逆转录病毒载体是目前应用较多的动物基因工程载体之一。运用逆转录病毒载体可以将外源基因插入到受体细胞染色体，使外源基因随染色体DNA一起复制和表达。研究发现逆转录病毒基因组(RNA)的核心部分包括三个基因：gag基因(编码病毒的核心蛋白)、pol基因(编码逆转录酶)、env基因(编码病毒的表面糖蛋白)。位于这些基因的两端有LTR序列(含有启动子、调节基因等)，控制着逆转录基因组核心基因的表达及转移。下图是构建逆转录病毒载体及用于培育转基因小鼠的过程。回答下列问题：

 (1)催化过程①的酶是      。

 (2)过程②的工具酶有        和       。过程②中，外源基因一定要插入到病毒DNA的LTR序列中的启动子后，其主要目的是       。

  (3)过程③中，导入病毒蛋白编码基因(gag,pol和env)的目的是       。

 (4)过程④中，逆转录病毒载体感染的细胞一般选择内细胞团细胞，因为这类细胞能      。此 时，早期胚胎处于      期。

  (5)在胚胎移植前，需要对代孕母鼠进行        处理，使其生殖器官(子宫)适于早期胚胎的植入和正常发育。

 (6)研究中必须对嵌合小鼠进行筛选，只有能产生     的嵌合小鼠才能将获得的新性状遗传给子代。

如图是从酵母菌中获取某植物需要的某种酶的基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题：

（1）图中cDNA文库         基因组文库（选填“大于”或“等于”或“小于”）。

（2）①过程提取的DNA需要         的切割。

（3）为在短时间内大量获得目的基因，可用的技术是       ，其原理是                。该反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg²⁺）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。

（4）目的基因获取之后，需要进行基因表达载体的构建，基因表达载体的组成必须有_________             及标记基因等，此步骤是基因工程的核心。

（5）将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是           ，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是            ，可以用                技术进行检测。

科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图。

请回答：

（1）步骤①中，卵母细胞应培养到    期。

（2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其    分离出ES细胞。ES细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上，表现为    ；在功能上，具有    。

（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的基因表达载体。基因表达载体的组成除了目的基因外，还必须有    等。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取     作为引物。用下图所示的质粒作运载体时，对干扰素基因片段和质粒进行酶切，可选用限制酶的组合为    或   。

为获得纯合高蔓抗病番茄植株，采用了如图所示的方法．图中两对相对性状独立遗传，高蔓（A）、感病（B）是显性性状．

据图分析回答：

（1）过程①表示的育种方式是________________，F₁自交获得的F₂中，高蔓抗病植株中纯合子占_________。

（2）过程②表示的育种方式是___________，其原理是___________，可以取任一植株的适宜花药作培养材料，培养得到的单倍体基因型有__________________种；用_______________________处理，使染色体数目加倍。

（3）过程③表示的育种方式是_________________________，请列举这个过程中用到的两种酶_______________________、_______________________________；将叶肉细胞培育成转基因植株的过程体现了细胞的____________________性。

（4）过程④表示的育种方式是_________________，该育种方法的原理是______

（1）根据家族病史，该病的遗传方式是                          ；母亲的基因型是         （用A、a表示）；若弟弟与人群中表现型正常的女性结婚，其子女患该病的概率为       （假设人群中致病基因频率为1/10，结果用分数表示）。

（2）检测发现，正常人体中的一种多肽链（由146个氨基酸组成）在患者体内为仅含45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是                  ，由此导致正常mRNA第         位密码子变为终止密码子。

（3）分子杂交技术可用于基因诊断，其基本过程是用标记的DNA单链探针与             进行杂交。若一种探针只能直接检测一种基因，对上述疾病进行产前基因诊断时，则需

要     种探针。若改致病基因转录的mRNA分子为“…ACUUAG…”，则基因探针序列为                  ；为制备大量探针，可利用            技术。

(1)基因工程的核心步骤是                          ；构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶                          分别对含Ppc基因的DNA和质粒进行切割，再用             使其连接。构建的表达载体A除含有目的基因、标记基因外，还应有                              。

(2)欲在体外获得大量的Ppc基因，常采用          技术扩增，其中所用的酶的特点是                              。

(3)水稻组织细胞具有                   ，因此，可以利用

                          技术将导入Ppc基因的水稻组织细胞培养成植株。

（1）该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于______。

（2）从大麦细胞中可直接分离获得LTP1基因，还可采用__________方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是_________。

 （3）要使运载体与LTP1基因连接，首先要进行切割。假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为  则能与该运载体连接的LTP1基因分子末端是_______。

（4）切割完成后，将运载体与LTP1基因连接，连接后得到的DNA分子称为______。

（5）此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是___________。