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            • 1． 植酸酶能提高饲料中磷的利用率，减少磷随畜禽粪便排出量，进而降低环境污染． 科学家试图将黑曲霉植酸酶基因（phyA）转入猪细胞中，以培育出转植酸酶基因猪．如图为实验过程中基因表达载体的构建过程，图中A、A1，B、B1表示引物，NheⅠ（G↓CTAGC），XhoⅠ（G↓TCGAG）为限制酶．请问答．

              （1）实验室通用是利用从黑曲霉细胞中提取的RNA，再通过 ______ 等技术形成 phyA对应的cDNA，从基因结构分析，这一cDNA比黑曲霉细胞中的phyA少 ______ 等结构．
              （2）由图可知，科学家首先将黑曲霉植酸酶基因phyA与猪腮腺分泌蛋白基因信号肽基因 （ps）拼接在一起，其目的是 ______ ．实验室中，过程②（解链）一般可通过 ______ 的方法完成，利用 ______ 将这两个DNA片段连接起来．
              （3）限制酶X ho I切割DNA形成的黏性末端可以表示为 ______ ．过程④中同时利用Nhe I酶和Xho I酶处理目的基因和运载体，其主要优点是 ______ ．
              （4）研究中需要将重组质粒导入 ______ ，再运用胚胎工程技术培育获得转基因猪，选取这类细胞作为目的基因的受体细胞的主要依据是 ______ ．
              难度：较易
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            • 2． 如图为某转基因小鼠培育过程示意图，①～⑥表示相关过程．请回答：

              （1）过程①注射的A物质是 ______ ，目的是使供体母鼠 ______ ．
              （2）过程③把目的基因和运载体连接需要在 ______  的催化下完成，过程④常用的方法是 ______ ．
              （3）取自公鼠附睾中的精子需放入人工配置的 ______  中培养一段时间后，才可进行体外受精．
              （4）图中过程⑥称为 ______ ，为使代孕母鼠与供体母鼠生殖器官的生理变化相同，此前需对代孕母鼠作 ______  处理．
              （5）蛋白质水平检测目的基因的表达通常采用的方法是 ______ ．采用胚胎分割移植的方法可获得较多基因组成相同的转基因小鼠，操作时需选择发育到 ______
              或囊胚期的胚胎进行．若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意是 ______ ．
              （6）若通过上述操作获得的蛋白质，不完全符合人类的需要，则需要通过 ______ 或基因合成，对现有蛋白质进行改造．
              难度：中等
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            • 3． 如表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的而不重复标注．请回答下列问题．
              限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
              识别序列及切割位点

              （1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用限制酶为 ______ ，酶切后的载体和目的基因片段通过 ______ 酶作用后获得重组质粒．
              （2）若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端可直接被DNA连接酶连接，原因是 ______ ，这两种酶 ______ （选填“都能”“都不能”或“只有一种能”）切开连接的部位，原因是 ______ ．
              （3）若用Sau3AⅠ切图1质粒最多可能获得 ______ 种大小不同的DNA片段．
              （4）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加 ______ ，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2中 ______ ．
              难度：较易
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            • 4． 科学家利用基因工程技术将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高．在培养转基因番茄的过程中，下列操作不合理的是（　　）
              A．可用PCR技术或逆转录法获得抗冻蛋白基因
              B．利用选择性培养基对构建的基因表达载体直接筛选
              C．利用农杆菌转化法将基因表达载体导入番茄体细胞
              D．在低温条件下筛选已导入抗冻蛋白基因的番茄植株
              难度：较易
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            • 5． 预防乙肝最有效的途径是接种疫苗．将乙肝表面抗原基因转移到植物细胞内可生产乙肝疫苗．回答下列问题．
              （1）欲在短时间内大量扩增乙肝表面抗原基因．通过 ______ （填写中文名称）技术，其原理是 ______ ，利用该技术扩增乙肝表面抗原基因的前提是 ______ ．
              （2）将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，此外采用 ______ 法十分简便经济．用抗原--抗体杂交技术检测植物细胞是否成功合成乙肝表面抗原蛋白，若有 ______ 出现，表明目的基因已形成蛋白质产品．
              （3）将乙肝表面抗原基因导入植物细胞后，采用 ______ 技术获得愈伤组织，该技术需在 ______ 条件下进行．
              （4）乙肝疫苗在2～8℃条件下保存，其不宜在常温下保存最可能的原因 ______ ．
              难度：较易
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            • 6． 2014年埃博拉病在非洲蔓延，我国派出医疗队首次在境外组建医院，帮助非洲防控埃博拉疫情．
              （1）研究表明，埃博拉病毒侵入机体后，通过靶向感染，破坏吞噬细胞等，使其不能暴露该病毒的 ______ ，以致感染信息不能呈递给 ______ ，从而无法正常激活细胞免疫和体液免疫应答过程，导致机体对该病毒的 ______ 免疫功能下降．因此，病毒在体内快速增殖、致病．
              （2）用大肠杆菌生产埃博拉病毒的某蛋白（目的蛋白）时，因埃博拉病毒不是逆转录病毒，可先将埃博拉病毒的RNA与逆转率病毒的RNA重组，在 ______ 的作用下合成 ______ ．再用 ______  切取该目的蛋白的基因，与质粒构建 ______ ，同时用 ______ 处理大肠杆菌使其成为感受态细胞．
              （3）用埃博拉病毒的某种蛋白免疫小鼠，通过 ______ 技术获得杂交瘤细胞，用于生产单克隆抗体治疗该病．单克隆抗体的优点是 ______ ．
              难度：较易
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            • 7． 如图为吉林大学农学部培育出世界首例赖氨酸转基因克隆奶牛“织女”的大致过程，请回答：

              （1）实施基因工程的核心操作步骤是 ______ ，实现②过程的常用方法是 ______ ．
              （2）获得黑白花奶牛成纤维细胞后，利用 ______ 技术扩增细胞，培养液中除了提供必要的营养物质之外，还需要添加 ______ 等天然成分．
              （3）获得重组细胞④时，以去核卵细胞为受体细胞的原因是 ______ ．
              （4）将早期胚胎移入代孕母牛体内之前，需要对代孕母牛进行 ______ 处理，目的是 ______ ．
              （5）要通过⑤过程获得较多的遗传同质早期胚胎，应采用 ______ 技术，操作时应选择发育至 ______ 期的胚胎，并将内细胞团 ______ ．“织女”牛⑦进入泌乳期后，可以通过分泌乳汁来生产人类所需的赖氨酸，因而称为 ______ ．
              难度：中等
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            • 8． 筛选是生物工程技术中的一个重要环节．下列关于生物工程对所需要的对象进行筛选叙述中，错误的是（　　）
              A．基因工程中，依标记基因对工程菌进行筛选
              B．遗传育种中，利用病菌侵染法，对所育植物品种的抗病性进行筛选
              C．单克隆抗体制备过程中，最后大量抗体产生后还要经过筛选提纯才能得到纯净的单克隆抗体
              D．细胞工程中，利用双亲细胞的特性筛选出杂种细胞
              难度：较易
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            • 9． 以下是在现代生物工程中运用的有关操作技术，其中叙述正确的是（　　）
              A．在基因工程中检测目的基因是否翻译成蛋白质，可选用含标记的目的基因探针进行分子杂交
              B．植物体细胞杂交，能克服远缘杂交不亲和的障碍，培育出的新品种一定不是单倍体
              C．试管苗、试管牛和克隆羊都属于无性生殖且能保持母本性状
              D．胚胎移植中的冲卵是指选择特定的装置将卵子冲出
              难度：较易
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            • 10． “筛选”是很多生物试验过程中的重要环节．下列各项中不需要经过“筛选”的是（　　）
              A．基因工程育种中导入目的基因的受体细胞
              B．单倍体育种中接种到培养基上进行离体培养的F1的花药（花粉）
              C．在植物组织培养中，突变体的利用
              D．制备单克隆抗体时经过诱导融合的杂交细胞
              难度：较易
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