(1) 基因表达载体的组成中，除目的基因和标记基因外，还有              。
(2) 将目的基因导人动物细胞采用最多的是              法。将目的基因导入植物细胞运用最多的是               法。

(3)检测目的基因是否发挥功能作用的第一步是检测                     。直接向人体组织细胞中转移基因的治病方式叫               。

(4) 转基因生物快速发展引发公众的不安，主要体现在食物安全、生物安全和环境安全等三个方面，其中食物安全主要是担心转基因生物会产生出过敏蛋白或           。

(5)基因工程只能生产自然界已存在的蛋白质，蛋白质工程虽能生产自然界不存在的新蛋白质，但最终还须通过改造基因来实现，原因是 ​                               。
(6) 受精时，卵子在精子触及        的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，它是阻止其他精子入卵受精的第一道屏障；除此以外的另一道屏障是         。

下图表示利用现代生物技术生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有____________、______________和蛋白质工程。

(2)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原因是____________________________。

(3)图中A、B分别表示___________________________、___________________。

(4)为提高培育成功率，进行②过程之前，对受体动物的处理是用______________进行同期发情处理，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行______________检测。

(1)图中cDNA文库________(填“大于”、“等于”或者“小于”)基因组文库。

(2)①过程提取的DNA需要________________的切割，B是________________过程。

(3)为在短时间内大量获得目的基因，可用________________扩增的方法，其原理是____________________________________。

(4)农杆菌中的Ti质粒上的________________具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的DNA上的特点。目的基因能否在棉株体内稳定遗传的关键是______________________________________________________________________，可以用________________________技术进行检测。

(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性，需要对现有蛋白质进行改造，这要利用基因工程的延伸——蛋白质工程。首先要设计预期的________________________，再推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________________________________________。

注：图中通过过程①、②形成重组质粒，限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G^↓GATCC—，限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—^↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点，在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

（1）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接        ，理由是：                                  。

（2）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是              。可以利用转基因克隆猪技术解决的医学难题是，在器官移植中可以避免                 。

（3）上述图中转基因克隆猪运用了基因工程、                 、          等生物技术。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：          （用数字表示）。①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。

(1)在番茄新品种的培育过程中，将目的基因导入受体细胞采用最多的方法是________，筛选出含重组DNA的土壤农杆菌时通常依据质粒上的________的表达。

(2)为促使图中②、③过程的顺利完成，需要在________条件下进行。要快速繁殖转基因抗软化番茄植株，目前常用的科技方法是________。为获得这种番茄的脱毒苗，应用其________进行培养。

(3)除了图示培育方法外，还可通过蛋白质工程技术，对________的结构进行特定的改变，从而获得抗软化的番茄品种，关键的操作是对________进行定向改造。

(4)为防止转基因番茄通过花粉将抗多聚半乳糖醛酸酶基因传播给其他植物而造成基因污染，可将抗多聚半乳糖醛酸酶基因导入番茄植物细胞的_____         _  (结构)中。

科学家通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接，实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造，生产出对人体的不良反应减少、效果更好的鼠一人嵌合抗体，用于癌症治疗。如图表示形成鼠一人嵌合抗体的过程。请据图回答：

(1)鼠源杂交瘤抗体就是从免疫小鼠的脾脏细胞中获取B淋巴细胞，在诱导剂的作用下与             融合，形成杂交瘤细胞，并

通过体内培养或体外培生产单克隆抗体。这种抗体与普通血清抗体相比较，最主要的优点在于它的             ，可大量制备。

(2)与植物原生质体的融合相比，动物细胞融合在诱导融合方面的主要区别是还常用             诱导融合。

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养B淋巴细胞，主要原因是             。人体内的抗体中             细胞合成分泌的。

(4)科学家通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠一人嵌合抗体基因，然后导入到鼠淋巴细胞中，这个过程中用到的工具酶有             、             ，改造抗体属于             工程的范畴。

（1）将_______注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞能产生抗该抗原的抗体。

 （2）在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞核骨髓瘤细胞，是因为它们融合的杂交瘤细胞具有______________________的特性。

（3）单克隆抗体制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合的细胞工程技术手段。动物细胞培养的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有__________________。在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用_______处理组织细胞使之分散开。

（4）鼠源杂交瘤抗体与普通血清抗体相比较，具有_________________的特点。

（5）改造鼠源杂交瘤抗体，生产鼠-人嵌合抗体，属于蛋白质工程的范畴，图示过程是根据预期的___________设计___________ 最终必须对基因进行操作。

(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有________________________、________________________。(写出其中两种)

(2)图中A、B分别表示________________________________________、________________________________。

(1)培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中,其核心步骤是　             ,通过该操作形成了图中的　　 (填字母),它的构成至少包括　                          。  

(2)在研究过程中获取了目的基因后采用　　     技术进行扩增。在构建c的过程中目的基因用　　   (填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)进行了切割。检验重组载体导入能否成功,需要利用　　        作为标记基因。 

(3)过程d通常采用　　      法,除此之外，还有        和        等。过程e运用了　     技术,在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行　       和         。

(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好,则需要通过          工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计 。该工程是一项难度很大的工程，目前成功的例子不多，主要原因是                               。 

(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的____________，然后改变植酸酶的______________，从而得到新的植酸酶。
(2) 培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是______________。

(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过__________________________转入猪的受精卵中，培育出转基因猪个体。