其发酵温度应________（填“低于”或“高于”）苹果酒的生产。

③在果醋的制作中，提供碳源的物质主要是________。

B．胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，也可以作为食用色素。请回答下列问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，在干燥过程中要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液在浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，所用的培养基一般含________等成分，有氧及温度为________左右条件最适合该酵母菌生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的________。

（4）所获得的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照材料为________。

近年来，纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品．请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时，醋酸菌在糖源不充足时，利用酒精生成醋酸，请写出该过程的化学反应式：____________________。

（2）腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时，应注意控制__________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在_______ %左右。

（3）制作泡菜的原理是_______________________。蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_______反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成_______色染料。