[生物——选修3：现代生物科技专题]

 HIV属于逆转录病毒，是艾滋病的病原体。回答下列问题：

⑴用基因工程方法制备HIV的某蛋白(目的蛋白)时，可先提取HIV中的       ，以其作为模板，在       的作用下合成       。获取该目的蛋白的基因，构建重组表达载体，随后导入受体细胞。

⑵从受体细胞中分离纯化出目的蛋白，该蛋白作为抗原注入机体后，刺激机体产生的可与此蛋白结合的相应分泌蛋白是       。该分泌蛋白可用于检测受试者血清中的HIV，检测的原理是       。

⑶已知某种菌导致的肺炎在健康人群中罕见，但是在艾滋病患者中却多发。引起这种现象的根本原因是HIV主要感染和破坏了患者的部分_______________细胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。

⑷人的免疫系统有       癌细胞的功能，艾滋病患者由于免疫功能缺陷，易发生恶性肿瘤。

回答下列关于微生物的问题。

1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌，具有强的脲酶活性，是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因。

  A.为古细菌，因为其能生活在酸性环境下

  B.储存其遗传物质的主要场所是拟核，该菌含有质粒，可以为基因工程提供载体

  C.该菌合成和加工脲酶所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等

  D.该菌对青霉素、利福平敏感  

 下表是某培养基的配方：

 A.空气传播     B.接触传播     C.媒介物传播     D.病媒传播

[生物——选修1：生物技术实践]

将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用________法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取，人体不能直接合成。科学家通过转基因手段将ω－6脂肪酸脱氢酶基因（FAT1）整合到肉牛基因组，以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量，促进人体健康。请回答下列问题：

（1）将ω－6脂肪酸脱氧酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是________，在用PCR技术扩增目的基因时，需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、________和________。

（2）体外受精获得受精卵时，将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是________。

（3）胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的________（填胚胎发育时期）进行________，以实现同卵多胎。

（4）该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖，用核移植的方法得到的动物称为________，用于核移植的供体细胞一般选择10代以内的细胞，目的是保持细胞正常的________。

[生物——选修1：生物技术实践]

石油是一种重要原料，但海洋石油开发中经常由于泄漏对海洋造成污染，自然环境中有一类叫作假单孢杆菌的细菌能够分解石油，图为分离和纯化假单孢杆菌的实验过程。

回答下列问题：

（1）图中②过程的目的是________，③过程培养出的是________。

（2）上述实验中，不需要进行灭菌处理的是________，培养基灭菌的常用方法为________。

（3）③→④的接种可选用________法，通过培养能获得________。此菌种细胞呼吸的类型是________。获得假单孢杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用________培养基。

（4）与酵母菌相比，假单孢杆菌在细胞结构方面最大的区别是________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

我国是糖尿病多发国家之一，对糖尿病的治疗多采用注射人胰岛素的方法。大肠杆菌是名副其实的生产胰岛素的“活工厂”。回答下列问题：

（1）制备人胰岛素，首先要获取目的基因，用________法获取的胰岛素基因没有________。

（2）如图表示人胰岛素基因及重组质粒构建过程，用BamHⅠ对胰岛素基因和质粒切割，质粒的酶切片段用去磷酸化酶或加尾处理，都可以防止________。

（3）利用双酶切（如BamHⅠ和HindⅢ）除了可以防止上述现象的发生，还可以避免________。酶切不能使用的酶是________，原因是________。

（4）双酶切后筛选出目的基因，形成的重组质粒导入大肠杆菌时，要处理大肠杆菌，使之成为________。检测导入成功后培养大肠杆菌即可。

Ⅰ．转基因克隆猪已在我国培育成功。研究组首先从猪胚胎皮肤细胞中分离出纤维细胞，进行体外培养。通过电穿孔的方法将构建好的基因表达载体转入纤维细胞，经筛选后将转基因纤维细胞进行体细胞克隆，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫内，最终获得转基因克隆猪。请回答：

（1） 在对猪纤维细胞进行培养时，需要在细胞培养液中添加一定量的           ，以防止培养过程的污染。此外，应定期更换培养液，防止              对细胞自身造成危害。

（2） 筛选转基因细胞时，需要用到基因表达载体中的                。

（3） 在进行体细胞克隆前，先要从屠宰场收集猪卵巢，采集             ，并在体外培养成熟。然后将转基因纤维细胞核注入           中，再经过一系列过程获得含有目的基因的重组胚胎。

（4） 为了提高重组胚胎的利用率，可对处于           阶段的胚胎进行均等分割，再将重组胚胎移入代孕母猪子宫中继续发育成转基因克隆猪。一般地，代孕母猪需要用激素处理，促使其           以利于受孕。

Ⅱ．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答：

（1） 分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有              （至少答2种）。

（2） 可用                法分离纯化得到能降解尿素的菌种。在接种活菌的过程中，要在          旁进行操作，接种后的培养皿            于37℃的            中培养。

（3） 用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，若培养基中存在分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的            使PH升高，使酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力                 。